2株樱桃腐败真菌的鉴定及贝莱斯芽孢杆菌对其抑制作用

为了获得绿色、安全的樱桃天然防腐保鲜剂,从腐败的樱桃上分别分离出2株主要的腐败菌,经菌落形态和分子生物学鉴定,初步鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata)和总状毛霉(Mucor racemosus),分明命名为BC-1和SC-1。从实验室保存的菌种库中筛选出两株对樱桃腐败菌抑菌效果较好的芽孢杆菌,通过形态学及分子生物学鉴定,初步确定均为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),分别命名为KA-2和XK-5。采用LB和landy培养基发酵两株菌,用贝莱斯芽孢杆菌的两种培养基发酵液酸沉后浸泡的方法研究其对樱桃的防腐保鲜作用,发现贝莱斯芽孢杆菌XK-5 landy发酵液酸沉提取物具有更好的防腐保鲜作用。该贝莱斯芽孢杆菌菌株有望作为生产新型绿色、安全的生物防腐保鲜剂的优良菌种。

产淀粉酶和蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及其酶学性质分析

从分离自土壤的芽孢杆菌中筛选产淀粉酶和蛋白酶的菌株,对其进行形态学观察、生理生化试验及分子生物学鉴定,并对筛选菌株所产的淀粉酶和蛋白酶进行酶学性质分析。结果表明,筛选到产淀粉酶和蛋白酶菌株CX-47,菌株CX-47被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。酶学性质分析结果表明,菌株CX-47所产淀粉酶和蛋白酶具有相同的最适反应温度(50℃)和最适反应p H(7.0);K^(+)和Ca^(2+)对菌株CX-47所产淀粉酶催化活性具有一定的促进作用,而Li^(+)和Mn^(2+)则有一定程度的抑制作用;K^(+)、Li^(+)、Ca^(2+)和Mn^(2+)均可显著提高菌株CX-47所产蛋白酶的活性(P<0.05)。

工程教育中非技术能力培养课程体系与评价——以食品科学与工程专业为例

在从事工程活动的过程中,沟通、职业规范等非技术能力起到了非常重要的作用,因此工程教育认证标准提出了4项非技术能力标准,但是传统高等工程教育对非技术能力的培养与评价有所忽视。基于此,文章分析了非技术能力培养和评价存在的问题,并以徐州工程学院食品科学与工程专业为例,构建了非技术能力培养的课程体系,提出了培养方法。针对目前非技术能力评价中的难点,设计了可行的评价方法。

链霉菌HMJ-7的鉴定及其抗菌物质稳定性分析

为获得新型抗菌活性物质并应用于食品防腐,用土壤溶液悬浮法从江苏徐州奎河边上的土壤样品中分离到了一株链霉菌菌株,命名为HMJ-7。采用打孔法验证其产生的抗菌物质的抗菌能力,结果表明:该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌等细菌以及酵母菌都有良好的抑制作用,抑菌圈直径都在2 cm以上。对黑曲霉、黄曲霉、米曲霉等霉菌没有抑菌活性;通过对HMJ-7菌株形态特征、培养特性、生理生化性状以及16S rDNA序列分析,初步将该菌株鉴定为链霉菌属灰红紫类群灰红链霉菌(Streptomyces griseoruber);采用不同的温度、pH、有机溶剂、紫外线条件处理该菌株产生的抑菌活性物质,并分别通过打孔法测定其对蜡样芽孢杆菌的抑制活性。结果显示,这些条件对抑制活性没有明显影响,说明该抗菌物质比较稳定。上述结果表明,HMJ-7菌株有较大的利用潜力,也为进一步分离纯化其抑菌物质提供了依据。

响应面法优化大豆分离蛋白提取及复合酶解制备活性肽

用碱提酸沉法从大豆中提取大豆分离蛋白,并经单因素及响应面优化法确定大豆分离蛋白最佳提取工艺为碱提时间60 min、碱提温度60℃、碱提pH值11.0、酸沉pH值5.0。使用最佳提取工艺提取大豆分离蛋白提取率为29.25%。用胰蛋白酶、糜蛋白酶分别酶解大豆蛋白产生的肽均具有抑菌活性,而采用胰蛋白酶与糜蛋白酶复合酶解大豆分离蛋白,产生的活性肽抑菌活性比单酶酶解产生的更高,且对蜡样芽孢杆菌抑菌活性最高,抑菌圈直径可达19.8 mm。通过对DPPH自由基的清除率检测复合酶解获得活性肽的抗氧化活性,发现其对DPPH自由基的清除率达到37.5%,比胰蛋白酶、糜蛋白酶单酶酶解获得的活性肽抗氧化活性都强,说明大豆分离蛋白经复合酶解后产生了具有较高抑菌活性和抗氧化活性的活性肽。

生防细菌NCD-2突变体构建及抑菌功能基因的防病作用

生防细菌NCD-2是一株枯草芽孢杆菌菌株,该菌株通过分泌抑菌肽而对棉花黄萎病病原菌和棉花立枯病病原菌起到抑制作用。本研究着重通过原生质体法与诱导转座方法,建立了携带转座子Tn917质粒pTV1对枯草芽孢杆菌NCD-2野生菌株的转化体系与转座子突变技术,获得1500多个转座子插入突变子。通过测定这些突变子对大丽轮枝菌的抑制作用,筛选到2个抗生作用丧失的抑菌功能缺失的突变子。室内盆栽试验结果表明这2个抑菌功能缺失突变子对棉花立枯病的防效显著低于野生菌株,说明NCD-2野生菌株产生的抑菌肽在该菌株防治棉花立枯病中起到主要作用,进而说明编码该抑菌肽的基因在该菌株防治棉花立枯病中具有重要作用。

链霉菌HMJ-7抑菌物质发酵优化及纯化

为提高HMJ-7菌株的抑菌能力并明确其抑菌物质,对前期筛选得到的具有显著抑菌活性的灰红链霉菌HMJ-7菌株的发酵条件进行了优化,结果表明,灰红链霉菌HMJ-7产生抑菌活性物质的最佳发酵条件为:温度37℃、起始pH7、接种量1%、转速180 r/min和发酵时间为4 d。经发酵条件优化,抑菌活性明显得到提高,抑菌圈直径能达到25 mm以上。利用硫酸铵分级沉淀法、Sephadex G-75分子筛、半制备型高效液相色谱(HPLC)和"724"阳离子交换树脂对其产生的抑菌活性物质进行了初步分离纯化。使用硫酸铵分级沉淀法、Sephadex G-75分子筛和半制备型高效液相色谱(HPLC)都获得了单一的活性组分,而利用"724"阳离子交换树脂未能活性组分分离开。说明Sephadex G-75分子筛和半制备型高效液相色谱(HPLC)适于分离纯化灰红链霉菌HMJ-7产生的抑菌物质。这些结果为HMJ-7产生的抑菌物质的结构鉴定及新型抗生素的开发提供了基础资料。

一株产高活性多酚氧化酶菌株筛选鉴定及其酶学性质

采用变色圈法从土壤样品中分离筛选产多酚氧化酶的菌株,对其进行形态学观察、分子生物学鉴定,并对其所产多酚氧化酶的酶学性质进行研究。结果表明,筛选得到1株产多酚氧化酶活性较高的菌株,命名为ZL-2,其被鉴定为竹黄菌属(Shiraia sp.)。菌株ZL-2发酵8 d产多酚氧化酶酶活最高,达到521 U/mL。菌株ZL-2产多酚氧化酶最适底物为邻苯二酚,其最适pH值为6、最适温度为30℃;酶活在温度20~40℃及pH 3~6范围内稳定。金属离子Cu^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、Fe^(3+)、Zn^(2+)对多酚氧化酶都有激活作用,其中Cu^(2+)激活作用最强;Ca^(2+)、Al^(3+)对酶活有一定抑制作用;L-抗坏血酸和亚硫酸氢钠对该酶抑制作用较强。

蕈状芽孢杆菌SH-1抗菌活性物质发酵条件优化

从土壤中筛选到一株芽孢杆菌SH-1,该菌株能够产生抑制多种细菌的活性物质,初步确定该菌株为蕈状芽孢杆菌.通过单因素实验及正交实验对蕈状芽孢杆菌SH-1菌株所产生抗菌物质的发酵条件进行优化,采用牛津杯法测定该菌株所产抗菌物质的抑菌活性,最终确定蕈状芽孢杆菌SH-1菌株产生抗菌物质的最适发酵条件为:温度36℃,pH8,转速180r/min,接菌量体积分数4%,发酵时间24h.

牛蒡和苔干复配提取物的抑菌活性及其防腐保鲜作用

试验选择提取温度、提取时间、复配比及乙醇浓度4个因素进行单因素试验,确定其提取条件范围。采用正交试验方法获得最佳提取工艺条件。结果表明,牛蒡和苔干复配物有效成分提取的最佳工艺条件为:提取温度为65℃,提取时间为60 min,复配比为4∶6,乙醇浓度为40%。抑菌试验结果表明,复配提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌等常见食品腐败菌都有较好的抑制效果。用复配提取物处理小番茄、香蕉、馒头,以无菌水和0.5%山梨酸钾处理作为对照,通过腐烂指数和食品表观特征的观察确定了复配提取物对小番茄、香蕉、馒头具有良好的防腐效果。

启动子P_(43)表达关键酶基因对subtilosin A合成的调控作用

为提高枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)细菌素subtilosin A的产量使其能够应用到食品防腐、医药卫生等行业。采用重叠延伸PCR将强启动子P43分别和subtilosin A合成酶基因簇中关键酶基因sbo-albA、albB-albC连接到一起,构建了高表达载体。采用改进的电击法将重组载体转化到Bacillus subtilis 168中,通过高效液相色谱(HPLC)检测,确定subtilosin A产量得到了提高,进一步通过抑菌实验证明其抑菌活性也获得了提高。该方法为提高subtilosin A产量,进而应用到生产实践中提供了理论参考。

PMMA塑料光纤衰减测量的研究

介绍了塑料光纤衰减的测量方法 ,研究了 2种塑料光纤端面处理方法对光纤衰减的影响 .用所研制的塑料光纤衰减谱仪测量了本实验室制备的塑料光纤的衰减谱 ,最低损耗小于2 0 0 d B/km( 65 0 nm)

棉花病害拮抗菌SC-4鉴定及其抗菌物质分离纯化

从徐州工程学院周围多点取土样,筛选得到一株对多种细菌、真菌(尤其是引起棉花病害的真菌,如棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌、棉铃红腐病菌)具有较好抑制作用的放线菌菌株,命名为SC-4.通过形态学、生理生化实验以及菌株16SrDNA序列分析,初步确定其为淡紫灰链霉菌类群中的灰褐链霉菌.通过硫酸铵沉淀获得样品,再经高效液相色谱分离,获得4个组分,其中组分2对棉花致病菌有较好的抑制作用.该研究对于新型生物农药的开发以及棉花病害生物防治具有一定意义.

窑湾甜油中霉菌和酵母菌的鉴定及其淀粉酶性质

从窑湾甜油面菌块中,分别筛选得到一株霉菌菌株和一株酵母菌菌株。霉菌通过形态学鉴定,初步确定霉菌为毛霉科的爪哇毛霉(Mucor javanicus),命名为DCF-4。酵母菌通过形态特征、生理生化特征分析,初步确定为酒香酵母菌属(Brettanomyces),命名为XYS-2。对其淀粉酶酶学特性进行研究,结果表明:爪哇毛霉和酒香酵母菌产生淀粉酶酶活分别达到535.33U,759.03U。进一步对两株菌产生的淀粉酶酶学性质进行研究,结果显示爪哇毛霉DCF-4产生的淀粉酶(淀粉酶Ⅰ)最适温度为80℃,最适pH为6.6,Ca2+,Mg2+,K+对其酶活性有激活作用,而Fe2+对其酶活有一定抑制作用;酒香酵母菌XYS-2产生的淀粉酶(淀粉酶Ⅱ)最适温度也为80℃,最适pH为5.0,Ca2+,Ba2+,Na+对其酶活性有激活作用,Cu2+对其有明显酶活抑制作用,达到90%左右。有机溶剂对两种淀粉酶活性都具有较强的抑制作用。

塑料光纤折射率分布的测量方法

介绍了国内外测量塑料光纤折射率分布的几种主要方法 ,包括近场折射法、横向干涉法和方向偏转法 ,并简述了它们的测量原理及应用。

采用回复电压法分析油纸绝缘老化特征量

为将回复电压法用于电力变压器绝缘老化状态的无损诊断,通过实验室加速热老化实验,研究了不同老化程度下油纸绝缘回复电压各参数(回复电压最大值、初始斜率、中心时间常数)的变化规律;考虑到水分对回复电压参数的影响,亦对比分析了老化油纸绝缘试品干燥处理前后回复电压参数的变化。在原有回复电压参数的基础上,提出了一种新的可用于评估油纸绝缘老化状态的参数—电压相对稳定值。该参数可以反映回复电压曲线的后期信息,而且与油纸绝缘老化程度和水分质量分数都有着密切的关系。研究结果表明:回复电压各参数与老化有很好的线性关系,但水分的增加会降低其线性优度;随着老化程度的增加,回复电压最大值增大,中心时间常数减小,初始斜率增大,电压相对稳定值增大;充电时间对回复电压参数也有影响。

油纸绝缘热老化特性及生成物的对比分析

对由普通25#矿物油、以Biotemp为代表的植物油和普通绝缘纸、热稳定纸组成的4种油纸绝缘试品在90、110和130℃ 3种温度下开展了热老化实验,测量并记录了老化过程中绝缘纸的聚合度、油中糠醛、CO、CO2以及油酸值和微水含量等老化特征参数和变化规律,并首次系统地对比分析了不同绝缘组合的老化特性,探索不同绝缘材料老化生成物的相关性关系,为传统的老化特征参量应用于不同油纸绝缘系统的老化诊断提供了依据,并为拓展变压器寿命预测理论奠定了基础。

变压器油纸绝缘热老化特性及特征量研究

对25#变压器矿物油、以BIOTEMP为代表的植物绝缘油、普通牛皮纸和热稳定绝缘纸材料构成的油纸绝缘试品进行了加速热老化实验,对老化过程中绝缘纸的聚合度变化规律及老化特性进行了对比分析,并对油中水分、糠醛含量这两个重要的老化特征参量的变化规律及其与聚合度的相关性关系进行了研究。研究的主要目的是探索新型绝缘材料的老化特性,为传统的老化特征参量应用于新型油纸复合绝缘材料构成的变压器老化诊断提供依据,并为拓展变压器寿命预测理论奠定基础。

水分对油纸绝缘热老化速率及热老化特征参量的影响

本文设计了在110℃和130℃下初始含水量分别为1%、3%、5%的绝缘纸试品在变压器油中的老化试验。系统地研究了不同初始含水量对油纸绝缘热老化速率的影响,分析对比了老化过程中的绝缘纸聚合度、纸中含水量、油中含水量、油中糠醛含量、油中酸值等老化特征参量的变化趋势。研究结果表明:初始含水量从1%增长到3%的绝缘纸平均降解速率的增长率比初始含水量从3%增长到5%时大得多,且从3%增长到5%时降解速率的增长率已经很小,有趋于饱和的趋势;老化过程中油中水分与纸中水分均是波动的,二者的波动幅度有较好的正相关关系,且二者整体上波动趋势的关系与初始含水量有关;水分含量及其变化趋势能影响老化过程中糠醛、酸等老化特征产物的变化趋势。因此本文提出应根据整个老化过程中油、纸二者水分含量整体上波动趋势的关系及波动幅度的大小来对变压器油纸绝缘进行状态评估及受潮分析,并建议在根据传统的油中糠醛、酸值等老化特征参量来对油纸绝缘进行状态评估及故障诊断时需充分考虑水分的影响。

初始水分含量对油纸绝缘热老化特性的影响

为探讨初始水分含量对变压器油纸绝缘老化过程的影响机制,设计了绝缘纸初始水分质量分数分别为1%、3%、5%的矿物油-纸绝缘试品在90°C下的加速热老化试验,定期取样测量了绝缘纸聚合度、油纸绝缘水分质量分数、油中糠醛质量浓度、油中酸值等特征参量。然后,在分子模拟软件内建立了不同含水量的矿物油分子、糠醛分子、水合氢离子模型,通过分子动力学模拟技术计算了糠醛分子及水合氢离子与不同水分含量油分子模型之间的扩散系数、相互作用能、径向分布函数。实验结果表明:绝缘纸和矿物油中水分含量在老化过程中均是波动的,油中糠醛和酸值在老化过程中的变化趋势未与绝缘纸聚合度的下降规律相对应,受系统水分含量的影响较大。分子模拟结果表明:水分的增加显著降低了糠醛及小分子酸的扩散能力,并与糠醛及小分子酸形成稳定的氢键;同时,水分与糠醛及小分子酸的极性作用改变了彼此的相互作用能。实验数据与分子模拟结果相互验证,为深入研究油纸绝缘的老化机理及诊断提供了理论参考。