非洲猪瘟病毒B602L蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

【目的】非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)是对生猪养殖业危害极大的一种病原体,B602L蛋白作为其重要的非结构蛋白,是衣壳蛋白p72折叠为正确的三级结构的伴侣分子之一,在病毒组装成二十面体结构的过程中发挥着关键作用。特异性抗体对于抗非洲猪瘟免疫应答机制及血清学检测方法研究具有重要意义,本研究旨在获取ASFV B602L蛋白,并制备抗ASFV B602L蛋白的多克隆抗体,为ASFV B602L蛋白功能研究及相关诊断试剂的研发提供材料。【方法】以ASFV China/2018/AnhuiXCGQ株的B 602 L基因为研究对象,应用生物信息学软件对B602L蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、抗原性和蛋白结构进行分析后,利用同源重组的方法将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后经诱导表达获得B602L重组蛋白,利用镍柱亲和层析进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting对B602L蛋白纯化效果进行验证。将纯化后的B602L蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接ELISA方法测定多克隆抗体效价,通过Western blotting和Dot blotting检测多克隆抗体特异性。【结果】生物信息学分析表明,B602L蛋白属于稳定性亲水蛋白,无跨膜区和信号肽。二级结构主要含有α-螺旋(54.91%)、延伸链(9.81%)和无规则卷曲(32.08%)。成功构建了ASFV B602L重组质粒,SDS-PAGE和Western blotting结果显示,重组菌pET-28a-B602L-BL21在16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导下高效表达,获得的重组蛋白主要表达在BL21菌株上清中,大小约为70 ku,且能与ASFV阳性血清特异性结合。间接ELISA检测结果显示,制备的抗B602L鼠源多克隆抗体效价达1∶409600,Western blotting和Dot blotting试验结果表明,抗B602L鼠源多克隆抗体能够特异性识别B602L蛋白。【结论】原核表达的B602L重组蛋白具有良好的免疫原性,能够与ASFV阳性血清特异性结合,制备的鼠抗ASFV B602L蛋白多克隆抗体具备较好的生物学活性。本试验结果可为进一步研究ASFV B602L蛋白的生物学功能和非洲猪瘟诊断方法的建立提供生物材料和理论支撑。

非洲猪瘟病毒p10蛋白和p49蛋白的生物信息学分析及表位预测

运用多种生物信息技术对非洲猪瘟病毒(ASFV)Georgia 2007/1株p10蛋白和p49蛋白的理化性质、二级及三级空间结构、抗原性、抗原决定簇进行初步分析,并预测其B、T淋巴细胞优势表位。结果表明,p10是亲水性蛋白,含有2个抗原决定簇,该蛋白α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链的比例为32.05%、11.54%、52.56%和3.85%;p49同样是亲水性蛋白,含有17个抗原决定簇,其α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链的比例依次为29.91%、7.53%、55.94%和6.62%。基于以上分析,p10不适合用于ASF疫苗制备的候选蛋白;而p49作为亲水性衣壳蛋白,具有一定免疫原性,有望成为疫苗研制的备选蛋白,为ASFV蛋白研究和疫苗研发提供一定参考。

医疗服务支付方式的比较和运用

在整个医疗保险体系中,作为医疗保险费用管理和控制的关键环节,如何选择适当的医疗费用支付方式是一个重要内容。文章首先介绍了医疗服务的支付方式,并对各种支付方式优劣进行了比较,最后对各国卫生服务系统支付方式发展和运用进行了探讨,从而为我国的医疗保险制度改革提供参考。

定点医院医保服务管理工作的难点及建议

定点医院作为医保政策的执行者、医疗服务的提供者、医保管理的实践者,在推行医疗保险制度改革中起着非常重要的作用。在现行体制下,医保服务协议的时效性不足,医院医保超支压力以及对医保政策解释的压力过重,医院无法满足部分参保患者非正常医疗需求,针对这些情况医院提出建立医、保、患三方风险共担的医疗保险模式框架和医、保、患之间健全畅通的宣传沟通反馈机制。

积极采取措施 主动适应“全民医保”时代

我市"全民医保"时代即将来临。面对这样的大环境,医院如何在激烈的医保市场竞争中获得主动,吸引更多的参保人就医,本文提出以下几点建议:及时转变观念,提高医务人员医保意识;合理控制费用,正确贯彻实施医保政策精神;优化服务流程,不断提高医保服务水平;增加医院品牌效应,吸引异地参保人就医;继续拓宽医保市场,促进医院发展等。

广东省某大型综合医院医保费用超支影响因素分析

目的探索影响广州医保普通住院医保定额超支的因素。方法对某三甲综合医院2014年7月1日—2015年6月30日,对普通住院结算的广州医保参保人医保超支影响因素进行分析。结果年龄、人员类别、住院天数、是否抢救病人、是否手术、病例分型、入院途径是影响医保超支的危险因素。结论住院时间越长,入院途径不明确,医保超支的机率越大;年龄特征、人员类别诱发医保超支;其他来自政府、医保制度以及医院管理方面的因素影响医保超支。

地方政府托管办院模式分析

为满足新兴城区和欠发达地区优质医疗资源需求,突破大型医院发展瓶颈,地区政府与大型医院合作办院越来越多。文章根据协作双方对土地、基本建筑、医护人员、医疗设备等项目的不同投入程度,对办院模式分为托管、接管、合作三种模式。以中山大学附属第三医院岭南医院为例,通过SWOT分析法对托管办院模式的优势、劣势、威胁与机会进行了分析,充分认可了托管办院这一模式的合理性,并提出在吸引、留住人才和产权问题两个方面的建议,以期对协作办院的进一步完善提供思路。

按病种分值付费下医院医保控费管理实践分析

按病种分值付费政策的实施,对医院控费管理提出了变革性要求。医院作为医保政策落地的实践者,其在医保控费管理所做的探索与成效,直接反映了医保支付方式改革效果。本文以广州市某大型三甲综合医院为研究对象,通过深入剖析按病种分值付费支付方式对医院带来的各方面影响,呈现全流程的医保智能控费管理模式的构建过程,进一步分析按病种分值付费政策对医院控费管理实施效果的影响,提出了支付方式改革下控费管理的进一步探索与共建方向。

大学生时事政治关注情况调查分析

为进一步了解大学生对时事政治关注情况,对509名在校大学生进摸底调查.调查结果表明,高校时事政治教育课程的开设取得了较为显著的成绩,但仍存在课程开设不够正规、师资力量薄弱以及教学方式单一等问题.

加强医院医保服务能力建设的内外路径

随着医保覆盖面的不断扩大,服务人群不断扩宽,医保服务需求不断增加,这都对医院医保服务能力建设带来了重大的机遇与挑战。从医院医保服务工作实践出发,分析了在医保工作中针对服务客体需求进行的医保服务能力建设的重要性。分别从内部建设和外部建设探讨了加强医保服务能力建设的实践路径。

深圳市宝安区参保、未参保劳务工卫生服务需要与利用的比较分析

目的通过对参保和未参保劳务工卫生服务需要及利用的比较分析,了解劳务工合作医疗制度的实施现状,为进一步推进劳务工合作医疗制度的发展提供参考依据。方法采用分阶段随机抽样对深圳市宝安区2000名劳务工进行问卷调查。结果与未参保劳务工相比,参保劳务工的两周患病率高(P<0.05),慢性病患病率低(P<0.05),两周未就诊率低(P<0.05),在住院服务利用上两者没有显著性差异(P>0.05)。结论深圳市宝安区劳务工合作医疗制度总体开展良好,提高了劳务工对门诊服务的利用,但住院服务利用率仍偏低。

深圳市宝安区劳务工卫生服务需要及其影响因素分析

目的了解深圳市宝安区劳务工卫生服务需要及其影响因素。方法采用多阶段随机抽样方法于2007年对深圳市劳务工进行健康询问调查。结果深圳市劳务工两周患病为18.9%。采用logistic回归,筛选出影响两周患病率的主要因素为文化程度、从事行业、工作的稳定性、单位性质。结论深圳市劳务工的卫生服务需求处于较高水平,应建立健全劳务工合作医疗制度,以满足劳务工的卫生服务需要。

六西格玛管理在矿山企业推行及思考

某矿山推行六西格玛管理,由最初的聘请咨询公司人员授课到逐步培养自己的人才,在质量改进方面取得了成效,但存在未设立专职推进人员,项目选择与关注流程结合不紧密等问题,提出了应结合企业自身实际,在培养六西格玛人才的同时注重全员参与,实现六西格玛管理文化与本土文化的融合。

医保智能审核中医保拒付原因及对策分析

目的完善医保智能审核管理,规范医疗机构诊疗行为,提升医保基金使用效益。方法分析广州市某三甲医院2018—2020年广州医保智能审核数据,明确医保拒付原因,并提出改进的举措和建议。结果2018—2020年医院医保拒付金额呈上升趋势,2019、2020年同比增长率依次为26.8%、1.3%。其中,违反限定适应症用药的医保拒付金额逐年上升,2019、2020年同比上升依次为291.2%、17.4%,增长幅度明显下降;诊断合理性审核、限儿童的医保拒付金额呈下降趋势。结论医院可通过强化医保管理信息支撑、完善医保全流程管理等,规范医疗和医保服务、降低医保拒付。医保经办机构可以通过强化医保智能审核管理、完善审核规则等,提升医保智能审核工作效能,维护医保基金安全。

医保智能审核在医院管理中的实践和思考

目的规范医疗机构诊疗行为,提高医保智能审核的水平与效率。方法分析广州市某三甲医院2018年医保智能审核数据,探讨医保智能审核过程中发现的问题及医保拒付的原因,探索完善医保智能审核的方法和措施。结果2018年医院被抽查医保智能审核条目17503条,医保拒付条目1983条,医保拒付金额176251.3元。医保拒付条目最多的项目为违反限定适应症(条件)用药(占41.3%)和超限定频次(占34.1%)。医保拒付金额最多的项目为限儿童(占35.1%)和违反限定适应症(条件)用药(占17.7%)。结论医保经办机构应协同相关部门完善医保智能审核系统和医保智能审核规则,医疗机构应完善医保管理体系、加强医保管理信息化和数字化建设,共同推进医保管理工作的发展。

依靠技术进步开拓前进——从左权电器厂的实践得到的启示

左权县电器厂有47名职工,2名厂领导(兼技术员),20万元固定资产,是科研和生产一体化新集体企业。他们依靠技术进步,研制出不少电器新产品,其中有3项获得国家专利权,经济效益和社会效益也十分喜人。这个厂的实践使我们得到不少启示。 颇有胆识的技术开发 左权电器厂前身是1984年成立的左权电器服务公司,1986年4月由上级批准改为电器厂。经过近半年的技术培训,于1986年11月投产。投产二年来。