应用高效液相色谱法定量检测重组人干扰素α1b

目的 寻找一种快速检测重组人干扰素α1b含量的方法。方法 采用美国Waters 600型高效液相色谱仪,选用Protein-Pak125 7.8mm×300mm柱,以25mmol/L pH7.0磷酸缓冲液为流动相,流速为1ml/min,检测吸收波长为280nm,以外标法按峰面积计算回收率。结果 平均回收率为95％,s=2.9％。结论 高效液相色谱法可以用于检测重组人干扰素α1b的含量,而且灵敏度高,结果准确。

小鼠脾淋巴细胞UDS的辐射效应研究

本实验采用UDS的检测,判断不同剂量电离辐射对脾淋巴细胞损伤后DNA修复能力的影响。结果显示,大剂量(0.5～6.0Gy)X射线全身照射后24h脾淋巴细胞UDS呈剂量依赖性抑制,剂量效应关系呈线性,无肩区。小剂量(25～250 mGy)X射线单次全身照射后24 h脾淋巴细胞UDS的变化与大剂量效应不同,50 mGy组呈现明显的刺激效应(P<0.05)。低水平Y射线持续照射(剂量率5.4m Gy/6 h·d)4周末,累积剂量130mGy脾淋巴细胞UDS也呈现明显的刺激效应(P<0.02)。实验资料说明,大剂量电离辐射对脾淋巴细胞DNA切除修复能力有抑制作用,而小剂量能产生刺激作用,并且引起刺激的总剂量因剂量率的不同而异。

细小病毒与致癌蛋白质序列同源性比较佐证细小病毒无致癌潜力

在Micro Vax II及IBM/PC机上用Framis,Genepro软件,蛋白质、核酸序列数据库Swissprot,PIR,EMBL和Genbank,比较了H-1或MVM的四种蛋白质与现已报道的致癌蛋白质序列的同源性。结果表明,它们之间的配对百分数很低且是随机的,这可能是细小病毒没有致癌潜力的佐证。本实验室还初步证明PV MVM可以杀死经人Ha-ras与v-myc共转染大鼠胚胎成纤维细胞形成的转化细胞,这将为临床治疗抗放射线的人癌提供新途径。

重组人α干扰素单克隆抗体的研制及其应用

目的 研制抗干扰素的单克隆抗体 (McAb)及其应用。方法 应用杂交瘤技术 ,获得 4 0株抗重组人α干扰素的单克隆抗体细胞株 ;用ELISA方法检测腹水滴度 ,用辛酸法纯化McAb。结果 4 0株细胞中 2E9、4G1能稳定分泌抗重组人α1b干扰素的单克隆抗体 ,2C9为抗重组新型干扰素 ,2A7、4G10分泌抗重组人α干扰素 (α1b、α2b、α2a、)和重组集成干扰素、重组新型干扰素的单克隆抗体细胞系 ;体外连续传代 6个月 ,分泌抗体能力不变 ,特异性专一。 5株单克隆抗体均为IgG。采用辛酸方法提纯抗体纯度达到 95 %以上。粗制的重组人α干扰素经 4G10单克隆抗体亲和层析柱提纯后 ,获得的干扰素纯度 95 %以上 ,平均收率 93% ,残余鼠IgG含量 <10 0ng 剂量 (5 0 μg)。 2C9单克隆抗体亲和层析柱适用于纯化新型干扰素。结论 4G10单克隆抗体亲和层析柱可以应用于大规模重组人α干扰素生产。