山东省地方山羊品种群微卫星基因座的遗传多样性

选用来源于牛和绵羊的27个微卫星DNA标记,对山东省4个地方山羊品种进行遗传多样性分析,通过计算等位基因频率、多态信息含量、不同标记的平均杂和度、总群体杂合度、亚群体杂合度、群体杂合度、基因分化系数、不同群体的F-统计量、基因流动数、不同群体间的基因流动个数和遗传距离并进行聚类分析,评估其种内变异和种间变异的关系,以群体平均杂合度、F-统计量和遗传分化系数为基础,结合四个山羊种群的实际生存状况,提出避免近交和种群间杂交符合山东山羊种群实际状况的保种模式。研究结果可为山东地方种质特性研究提供基础数据,为山东地方山羊种群的合理保护利用提供科学依据。

顶体反应的结构变化及影响顶体完整率因素初探

综述了不同动物的精子发生顶体反应时顶体的结构变化 ,研究者对此不同的观点 ,影响顶体完整率的四种因素 :冷冻 ,抗精子抗血清 ,培养液 。

探讨微卫星作为地方山羊品种生长性状的遗传标记

采用微卫星技术及最小二乘拟合线性模型,利用崂山奶山羊、济宁青山羊、鲁北白山羊和莱芜黑山羊4个地方山羊品种中的10个多态性微卫星基因座,分析了微卫星基因座及其等位基因对山羊生长性状的关联效应。结果表明:与品种、性别和年龄等因子比较,标记因子对山羊体重和体尺性状的影响较小,但发现BM6404、BM1818、BM812和BM6444基因座对体重有显著影响(P<0.05或P<0.01),BM6404、BM1818、BMS12484、MAF70基因座对主要体尺性状有显著影响(P<0.05或P<0.01)。BM6404基因座的等位基因130可能对山羊的胸围、体高、尻宽均有正效应;120对胸围有较强的负效应,而对体高、尻长则有较强的正效应;168对尻长、尻宽均表现为负效应。MAF70基因座的等位基因142对体长有正效应,178对体长有负效应。BMS1248基因座的等位基因128对管围有正效应。

中国明对虾组织蛋白酶L的原核重组表达及其组织分布

组织蛋白酶L属于半胱氨酸蛋白酶中的木瓜蛋白酶超家族,在哺乳动物中它与抗原提呈、肿瘤入侵和转移、骨质吸收、细胞凋亡等许多生命活动有关。但对其在无脊椎动物中的功能了解的不多。从中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)中克隆得到了组织蛋白酶L基因,为了进一步研究组织蛋白酶L的组织分布及其功能,对该基因进行了重组表达。将中国明对虾组织蛋白酶L基因的酶原片段亚克隆进原核表达载体pET30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),再进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳检测,其分子量在40kD左右,与期望的中国明对虾组织蛋白酶L的分子量一致。表达产物形成包涵体,经过对包涵体变性和复性,并进行His-tag柱亲和纯化,得到了纯化的蛋白。利用重组蛋白制备了的兔抗血清。Western实验表明,组织蛋白酶L在中国明对虾的肝、胃、肠中有表达,而在卵巢中没有表达。

侵袭性牙周炎与慢性牙周炎病变位点中人巨细胞病毒的定量检测

目的应用实时荧光定量PCR方法检测侵袭性牙周炎(AgP)及慢性牙周炎(CP)患者龈下样本中人巨细胞病毒(HCMV)的DNA载量,探讨HCMV感染与牙周炎之间的关系。方法选择18例AgP患者、24例CP患者及15例牙周健康对照者,收集龈下样本114例。构建含有HCMV高保守片段的重组质粒,制备标准品DNA模板,建立并应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测样本中HCMV的DNA载量。结果 AgP病变位点、CP病变位点以及牙周健康位点中HCMV的阳性检出率分别为58.3%、41.7%和6.7%。AgP和CP病变位点中HCMV的阳性检出率显著高于牙周健康位点(P<0.01)。在AgP病变位点中,病毒载量在104以上的位点占33.3%,明显高于CP病变位点的10.4%,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HCMV感染与牙周炎的发生发展密切相关,其活动性感染可能与AgP组织破坏的迅速进展有关。

甘氨酸螯合铁对乳猪生产性能的影响

甘氨酸螯合铁作为一种新型添加剂 ,目前还未全面推广应用 ,为使该添加剂能进一步在生产中推广应用 ,我们专门针对乳猪用甘氨酸螯合铁做了本次试验。在产前一个月的母猪日粮中添加甘氨酸螯合铁 ,结果发现其所产乳猪初生重比对照组提高 4 2 .4 %,死亡率降低 6.4 %,血液中铁的含量提高 2 4 .9%。母猪初乳中铁的含量比对照组提高 2 4 5%。

山东境内五个山羊种群生化遗传多态性研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE),对山东省境内山羊种群的血液生化遗传标记多态性进行分析。结果表明,所测5个山羊品种中,Tf、Akp及EsⅠ基因座均表现出多态性,Hb和EsⅡ基因座仅分别在崂山奶山羊和莱芜黑山羊品种中表现出多态性,Amy未表现出多态性;平均杂合度为0.2876,基因纯合系数在0.6以上,群体的遗传分化系数为0.02614,说明这些山羊群体的遗传变异较低,其97.386%来自群体内遗传多态现象。基于3个多态位点基因频率的系统发育分析证明,带有共同遗传基础的济宁青山羊、鲁北白山羊和崂山奶山羊遗传距离较近,引进的南非波尔山羊与4个地方山羊品种遗传距离最远。

小反刍动物遗传资源保护技术研究进展

小反刍动物(绵羊和山羊)占有许多特殊的小生境,表现出丰富的遗传多样性。在难以控制的生产系统内,其遗传资源保护状况远不如其他畜种。本文根据近年来世界动物遗传资源保护技术及国内种质研究资料,系统论述了小反刍动物遗传资源在主动保护、易位保护、繁殖及分子遗传技术应用等方面的最新进展,并阐述了其未来的研究机会和重点领域。

二烯丙基三硫醚对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用

目的探讨二烯丙基三硫醚(DATS)对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用,进一步研究生物膜耐药的机制。方法微量肉汤法测定药物的最小抑菌浓度,平板培养法构建幽门螺杆菌生物膜的体外模型,XTT法检测药物处理后浮游状态与生物膜状态下的幽门螺杆菌活性,激光共聚焦显微镜观察生物膜深层的细菌状态以及活性变化。结果克拉霉素与DATS对浮游状态的幽门螺杆菌均有良好的杀菌作用;使用不同浓度克拉霉素处理后的幽门螺杆菌生物膜活性明显低于对照组;DATS处理后的幽门螺杆菌生物膜活性下降明显,与对照组和克拉霉素组有统计学差异。结论 DATS对浮游状态和生物膜状态下的幽门螺杆菌均具有良好的杀菌活性,可以为耐药菌临床治疗提供参考。

大蒜素与两性霉素B体外联合应用抑制白色念珠菌菌丝形成的研究

目的研究大蒜素与两性霉素B体外联合应用对白色念珠菌菌丝形成的抑制作用,并检测联合应用时细胞毒性的变化。方法采用微量稀释法测定两类药物联合抗白色念珠菌的作用,采用FICI法对联用结果进行评价。用10%小牛血清RPMI1640培养基诱导菌丝形成,检测大蒜素与两性霉素B联合应用对白色念珠菌芽管率和菌丝形成的影响。通过对细胞形态的观察及MTT法检测联合用药后对人宫颈上皮细胞H8毒性的变化。结果两种药物联用对白色念珠菌表现为协同作用,大蒜素能够加强两性霉素B抑制菌丝形成的能力,联合用药后能够显著降低对H8细胞的毒性。结论大蒜素能够提高两性霉素B抗白色念珠菌的作用,是临床上减少两性霉素B用量,减轻其副作用的最佳选择。

医学微生物学实验线上教学的实践与思考

针对医学微生物学实验线上教学面临的诸多难题,本研究采取线上直播+操作视频+虚拟实验的授课模式,通过操作视频和虚拟实验弥补了操作上的缺口;考核模式采用紧扣操作流程的主观型思考题+实验设计+文献综述(围绕传统实验由于条件所限无法开展的临床检验重头技术或新技术,如质谱分析、荧光定量PCR、G实验等展开)的模式,从而可以较大限度了解学生对教学目标的掌握程度和综合应用、创新性思维等能力。学生调查问卷显示,大部分学生对线上实验教学模式持肯定态度,学生作业的完成质量表明大部分学生学习效果良好。

干酪乳酸杆菌代谢物对白假丝酵母菌生物被膜的体外抑菌效果及分子机制

目的研究干酪乳酸杆菌代谢物对体外白假丝酵母菌生物被膜的抑菌作用及其机制。方法通过萃取、蒸馏的方式浓缩干酪乳酸杆菌代谢物。采用甲基四氮盐(XTT)减低法测定干酪乳酸杆菌代谢物对白假丝酵母菌YEM30游离态及生物被膜态的最小抑菌浓度(MIC80),定量检测干酪乳酸杆菌代谢物对白假丝酵母菌体外代谢活动的影响,观察白假丝酵母菌形态学的转变,并通过双向凝胶电泳(2-DE)对比干酪乳酸杆菌代谢物处理前后白假丝酵母菌蛋白的表达差异。结果干酪乳酸杆菌代谢物对白假丝酵母菌的游离态、生物被膜态的最小抑菌稀释倍数分别为1∶256和1∶128。稀释倍数为1∶256的干酪乳酸杆菌代谢物可以明显干扰白假丝酵母菌酵母相向菌丝相的转化。比较双向电泳图谱上获得6个显著蛋白斑点,对其中的4个进行鉴定,结果显示在干酪乳酸杆菌代谢物的刺激下,烯醇酶、苹果酸脱氢酶、泛素连接酶表达升高,己糖激酶表达下降。结论干酪乳酸杆菌代谢物对体外白假丝酵母菌生物被膜具有抑制作用。

荧光巨细胞病毒的构建及活性检测

目的构建表达绿色荧光蛋白的巨细胞病毒Towne株,检测其活性,研究其在抗巨细胞病毒药物筛选中的应用价值。方法将PHM673质粒扩增纯化,采用脂质体转染法转入原代培养的人胚肺成纤维细胞,感染人巨细胞病毒,获得重组病毒GFP-HCMV,采用空斑法纯化重组病毒,采用PCR法鉴定,获得携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒。用抗病毒药物更昔洛韦进行干预,检测重组病毒荧光表达强度与药物浓度的关系。结果成功构建携带绿色荧光蛋白的重组巨细胞病毒,荧光病毒的活性与原始病毒的活性差异无统计学意义(P>0.05),生长繁殖并没有受到影响。重组病毒的荧光表达强度与抗巨细胞病毒药物更昔洛韦抑制病毒的效价有关。结论该荧光病毒可以作为研究病毒致病机制和抗病毒药物筛选的新型工具。

畜禽胚胎干细胞的研究进展

本文综述了主要畜禽胚胎干细胞的研究进展 ;归纳了胚胎干细胞的特性及影响其培养的因素 ;

人巨细胞病毒对兔平滑肌细胞LOX-1表达的影响

目的了解人巨细胞病毒(HCMV)感染对兔平滑肌细胞(SMC)凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响,探讨HCMV在动脉粥样硬化(AS)发生发展中的可能作用机制。方法采用RT-PCR、Western blotting等技术检测HCMV ADl69株感染的兔SMC中LOX-1的表达。结果HCMV感染兔SMC后,LOX-1表达明显升高(P<0.01)。结论HCMV可引起兔SMC中LOX-1的表达上调,这可能是HCMV参与AS的机制之一。

2016—2021年山东省11个地区摩根摩根菌的抗生素耐药变迁

目的 分析山东省2016—2021年摩根摩根菌的抗生素耐药变迁趋势,了解摩根摩根菌耐药特征,为临床合理用药提供数据支持。方法 回顾性分析2016—2021年山东省11个地区14家医院838株摩根摩根菌临床分离株的耐药数据。根据分离标本的组织来源不同,将摩根摩根菌分为泌尿系统(UT)组(n=271)、呼吸系统(RT)组(n=161)、皮肤软组织(SST)组(n=294)和其他组(n=112)。采用线性回归方法分析耐药率随时间的变化。采用Pearson χ^(2)检验或Fisher精确检验分析组间差异。结果 2016—2021年山东省摩根摩根菌对氨苄西林/舒巴坦的耐药率呈线性下降趋势(P=0.005),对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率呈线性上升趋势(P=0.006)。2017—2020年山东省摩根摩根菌对左氧氟沙星的耐药率均高于全国水平(P<0.05)。UT组摩根摩根菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、氨曲南、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、复方新诺明、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率高于RT组(P均<0.05);对庆大霉素、头孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率高于SST组(P均<0.05)。结论 山东省摩根摩根菌对多种抗生素的耐药性普遍较高,其中对喹诺酮类抗生素的耐药性最高,各级医疗机构应加强对喹诺酮类药物的合理应用。推荐使用头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟和阿米卡星作为治疗摩根摩根菌感染的一线药物。