注射用门冬酰胺酶蛋白质杂质研究

目的:考察注射用门冬酰胺酶中蛋白质杂质情况。方法:采用蛋白质分离纯化系统对蛋白质样品进行分离,采用蛋白质电泳及UPLC-Q-TOF-MS法分别对2个厂家样品中杂蛋白组分进行分析。结果:厂家A样品中共检出2种杂蛋白,杂蛋白总量为2.2%;厂家B中共检出19种杂蛋白,杂蛋白总量为7.2%。两个厂家中的杂蛋白均来源于大肠埃希菌。结论:建立的杂蛋白分析检测方法能有效检测出注射用门冬酰胺酶中蛋白质杂质的含量与来源。

Real-time PCR法检测注射用门冬酰胺酶制剂中大肠杆菌核苷酸残留

目的:建立可定量检测注射用门冬酰胺酶制剂中大肠杆菌核苷酸残留量的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,用于注射用门冬酰胺酶制剂中大肠杆菌核苷酸残留的质量控制。方法:选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶基因设计扩增引物,以ABI 7500 FAST平台为基础,建立基于SYBR Green荧光染料的Real-time PCR检测方法。结果:该法检测大肠杆菌核苷酸质量浓度在0.009 35~93 500 ng·m L^(-1)范围内线性良好,标准曲线的相关系数为0.999,定量限为0.009 35 ng·m L^(-1)。应用该法对2批注射用门冬酰胺酶制剂进行测定,均未检出大肠杆菌核苷酸残留。结论:该方法可用于注射用门冬酰胺酶制剂中大肠杆菌核苷酸残留的定量测定。