常用潜在不适当用药筛查标准联合自拟中药判断标准评估分析老年住院患者潜在不适当用药

目的 探讨医院老年住院患者潜在不适当用药(PIM)情况及影响因素,为临床合理用药提供参考。方法 纳入南京市中医院2021年10—12月116例老年住院患者病历,分别依照Beers标准(2019年版)、《中国老年人潜在不适当用药判断标准(2017年版)》和自拟中药PIM标准进行评价,并进行影响因素分析。结果 依据Beers标准共筛查14例次PIM,主要为苯二氮芯卓类药物;依据2017年版中国PIM标准共筛查49例次PIM,主要为氯吡格雷和神经系统药物;依据自拟中药PIM标准共筛查PIM 42例次,其中毒性中药、含毒性中药制剂相关PIM占40.5%。影响因素分析结果表明,科室和用药数量与PIM发生具有相关性(P<0.05)。结论 老年住院患者PIM发生率高,且老年患者广泛使用中药、中成药,探索性构建中药PIM标准并对老年住院患者医嘱进行PIM筛查,是保障老年患者用药安全的需要。

基于UHPLC-Q-TOF/MS与网络药理学探讨抗奥合剂1号方防治COVID-19的作用机制

目的:基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)、网络药理学及分子对接技术,探讨抗奥合剂1号方防治新型冠状病毒感染(COVID-19)的作用机制。方法:采用UHPLC-Q-TOF/MS对抗奥合剂1号方入血成分进行定性分析;采用网络药理学方法筛选抗奥合剂1号方活性成分、关键靶点并探讨作用机制。采用AutoDock软件对关键靶点及活性成分进行分子对接验证。结果:共鉴定抗奥合剂1号方入血成分31个,靶蛋白相互作用(PPI)分析筛选关键靶点105个,KEGG富集分析发现抗奥合剂1号方可能通过TNF、IL-17、PI3K-Akt等信号通路发挥抗COVID-19的作用。分子对接结果显示,关键靶点ALB、TNF、IL-6与抗奥合剂1号方中活性成分甘草酸、人参皂苷Rb1、阿魏酸结合良好。结论:抗奥合剂1号方可通过多成分、多靶点、多通路协同发挥防治COVID-19的作用。

丹红注射液7种药效物质基础的人血浆蛋白结合率

目的建立同时测定丹红注射液中7种主要药效物质基础丹参素、原儿茶醛等体外人血浆蛋白结合率的方法,并将结果与同等浓度条件下每个单体化合物的人血浆蛋白结合率进行比较,以考察两者是否存在显著性差异,由此推测多组分之间是否存在血浆蛋白竞争性结合。为丹红注射液主要药效物质基础的体内药动学,及其在临床联合用药时的体内药动学相互作用研究提供参考依据。方法采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,HPLC测定丹红注射液中7种成分,及每种成分单独透析平衡时的血药浓度及游离药物浓度。结果在3种浓度的丹红注射液中,丹参素、原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率分别为(11.88±0.58)%、(78.35±1.72)%、(63.48±2.17)%、(87.72±0.78)%、(82.77±2.83)%、(71.59±0.81)%和(70.55±1.34)%;而同等浓度条件下,这7种单体化合物的人血浆蛋白结合率分别为(23.34±1.06)%、(79.32±1.41)%、(78.97±0.08)%、(92.37±0.66)%、(84.95±0.38)%、(79.15±5.47)%和(75.49±0.75)%。与单体化合物的血浆蛋白结合率相比,丹参素、p-香豆酸和紫草酸在丹红注射液样品中的人血浆蛋白结合率差异有显著性;在本实验的药物浓度范围内,只有紫草酸的人血浆蛋白结合率与浓度呈线性;原儿茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率差异没有显著性。结论该测定方法简便易行,准确度、稳定性均较好。实验条件下,原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率均>60%,且在样品体系中这7种成分的血浆蛋白结合率均比单独给药的血浆蛋白结合率低,组分之间可能存在竞争性结合,但竞争影响可能较弱。考察血浆蛋白竞争性结合对该药的药物相互作用影响时,其组分间的相互竞争影响较小。

复方丹参滴丸与氯吡格雷抗血小板聚集协同作用

目的:观察复方丹参滴丸与硫酸氢氯吡格雷片抗血小板聚集的协同作用。方法:SD大鼠40只,随机分为4组,即空白对照组(灌胃等体积CMC-Na)、氯吡格雷组(灌胃氯吡格雷30 mg/kg)、复方丹参滴丸单独组(灌胃复方丹参滴丸324 mg/kg)和联合用药组(灌胃氯吡格雷30 mg/kg和复方丹参滴丸324 mg/kg),每组10只,雌雄各半,连续给药21 d,观察各组大鼠动-静脉旁路模型血栓形成的抑制效应;另取大鼠40只,给药后大鼠腹主动脉取血,测定各组间凝血四项参数;最后采用同源模建方法构建血小板聚集靶点P2Y12三维结构,进行模型验证和评价,研究复方丹参滴丸活性组分、氯吡格雷活性硫醇代谢物与靶酶间结合效应,多角度考察两种药物的抗血小板聚集协同增效。结果:除空白对照组外,其余各组均可在一定程度上抑制大鼠动-静脉混合血栓形成,延长出血时间,降低纤维蛋白酶原含量,合用组较单独用药组的上述作用增强,但差异无统计学意义;分子对接结果显示以MesATP为参照阈值(对接得分-5.150),复方丹参滴丸共有20个活性组分在阈值以上。结论:复方丹参滴丸能在一定程度上增强氯吡格雷抗大鼠血小板聚集,延长出血时间,降低纤维蛋白酶原、延长凝血时间,两种药物合用时体现出较好的抗凝血协同效应。

基于系统虚拟药理学复方丹参滴丸抗血小板聚集药效物质基础研究

目的:基于系统虚拟药理学研究复方丹参滴丸抗血小板聚集药效物质基础,对该复方作用效应在分子网络层面上进行探析。方法:选择了16个血小板聚集相关靶点,构建该组方化学成分分子数据库,探讨数据库分子与血小板聚集靶点间相互作用关系。结果:该组方与16个血小板聚集靶点均有一定的潜在协同效应;并应用药理学实验对部分数据进行了验证。结论:本实验从分子层次上阐释了复方丹参滴丸抗血小板聚集系统药效物质基础,为该组方的临床应用提供了科学依据;同时,也为寻找血小板聚集药物提供一定的参考和借鉴。

基于计算药理学的复方丹参滴丸对氯吡格雷代谢酶的影响

目的:研究复方丹参滴丸对参与氯吡格雷代谢酶人源肝羧酸酯酶CES1、细胞色素CYP450 3A4、CYP4502C19、CYP450 1A2、CYP450 2B6的影响,对其作用效应进行整体分析。方法:选择了上述5个氯吡格雷代谢相关靶点,构建组方化学成分分子配体,采用计算药理学方法探讨配体与5个代谢酶间相互作用特征。结果:分别以1MX1(CES1)、3NXU(CYP450 3A4)、4GQS(CYP450 2C19)、2HI4(CYP450 1A2)、3IBD(CYP450 2B6)为受体,THA、RIT、OXU、Chlorzoxazone、CPZ评价得分为阈值,组方中分别有29、8、31、51、44个化合物分子与代谢酶蛋白CES1、CYP450 3A4、CYP450 2C19、CYP450 1A2、CYP450 2B6间存在一定的结合效应,分析对接的结果与文献cocktail法得出的结论完全一致。结论:复方丹参方可在整体层面上抑制氯吡格雷代谢酶CES1、CYP450 3A4、CYP450 2C19、CYP450 1A2、CYP450 2B6。

HPLC法研究灯盏细辛注射液对水杨酸排泄的影响

近年来，阿司匹林抗血小板聚集活性逐渐成为其临床主要应用领域，是心血管疾病方面一线药物。临床上，阿司匹林常与灯盏细辛注射液（DI）、脉络宁注射液等中药制剂合用，用于治疗心脑血管疾病，并取得了良好的疗效。

氯吡格雷对复方丹参滴丸药动学的影响

目的:研究氯吡格雷对复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1药动学的影响。方法:SD大鼠20只,随机分为2组:单独给药组(复方丹参滴丸324 mg/kg)、联合用药组(复方丹参滴丸324 mg/kg+氯吡格雷30 mg/kg),连续21d灌胃给药,比较两组间人参皂苷Rg1药动学参数。结果:单独给药组和联合用药组人参皂苷Rg1的Cmax分别为1.97±0.44 mg/L、2.48±0.63 mg/L;AUC0-∞分别为8.44±2.64 mg/L·h、14.38±5.72 mg/L·h。结论:复方丹参滴丸联合氯吡格雷后,人参皂苷Rg1的Cmax和AUC0-∞增大,与二药合用协同增效相一致。

清热养心颗粒中绿原酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

清热养心颗粒是江苏省中医院制剂，具有补气养阴，清热解毒之功，临床主要用于病毒性心肌炎等的治疗。现代研究表明，该制剂中绿原酸有明显的抗炎、抗氧化、抗凝血等多种活性[1]，且是指标性成分[2]。

IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子在痔疮患者中的表达

目的:以痔疮患者肠道内IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子为研究对象,检测其在痔疮患者中的表达,探讨细胞因子在痔疮发病机制中的作用。方法:采用免疫组化方法测定痔疮患者病变部位直肠黏膜和血管内皮细胞内IL-17、IL-6、TNF-α表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测痔疮患者(试验组)与对照组血清IL-17蛋白表达。结果:试验组与对照组血清IL-17表达无差异(P>0.05);试验组与对照组直肠血管内皮细胞IL-17、IL-6、TNF-α表达有显著差异(P<0.05);试验组直肠黏膜IL-17、IL-6、TNF-α表达与对照组相比也都具有显著性差异(P<0.05)。结论:据此推测局部阻断IL-17、IL-6、TNF-α等细胞因子的分泌可能成为治疗痔疮的一种方法。

二咖啡酰奎宁酸与人血浆阿司匹林酯酶的分子对接

目的考察二咖啡酰奎宁酸类化合物对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响。方法 HPLC法测定华法林与人源白蛋白的复合物(PDB ID:1H9Z)表征的阿司匹林酯酶活性。在药物设计平台Maestro(version 8.5)上选用虚拟筛选模块Glide比较二咖啡酰奎宁酸与靶点蛋白活性的差异。运用同源建模和分子对接技术探究药物相互作用模式。结果实验组与对照组酶活性间没有统计学差异。分子对接结果显示1,3-二咖啡酰奎宁酸与阿司匹林酯酶间存在较好的结合抑制效应。结论 1,3-二咖啡酰奎宁酸对阿司匹林酯酶有微弱的抑制作用,3,4-二咖啡酰奎宁酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸对阿司匹林酯酶影响不明显。

糖皮质激素诱导肾阳虚抑郁症动物模型研究进展

临床上,肾阳虚是抑郁症患者的主要中医证型之一,针对肾阳虚抑郁症患者采用温补肾阳的方法取得较好疗效,但针对肾阳虚型抑郁症动物模型的复制方法尚无明确统一的规定和标准,为肾阳虚型抑郁症的研究带来困扰,因此,为了进一步完善肾阳虚型抑郁症动物模型的复制方法,现对近十五年来采用糖皮质激素类药物诱导的肾阳虚型抑郁症动物模型的造模方法及评价指标进行系统分析,比较异同,为肾阳虚抑郁症的合理造模提供参考依据。

混合探针法评价白香丹胶囊对大鼠体内CYP450酶活性的影响

目的:建立同时测定大鼠血浆中6种CYP450探针药物的方法,并采用Cocktail法研究白香丹胶囊对大鼠CYP450酶活性的影响。方法:选用茶碱(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)、甲苯磺丁脲(CYP2C6)、右美沙芬(CYP2D2)、奥美拉唑(CYP2D1)、咪达唑仑(CYP3A2)作为探针药物。大鼠随机分为对照组和给药组,给药组每天灌胃白香丹胶囊0.675 g·kg-1,对照组灌胃等量生理盐水,连续给药14 d。第15天均灌胃给予6个探针药物,于不同时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定各探针药物浓度,计算药动学参数并进行组间t检验。结果:与对照组相比,给药组茶碱(P<0.01)、氯唑沙宗(P<0.01)、甲苯磺丁脲(P<0.05)代谢显著加快;右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑代谢无显著性差异。结论:白香丹胶囊对大鼠CYP1A2有中强诱导作用,对CYP2E1、CYP2C6有弱诱导作用。

四逆汤配方颗粒煎煮前后6种成分的含量变化研究

目的:探讨四逆汤配方颗粒在煎煮过程中6种成分的动态变化状况。方法:采用高效液相色谱法,以Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,柱温:25℃,检测波长:235 nm,流动相:乙腈-0.1%甲酸水(5 mmol·L-1乙酸铵),梯度洗脱,流速:1.0 m L·min^(-1),进样量:15μL。结果:随着煎煮时间延长,甘草苷、甘草酸铵的含量增加,新乌头碱、6-姜烯酚的含量先增加后降低,苯甲酰次乌头碱、6-姜酚的含量无明显变化。结论:初步揭示四逆汤中三味中药配方颗粒经合并煎煮,6种化学成分含量有了变化,为中药配方颗粒的临床使用提供了参考。

基于液相色谱质谱联用氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应

目的研究大鼠血浆中氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。方法选择人参皂苷Rg1、Rb1为指标,首先建立了Rg1、Rb1在透析内液(大鼠血清RSA)、外液(PBS)含量检定方法,采用平衡透析法揭示了氯吡格雷对人参Rg1、Rb1血清蛋白结合率协同作用;接下来,采用同源模建方法建构RSA三维构造,并用分子模拟方法揭示氯吡格雷、人参皂苷Rg1、Rb1与大鼠血清白蛋白RSA间结合效应,揭示氯吡格雷-人参皂苷在血浆蛋白结合率层面协同效应。结果人参皂苷Rg1、Rb1在0.40、1.00、2.00 mg·L-1三种浓度下与大鼠血清蛋白结合率分别为30.16±2.82、33.42±4.21、34.61±3.42和50.13±2.34、51.23±3.23、53.11±3.26,当合并加入氯吡格雷(1.0 mg·L-1)后血浆蛋白结合率分别下降至22.13±2.72、21.42±3.22、25.45±3.52和40.13±3.24、41.25±4.15、43.11±3.31,分子模拟结果显示氯吡格雷、Rg1、Rb1与RSA存在不同程度的竞争结合效应。结论平衡透析法和分子模拟实验综合揭示了氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。

UPLC-MS/MS同时测定痔血合剂中8种成分含量

目的:建立超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定痔血合剂中没食子酸、芦丁、栀子苷、槲皮苷、阿魏酸、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷8种成分的含量。方法:采用AcquityUPLCBEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm),流动相:甲醇-水(含2mmol·L^-1甲酸铵)(65∶35),流速:300μL·min^-1,柱温:35℃,进样量:2μL;质谱采用电喷雾离子化(ESI),负离子检测,多反应监测(MRM)模式。结果:没食子酸、芦丁、栀子苷、槲皮苷、阿魏酸、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷的线性范围分别为7.813~250.0ng·mL^-1(r=0.9886)、62.50~2000ng·mL^-1(r=0.9934)、15.63~500.0ng·mL^-1(r=0.9755)、0.7813~25.00ng·mL^-1(r=0.9894)、0.7813~25.00ng·mL^-1(r=0.9996)、62.50~2000ng·mL^-1(r=0.9939)、62.50~2000ng·mL^-1(r=0.9968)、15.63~500.0ng·mL^-1(r=0.9998)。精密度、重复性、稳定性试验的RSD均符合要求。没食子酸、芦丁、栀子苷、槲皮苷、阿魏酸、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷的平均加样回收率分别为96.90%、97.98%、101.18%、98.00%、99.22%、98.60%、98.38%、99.00%。结论:本法灵敏简便、准确度高,可同时测定痔血合剂中8种成分的含量,为其质量控制提供参考。

盐酸沙格雷酯对大鼠体内细胞色素P4502D1/2的影响

目的观察盐酸沙格雷酯对大鼠细胞色素P4502D1/2(CYP2D1/2)的底物右美沙芬药动学的影响。方法♂SD大鼠,随机分成2组,对照组按右美沙芬组10 mg·kg-1灌胃给药,盐酸沙格雷酯组按右美沙芬和盐酸沙格雷酯均10 mg·kg-1同时灌胃给药,按不同时间从大鼠眼底静脉丛取血,血样处理后,用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中右美沙芬的浓度,用DAS 2.0软件进行分析,求出其主要药代动力学参数。结果盐酸沙格雷酯组与对照组比较,右美沙芬的T12明显延长(2.49 h±0.93 h vs 1.47 h±0.20 h,P<0.05),Cmax明显升高(325.7μg·L-1±133.2μg·L-1vs 104.5μg·L-1±52.4μg·L-1,P<0.05),AUC0-t(785.5μg·L-1·h±451.9μg·L-1·h vs 244.8μg·L-1·h±168.3μg·L-1·h,P<0.05)和AUC0-∞(804.7μg·L-1·h±445.6μg·L-1·h vs 251.4μg·L-1·h±173.4μg·L-1·h,P<0.05)明显增大。结论盐酸沙格雷酯在大鼠体内对右美沙芬的代谢有抑制作用,能降低其消除过程。

LC-MS/MS法同时测定CUMS大鼠血浆中3种单胺类神经递质

目的建立测定大鼠血浆中五羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）的LC-MS/MS方法,观察慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）抑郁大鼠血浆单胺类神经递质DA、5-HT、NE的变化情况.方法♂SD大鼠22只,分为对照组（n=10）和模型组（n=12）,模型组每天给予9种慢性不可预见性温和刺激因子,造模21d后,分别于造模前后进行行为学测定及眼眶采血;采用苯甲酰氯作为柱前衍生化试剂,将3种待测物及内标衍生化后进入LC-MS/MS检测,测定造模前后血浆中5-HT、NE、DA3种神经递质浓度.结果造模21d后,与对照组相比,模型组大鼠体重明显降低（P〈0.05）,水平得分、垂直得分均明显降低（P〈0.01）,同时糖水消耗量明显降低（P〈0.01）.血浆中5-HT、NE、DA的浓度在1.47～752、1.75～898、2.05～1053μg·L^-1范围内线性关系良好,最低定量限分别为1.47、1.75、2.05μg·L^-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于70%,日内和日间精密度小于15%,符合生物样品分析要求.造模21d后,模型组血浆中5-HT、NE、DA的浓度分别为（3.99±1.21）、（6.24±1.94）、（6.07±1.98）μg·L^-1,与对照组相比均明显降低（P〈0.01）.结论CUMS造模成功后,血浆中的3种神经递质分别呈下降趋势。

平衡透析法测定具栖冬青苷和毛冬青酸的大鼠血浆蛋白结合率

目的建立测定具栖冬青苷、毛冬青酸血药质量浓度的方法,并测定其大鼠体外血浆蛋白结合率。方法采用高效液相色谱法和平衡透析法测定具栖冬青苷、毛冬青酸在大鼠体外血浆中的血浆蛋白结合率。结果低、中、高3种质量浓度,具栖冬青苷在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为39.72%±2.68%,52.05%±3.35%和52.32%±0.76%;毛冬青酸在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为55.18%±3.66%,60.79%±2.20%和47.00%±1.59%。结论建立HPLC法对具栖冬青苷和毛冬青酸进行分离,方法简便。体外实验,具栖冬青苷和毛冬青酸与大鼠血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率与药物质量浓度无关。

毛冬青胶囊对大鼠体内细胞色素P450代谢活性的影响

目的:采用Cocktail探针药物法研究毛冬青胶囊对大鼠CYP1A2、CYP3A2、CYP2C6、CYP2D1、CYP2D2和CYP2E1体内代谢活性的影响。方法:分别以茶碱、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬和氯唑沙宗作为探针底物,将大鼠随机分为3组:空白对照组、毛冬青的低剂量组和高剂量组。低、高剂量组每日分别灌胃给予毛冬青胶囊1.8、3.6 g·kg-1,空白对照组每日给予与低剂量组等体积的生理盐水,各组均为1次/天,连续14 d。各组分别于第15天给予Cocktail探针药物,于给药前、后不同时间点取血,用LC-MS/MS检测各探针药物的血药浓度,计算药代动力学参数。结果:茶碱低剂量组cmax、AUC0-t有极显著差异(P≤0.01);甲苯磺丁脲高剂量组和氯唑沙宗低剂量组AUC0-t有显著差异(P≤0.05);其他无统计学差异。结论:毛冬青胶囊对大鼠体内CYP2C6和CYP1A2有强诱导作用,对CYP2E1有中强诱导作用,其他亚型基本无影响。