水牛精子活力相关的精浆外泌体差异蛋白质组学研究

为探索水牛高低活力精子的差异表达蛋白质(Differentially Expressed Proteins,DEPs)变化,并揭示水牛精子活力相关蛋白质的分子调控机制,本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,对成年摩拉水牛精浆、精子、精浆外泌体蛋白质种类及表达量进行比较分析。按照精子活力分为高活力组(0.67±0.02)和低活力组(0.34±0.04),分别提取其精浆外泌体蛋白质进行差异表达分析,鉴定到DEPs共160个。通过GO分析和KEGG通路分析发现,DEPs显著富集到精子部位的顶体素结合蛋白(ACRBP)、精子发育相关的生物调节过程以及“FcγR介导的吞噬作用”、“PPAR信号通路”等多个信号通路。通过构建精浆外泌体DEPs互作网络进一步分析发现,ACRBP、IZUMO1、SPACA1、ADAM2等蛋白质在精子发育调控通路发挥重要作用。

抑制BET蛋白对水牛支持细胞自噬的影响

旨在探究抑制水牛BET(bromodomain and extra terminal,BET)蛋白对支持细胞自噬调控的影响。以水牛支持细胞(sertoli cells,SCs)为研究对象,首先从睾丸中分离纯化得到高纯度的SCs,通过免疫荧光法及RT-PCR法检测出水牛SCs的标记基因均正常表达。结果显示,BET蛋白被抑制后,水牛SCs形态和数量发生显著变化,细胞的体积变大,数量减少,折光性减弱,免疫荧光分析和MDC分析也证实其生物学功能受到影响。超微结构分析发现,水牛SCs中产生大量自噬体、自噬溶酶体以及自噬空泡,且自噬相关标记基因的表达量显著提升。说明抑制BET蛋白可引起水牛SCs活性和自噬活性降低,并导致自噬体增多。结果表明,本试验为BET蛋白调控雄性生殖机制的研究提供了依据。