西尼罗病毒一步实时RT-PCR检测准确度评价

目的了解已建立的一步实时RT-PCR对西尼罗病毒感染细胞和组织的灵敏度及其对国内常见的黄病毒属病毒的特异性,为西尼罗病毒感染的实验室检测和流行病学调查奠定基础。方法使用VectorNTISuite8软件比较探针与西尼罗病毒不同系毒株之间的同源性。采用西尼罗病毒感染的Vero细胞培养上清和BALB/c小鼠脑组织样本评价一步实时RT-PCR法的灵敏度,同时用国内常见的黄病毒属病毒评价其特异性。结果此一步实时RT-PCR法可用于西尼罗病毒1系多数毒株的检测,灵敏度高,对西尼罗病毒的最低检出浓度为5.75×10-2pfu/ml;与黄病毒属乙型脑炎、登革热、蜱传脑炎以及甲病毒属东部马脑炎等虫媒病毒均未出现交叉反应。结论西尼罗病毒一步实时RT-PCR法具有灵敏度高、特异性强的特点,适用于西尼罗病毒感染细胞和组织的早期检测及流行病学调查。

瑞舒伐他汀联合荷丹片治疗老年脑梗死患者颈动脉中重度狭窄的研究

目的评价瑞舒伐他汀联合荷丹片治疗老年脑梗死患者颈动脉中重度狭窄的有效性和安全性。方法将82例老年脑梗死患者随机分为单药组41例(瑞舒伐他汀片20mg,1次/d)和联合组41例(瑞舒伐他汀片10mg/d的基础上口服荷丹片,每次1.46g,3次/d),治疗6个月后,监测血脂、LDL-C达标数,行美国国立卫生研究院卒中量表评分,CT血管造影评价颈动脉狭窄率。结果与治疗前比较,2组3、6个月时TC、TG、LDL-C明显下降,HDL-C明显升高(P<0.05)。单药组3、6个月LDL-C达标数分别为14例和34例,联合组为22例和35例。单药组治疗有效率78.05%,显效率43.90%,联合组治疗有效率82.93%,显效率63.41%。结论小剂量瑞舒伐他汀联合荷丹片治疗老年脑梗死患者颈动脉中重度狭窄神经功能恢复、颈动脉狭窄逆转程度、LDL-C达标率和不良反应与大剂量瑞舒伐他汀相当,但前一种方法调脂起效快,LDL-C达标提前,神经功能恢复显效率高。

牧羊犬外周血和脑组织博尔纳病病毒检测结果的比较

目的检测同一牧羊犬外周血和脑组织博尔纳病病毒(BDV)p24片段,比较两者阳性率的差异。方法采用改进的荧光定量套式RT-PCR,对新疆伊犁地区圈养的100只牧羊犬外周血单核细胞(PBMC)和脑组织(BT)同时进行BDV p24基因片段的检测,并对阳性标本采用GFP-p24、pMD-19扩增后电泳验证,排除质粒污染,并克隆测序,用Fisher精确检验和χ2检验分析两者阳性率的差异。结果牧羊犬外周血单核细胞和脑组织BDV p24检测的阳性率分别为5%和9%;PBMC组和BT组BDV p24检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论BDV在脑内持续感染,但以RT-PCR对外周血单核细胞BDV p24片段的检测有可能替代脑组织BDV检测,作为大规模流行病学调查的手段。

卒中后抑郁

脑卒中已经成为人类第二大致死和致残的重大疾病,并且其发病年龄逐渐年轻化。而卒中后抑郁（Post-stroke depression,PSD）是脑卒中后常见的并发症,严重影响卒中患者的治疗和预后,增加了患者家庭及社会的负担。

脑血管造影术后穿刺动脉局部压迫止血方法及护理

目的探讨经皮股动脉穿刺脑血管造影术后穿刺动脉压迫止血的方法及护理技巧。方法 60例患者脑血管造影术后根据穿刺股动脉局部压迫止血方法的不同分为Smmat-closeTM动脉压迫止血器组(观察组)和人工压迫止血组(对照组),观察两种方法止血的有效性、止血操作时间、制动时间、并发症、舒适度,并分析其护理技巧。结果两组共60例患者均成功止血。观察组和对照组止血操作时间和制动时间分别为(2.5±0.9)min和(23.6±1.2)min、(9.6±0.3)h和(24.6±0.6)h,两组止血操作时间和制动时间均差异显著(P<0.05)。观察组发生血管迷走反应1例,对照组发生皮下血肿1例。观察组出现不适反应5例(16.7%,5/30),其中腰背酸痛3例,排尿困难1例,睡眠差1例;对照组出现不适反应15例(50.0%,15/30),其中腰背酸痛10例,排尿困难2例,排大便困难1例,精神紧张1例,睡眠差1例;两组总不适反应率差异显著(P<0.05)。结论动脉压迫止血器止血和人工压迫止血的有效性和安全性相当;前者止血时间、制动时间短,舒适度高;合理护理可改善患者舒适度,减少并发症。

博尔纳病病毒的生物学特点以及检测方法

1博尔纳病病毒概况 远在18世纪末博尔纳病病毒（Borna Disease Virus,BDV）就在德国南部出现散发感染,但是没有正式命名。1895年在萨克森州博尔纳镇突然出现了大量马匹死亡的事件,其中包括了一个骑兵团的军马。

依达拉奉联合水化预防造影剂急性肾损伤

目的:探讨依达拉奉联合水化对造影剂急性肾损伤的预防作用。方法:纳入80例急性脑梗死患者,随机分为联合组和对照组,联合组采取依达拉奉加水化预防,对照组采取水化预防。在头颈CT血管造影前、造影后第24h及第48h采血查血清胱抑素C(Cys C)、血肌酐(SCr),统计造影剂肾病(CIN)人数,并观察不良反应。结果:2组各自造影后第24h、第48h血Cys C与造影前比较,造影后第48h血Cys C与第24h比较,差异均有统计学差异(均P<0.05),而SCr在造影前后无显著变化(P>0.05)。造影后第24h、第48h联合组肾损伤均显著小于对照组(均P<0.05)。2组均未出现CIN和严重副反应。结论:依达拉奉联合水化能够减轻造影剂所致急性肾损伤,可以考虑将依达拉奉联合水化试用于造影剂急性肾损伤的预防。血Cys C较SCr反映造影剂急性肾损伤更敏感。

盐酸法舒地尔治疗症状恶化的不宁腿综合征

目的观察盐酸法舒地尔(FH)治疗症状恶化的不宁腿综合征(RLS)的疗效。方法将50例症状恶化的慢性RLS随机分为观察组和对照组,各25例。观察组予以静脉滴注生理盐水100mL+FH 30 mg,对照组予以氯硝西泮2 mg口服,均治疗30 d。治疗前后进行RLS严重程度评分、匹兹堡睡眠质量评分(PSQI)和SF-36生活质量评分(SPS),观察不良反应。结果两组各自治疗前后和两组间治疗前后RLS的严重程度、PSQI、SPS的比较均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FH治疗症状恶化的RLS能够提高疗效,不增加不良反应,可以考虑将FH试用于治疗症状恶化的RLS患者。

针药并用治疗脑卒中后抑郁的临床研究

目的观察针药并用治疗脑卒中后抑郁(PSD)的临床疗效及其对患者血清中脑源性神经营养因子(BDNF)及神经生长因子(NGF)的影响。方法将100例PSD患者随机分为治疗组和对照组,每组50例。治疗组采用针刺配合口服逍遥丸治疗,对照组采用口服盐酸氟西汀胶囊治疗。观察两组治疗前后汉密顿抑郁量表(HAMD)评分及血清中BDNF、NGF含量的变化情况。结果两组治疗后HAMD评分及血清中BDNF、NGF含量与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后HAMD评分及血清中BDNF、NGF含量与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论针药并用是一种治疗脑卒中后抑郁的有效方法,能提高患者血清中BDNF、NGF含量。

疏血通注射液治疗急性脑梗死的临床观察

目的:观察疏血通注射液治疗急性脑梗死的效果。方法:将71例急性脑梗死患者分为治疗组(36例)和对照组(35例)。对照组给予常规对症治疗,治疗组在对照组的基础上加用疏血通注射液6ml,缓慢静脉滴注。两组均治疗3周。治疗前、后检测患者的血液流变学指标[全血高切黏度、全血低切黏度、血浆比黏度、纤维蛋白原、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板比积(PCT)],观察两组的疗效及不良反应。结果:两组治疗后全血高切黏度、全血低切黏度、血浆比黏度、纤维蛋白原、MPV、PDW显著下降,PLT显著升高,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);且治疗组各项指标改善情况显著优于对照组,差异也有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率为91.67%,与对照组(74.29%)比较有显著性差异(P<0.05)。试验中两组均未见不良反应发生。结论:疏血通注射液治疗急性脑梗死安全、有效。

新疆驴脑组织尼帕病毒N基因片段的检测

目的检测新疆伊犁草原地区放养新疆驴的脑组织样本中尼帕病毒(Nipah Virus,NiV)核蛋白(N)基因片段,调查该地区放养新疆驴NiV感染流行状况。方法采用一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(one-step Real-Time FQ RT-PCR)对采自新疆伊犁地区草原放养且未接种NiV疫苗的65例新疆驴脑组织进行NiVN基因片段检测。结果新疆驴脑组织标本中未检出NiV N基因片段。结论目前尚无证据表明我国新疆伊犁地区新疆驴中存在NiV感染,提示该地区短时间内爆发该病毒感染可能性较小。

新疆伊犁地区马脑组织尼帕病毒的感染情况

目的采用一步法荧光定量RT-PCR检测新疆伊犁地区天然牧场放养马群脑组织尼帕病毒(NipahVirus,NiV)核蛋白N基因的表达,调查该地区马群中枢神经系统NiV感染的流行状况。方法针对NiV高度保守区N基因设计特异性引物和探针,建立检测马脑组织样本中低浓度NiV RNA的一步法荧光定量RT-PCR方法,对该方法的敏感性及特异性进行验证,并对新疆伊犁地区天然牧场放养且未接种NiV疫苗的183匹马脑组织进行检测。结果一步法荧光定量RT-PCR的最低检出限为1.1×102 copies/μl;与NiV同为亨尼帕病毒属,且高度同源的亨德拉病毒(Hendra Virus,HeV)及同为单股负链的博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)均无交叉反应;183份马脑组织样本未检出阳性样本。结论新疆伊犁地区天然牧场放养马匹中未发现NiV感染,该地区短时间内爆发NiV的可能性较小。

新疆伊犁地区马匹亨德拉病毒脑内感染情况调查

目的检测新疆伊犁地区天然牧场放养马群脑组织中亨德拉病毒(Hendra Virus,HeV)的核酸片段,调查该地区马群中枢神经系统HeV感染流行状况。方法针对HeV高度保守区核蛋白(N)基因设计特异性引物和探针,采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统感染样本中低浓度HeV RNA的方法,检测新疆伊犁草原地区天然放养且未接种HeV疫苗的183例马匹脑组织。结果最低特异性检出浓度可低至2.6×102copies/μL,与其他单股负链RNA病毒如同属的尼帕病毒(NiV)无交叉反应,对183例马脑组织进行一步法实时荧光定量RT-PCR检测,未检出阳性样本。结论初步流行病学研究尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养马匹中存在HeV感染的证据,提示该地区短时间内爆发亨德拉病毒感染的可能性小。

新疆伊犁地区动物脑组织博尔纳病病毒p24基因片段的检测

目的了解新疆伊犁地区动物脑博尔纳病病毒（Borna disease virus，BDV）感染现状，分析该病毒的种系来源，预防我国BDV大规模暴发流行。方法采用巢式逆转录实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—RT-PCR）的方法，对新疆地区200匹马、75头驴和100只牧羊犬脑组织标本进行BDVp24基因片段的检测。并对阳性标本进行BDV p40基因片段扩增电泳，同时排除GFP—p24和pMD-19质粒污染，最后克隆测序，进行基因同源性和氨基酸序列分析并分析BDV种系发生。结果3例伊犁马、4例伊犁驴和9例牧羊犬的脑组织标本BDV p24检测阳性，阳性率分别为1．5％、5．3％、9．0％；BDV p40基因片段检测和质粒标准品GFP—p24、pMD-19检测均为阴性；BDV pPA扩增产物序列与He／80株的同源性为100％。结论新疆伊犁地区马、驴和狗可能存在BDV脑内的自然感染，该地区BDV流行株与He／80株存在同源性。

新疆伊犁地区驴脑组织亨德拉病毒感染情况调查

目的调查新疆伊犁地区草原放养驴群中亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)中枢感染的流行情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测病毒核酸片段的方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的65例驴脑组织进行HeV核蛋白(N)基因片段检测。结果65例驴脑组织成功进行一步法实时荧光定量RT-PCR检测,未检出阳性样本。结论目前尚未发现我国新疆伊犁地区放养驴中存在HeV中枢神经感染的证据,提示该地区出现HeV感染流行的可能性不大。

巢式荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统HCV方法的构建

目的建立丙型肝炎病毒5′NCR基因的巢式荧光定量RT-PCR检测方法,用于中枢神经系统感染超低浓度HCV的准确和快速定量检测。方法选择高度保守区5′NCR基因片段,设计并合成相应的特异性引物和探针,建立巢式荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统感染样本中的超低浓度HCV正负链RNA的方法。并对32例血清HCV抗体检查阴性的病毒性脑炎患者脑脊液有核细胞和外周血单个核细胞(PBMC)进行检测。结果可特异性地检出脑脊液有核细胞及PBMC中HCV正负链RNA,最低检出浓度均可达7.85 cop ies/μl,与其他单股正链RNA病毒如登革热病毒(DEV)无交叉反应。32例血清HCV抗体检查阴性样本脑脊液有核细胞和PBMC中HCV5′NCR正链片段阳性的分别为1例(1/32)和2例(2/32),负链片段阳性的分别为1例(1/32)和0例(0/32)。结论本方法的构建适用于中枢神经系统感染超低浓度HCV正负链RNA检测,且快速有效、敏感性和特异性较高,不易出现假阳性,可有效提高检出率,进一步完善目前临床常规检测HCV的方法。

新疆伊犁地区马脑组织西尼罗病毒感染的调查

目的了解新疆伊犁地区草原放养马群中西尼罗病毒(W estN ile virus,WNV)中枢感染的流行状况。方法采用一步法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real Tim e RT-PCR)对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种WNV疫苗的189例马脑组织进行WNV包膜蛋白(E)基因片段检测。结果被检马脑组织标本中未发现WNV E基因片段。结论目前尚没有证据表明我国新疆伊犁地区的放养马中存在WNV脑炎的感染,提示该地区出现WNV脑炎流行的可能性小。

新疆伊犁地区牧羊犬脑内亨德拉病毒感染情况

目的分析新疆伊犁地区草原放养牧羊犬脑内亨德拉病毒(Hendravirus,HeV)的感染情况。方法采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV核蛋白(N)基因片段,并验证该方法的敏感性和特异性。采用该方法对采自新疆伊犁地区草原放养、未接种HeV疫苗的101例牧羊犬脑组织进行HeV N基因片段检测。结果建立的一步法实时荧光定量RT-PCR检测HeV N基因的最低检出浓度为2.6×102 copies/μl;与其他单股负链RNA病毒,如同属且高度同源的尼帕病毒(Nipah virus,NiV)和博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)等无交叉反应;101份牧羊犬脑组织样本HeV N基因的检测结果均为阴性。结论尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养牧羊犬中存在HeV感染的证据,该地区短时间内爆发HeV感染的危险性不大。

病毒性脑炎患者外周血和脑脊液西尼罗病毒E基因的检测

西尼罗病毒（WNV）是单股正链RNA病毒,属于黄病毒科黄病毒属,其传播媒介和储存宿主是蚊虫[1].人感染WNV会出现感冒样症状,部分患者为脑膜脑炎、坏死性脑干炎等神经系统症状.本研究对重庆地区不明病因的78例病毒性脑炎（VE）患者血液和脑脊液进行wNV E基因片段检测.

自由基清除剂依达拉奉的压疮预防价值初探

目的:探讨自由基清除剂依达拉奉的压疮预防价值。方法:纳入100例急性脑梗死后压疮高危患者,随机分为联合组与对照组,各50例,联合组采用依达拉奉+常规护理预防,对照组采用常规护理预防。统计2组压疮发生率,并观察不良反应。结果:联合组有3例发生压疮,而对照组有10例发生压疮,联合组压疮发生率(6.00%)明显低于对照组(20.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。2组均无明显不良反应。结论:自由基清除剂依达拉奉能够降低压疮发生率,且不增加不良反应;可以考虑采用依达拉奉联合常规护理主动预防脑梗死后压疮高危患者的压疮发生。