市政项目全过程造价管理研究——以某大型垃圾焚烧项目为例

随着国家全过程咨询试点工作的推行,工程造价咨询已经成为工程造价管理的重要组成部分,文章分析了市政项目各阶段的造价咨询控制要点,并以某大型垃圾焚烧项目为例,结合实践,进行了项目全过程造价咨询管理研究。各阶段的造价咨询工作既能控制市政项目的整体成本,也能提升咨询企业的管理水平,可对类似市政项目或其他全过程造价咨询项目起到借鉴及参考作用。

民族声乐表演艺术的当代审美特征

民族声乐表演艺术历经漫长的发展,逐渐形成了较为完善的演唱技法体系,在审美思维、审美习惯、审美表现方式等方面依然保留着我国传统音乐的“底色”,但在演唱技巧等方面体现出了传统与现代、东方与西方的融合。文章从审美视角出发,简要论述民族声乐表演艺术的发展历程,重点从民族声乐表演艺术的整体呈现、深刻内涵、细腻情感、发声技巧、曲词融合、直击心灵、中西融合几大方面,阐述民族声乐表演艺术的当代审美特征,旨在为民族声乐表演艺术的实践提供思路与方法。

基于等效弹簧模型的裂纹Euler-Bernoulli梁弯曲变形分析

考虑裂纹的缝隙效应,研究了开闭裂纹Euler-Bernoulli梁的弯曲变形.首先,将裂纹等效为内部旋转弹簧,利用广义函数,给出了考虑裂纹缝隙影响的Euler-Bernoulli梁的等效抗弯刚度,推导了具有任意数目开闭裂纹梁弯曲变形的显式通解.在此基础上,研究了均布载荷作用下上侧单裂纹简支梁以及裂纹处承受集中力和集中力偶共同作用的固支梁的弯曲变形,分析了梁长细比、裂纹深度和位置以及载荷等对裂纹开闭状态和梁弯曲变形的影响。结果表明:梁挠度分布在裂纹处存在尖点,而转角分布存在跳跃;梁挠度与载荷的响应关系一般为双折线形式,分别对应于裂纹的张开和闭合状态;且裂纹张开时,裂纹梁的柔度随着梁长细比的增加和裂纹深度的减小而减小。这些结果对梁裂纹无损检测具有指导意义.

国外中小企业资本结构研究文献综述

本文从资本结构理论出发回顾了国外研究中小企业资本结构的文献，并总结了这些文献针对中小企业的特征提出的新命题，为今后中小企业资本结构研究提供参考。

基于Leslie矩阵模型的中国人口总量与年龄结构预测

选用Leslie矩阵人口模型能够较全面地考虑到影响人口总量与年龄结构的各种主要因素,预测得到:在现行计划生育政策不变的情况下,中国人口总量将在2024年前后达到峰值14.2亿左右,这与国家人口发展战略研究课题组预测的在2033年前后达到人口峰值15.2亿左右有较大差别;中国人口老龄化有加速发展的趋势。

SEA体内杀伤S180肉瘤效果及其细胞因子的测定

目的:研究SEA抗肿瘤的效果及其对细胞因子干扰素(IFN)-γ的影响,探讨其作用机制。方法:采用S180细胞建立小鼠肉瘤模型40只进行体内抑瘤实验,随机分成4组,包括SEA高剂量组(n=10)、SEA中剂量组(n=10)、SEA低剂量组(n=10)和对照组(n=10),前3组分别注射0.5、0.25、0.05mg/kg的SEA,对照组注射生理盐水,接种第5天起测量各组小鼠肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。治疗结束后取小鼠血清并测定IFN-γ的含量。结果:SEA高、中和低剂量组抑瘤率分别为(44.00±3.21)%、(3.92±2.12)%和(2.33±1.95)%,SEA高剂量组脾脏指数和IFN-γ的含量明显增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),但肿瘤质量却明显减小。结论:SEA通过激活T细胞,分泌细胞因子IFN-γ抑制小鼠体内S180肉瘤生长。

骨髓间充质干细胞治疗肺部疾病的现状研究

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,可分化为三个胚层来源的细胞系,发育成不同的组织细胞。近年来,随着人们对BMSCs生物学特性、体外分离纯化及培养认识的不断深入,以BMSCs为实验载体,利用其增殖及归巢特性,对慢性阻塞性肺疾病的根本性逆转治疗以及其对肺部肿瘤的抑制及治疗等方面有新的观点和研究方向。文本就近年来该方面相关研究进展进行综述。

通过单纯熏烟法建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型

目的 通过单纯熏烟法建立慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型。方法 选取无特定病原体级健康Sprague Dawley大鼠60只，根据随机数字表法分为空白组（10只）和COPD造模组（50只）。空白组正常饲养，无其他处置。COPD造模组采用单纯烟熏法处理60 d建立COPD大鼠模型。观察2组大鼠的一般状态，比较血清白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、粒细胞落刺激因子（G-CSF）水平，观察肺组织病理形态学差异。结果 造模后，COPD造模组大鼠出现咳嗽、咳痰甚至喘息，部分大鼠口鼻出现大量透明黏性液体，均为COPD的典型症状；空白组大鼠无咳嗽、咳痰等相应症状。COPD造模组大鼠血清TNF-α表达水平明显高于空白组［（2.27±0.28）nmol/L比（1.96±0.06）nmol/L］，差异有统计学意义（P〈0.05）。2组大鼠血清IL-10和G-CSF表达水平比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。COPD造模组大鼠肺组织镜下病理形态学观察可见典型COPD病理特征；空白组大鼠肺组织病理形态大致正常。结论 吸烟是COPD的最重要致病因素，通过单纯熏烟法可成功制备COPD大鼠模型。

超抗原SEA原核表达及诱导淋巴细胞杀伤人肺腺癌细胞效果观察

目的探讨重组质粒pET22b-SEA经原核表达后,金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对人外周血单核细胞(PBMC)杀瘤活性的影响。方法将重组质粒pET22b-SEA转化至E.coli BL21(DE3)扩大培养,IPTG诱导后,进行SDS-PAGE分析;密度梯度离心分离PBMC,不同浓度SEA诱导PBMC,12、36、60h后用MTT法测定PBMC对人肺腺癌细胞A549的杀伤活性。结果经诱导,pET22b-SEA得到表达,产物相对分子质量约为30kDa,与理论值大小一致;随着SEA浓度的升高PBMC的杀瘤活性显著增强,在36h、高效靶比、高SEA浓度的情况下,杀伤率最高可达57.21%。结论重组质粒pET22b-SEA在大肠杆菌中成功表达;SEA可诱导PBMC对人肺腺癌细胞A549产生更强的杀瘤活性。

通过供给侧改革加快优化市场主体

供给侧结构性改革是中国经济进入新常态的一个重大的改革举措,供给侧结构性改革不单单是从注重总需求管理向注重总供给管理这样一个简单的关系,更主要的是通过优化供需结构来提高市场主体的效率和竞争力。通过供给侧改革加快优化市场主体,必须以"五大理念"为指导,脚踏实地抓落实,各地、各产业要建立通过供给侧改革加快优化市场主体的路线图,转变政府职能,深化行政管理体制改革,为市场主体创造良好的发展环境。加快城镇化进程优化城乡结构、加快供给侧改革建设现代产业体系优化产业结构是加快我国现代化进程的两大推动力,加快供给侧结构改革必须和转变城镇化发展方式统一起来。

超抗原融合基因VEGF-SEA的克隆、原核表达及蛋白纯化

根据Genebank报道的VEGF(NM-003376)、SEA(A28664)基因序列,对密码子进行优化,合成血管内皮细胞生长因子和超抗原基因序列,将VEGF-SEA基因片段插入质粒pET22b构建重组质粒pET22b-VEGF-SEA。重组质粒经序列分析正确,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析蛋白条带与预期一致,证明融合蛋白原核表达成功。产物经His.Bind Buffer kit试剂盒纯化,纯度达到90%,这一成果为进一步研究VEGF-SEA融合蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础。

肺癌的研究进展

肺癌的发病率和死亡率已居恶性肿瘤的首位。由于肺癌临床表现的隐匿性,多数患者就诊时间较晚,丧失最佳治疗时机。肺癌患者总体五年生存率不足15%,但I 期肺癌的五年生存率可达到80%以上。[1]可见尽早明确诊断,争取早期治疗,可以提高肺癌患者生存率、降低死亡率。同时肺癌的诊断方法很多,只有合理运用才能有效诊断。总结了近十年来国内外肺 癌诊断及早期肺癌筛查的方法,对传统影像方法、细胞学检测、基因层面的诊断、肺癌标志物的相关研究以及最近提出的肺癌诊断新 方法进行了归类总结。在总结前人研究成果的基础上,提出了改进的意见,作出展望并表达了作者的观点。本文将对肺癌的诊断方法逐一介绍。

新时期城乡关系分析——以河北省唐山市为例

近年来,唐山市在统筹城乡发展,推进城乡一体化方面进行了有益探索,取得了明显成效。本文通过分析城乡关系理论演变,对唐山城乡一体化发展经验进行了总结,提出了合理的城乡发展战略和对策,为进一步推进城乡一体化进程,实现城乡科学持续发展具有重要现实意义。

超抗原SEA对C57BL/6荷瘤小鼠S180肉瘤的抑制检测及肿瘤坏死因子的分析

通过在C57BL/6小鼠腋下注射S180肉瘤细胞,隔日注射生理盐水(对照组)和葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)(实验组),九日后解剖小鼠测量抑瘤率和脾指数,并通过ELISA和免疫组化方法检测TNF-α。解剖后测量发现实验组小鼠瘤重较对照组轻,分别为(0.52±0.10)g和(1.02±0.11)g(P<0.05);两组的脾指数分别为15.9和4.8;同时发现实验组脾脏和血清中TNF-α的含量均高于对照组。因此认为超抗原SEA可以有效提高小鼠的免疫能力,从而更高效的杀伤癌细胞。

人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104抗癌细胞活性的检测

检测人细胞毒性T淋巴细胞TALL-104对癌细胞的杀伤活性以及此杀伤活性对白细胞介素-2的依赖性,动态观察其体外增殖能力。用台盼兰拒染法计算细胞扩增倍数;用MTT法检测细胞毒杀伤活性,实时观察细胞的杀伤过程。结果表明,在200 IU/ml IL-2刺激下,TALL-104细胞增殖能力较强;在效靶比5∶1,作用时间为24 h,TALL-104细胞表现出对癌细胞MCF-7和A-431较高的杀伤率分别为50.4%和69.5%;当作用时间在72 h以内,效靶比不高于10∶1时,杀伤率随作用时间和效靶比的增加而明显升高(P<0.05);最大杀伤率分别为79.8%(MCF-7细胞)和90.4%(A431细胞)。因此,TALL-104细胞体外增殖能力较强,其细胞毒活性不严格依赖于IL-2的存在。

EGF-SEA融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化

根据基因库中查到的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因序列和人体表皮生长因子(EGF)基因序列进行密码子优化,以适于大肠杆菌表达。人工合成SEA基因与EGF基因。将两目的基因克隆至原核表达载体pET22b中,经测序验证表明成功构建了重组表达质粒pET22b-EGF-SEA。将构建好的pET22b-EGF-SEA质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达;SDS-PAGE分析表明融合基因EGF-SEA在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式得到了高效表达,产物相对分子质量约为44kDa,与理论值大小一致。包涵体经洗涤,变性、复性后用His.BindKit进行分离纯化,所得蛋白纯度≥95%。高纯度EGF-SEA融合蛋白的获得为进一步研究其生物学活性及肿瘤治疗奠定了基础。

超抗原VEGF-SEA融合基因的克隆与表达

目的:构建血管内皮生长因子-葡萄球菌肠毒素A(VEGF-SEA)基因的原核表达质粒,获得VEGF-SEA融合蛋白。方法:制备VEGF-SEA基因片段,插入pET40b构建重组质粒pET40b-VEGF-SEA,经序列分析正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达蛋白。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达蛋白的相对分子质量及表达形式,并对产物采用His·Bind Buffer kit试剂盒纯化。结果:获得VEGF-SEA基因片段长1130bp,经序列分析与预期完全一致,其表达出目的蛋白的大小约为66.2ku,以包涵体形式表达,经纯化,纯度达到90%以上。结论:表达载体pET40b-VEGF-SEA构建成功,VEGF-SEA融合蛋白获得高效表达,本实验为进一步研究VEGF-SEA蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础。

金黄色葡萄球菌肠毒素A诱导的S180肉瘤细胞凋亡分析

分析了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导的S180肉瘤细胞凋亡。将S180肉瘤细胞接种于小鼠腋下,建立小鼠肿瘤模型,随机分为2组,即SEA实验组和生理盐水对照组,隔日进行腹腔注射,九天后解剖,将肿瘤组织做成石蜡切片。用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测S180肉瘤细胞凋亡,并用免疫组化方法观察CD8+T细胞和颗粒酶B的分布,最后用ELISA法检测血清、脾脏中TNF-α的含量。SEA组的凋亡指数明显大于对照组,SEA组肿瘤组织周围的CD8+T细胞、颗粒酶B明显多于对照组,且血清、脾脏中TNF-α的含量也高于对照组。SEA诱导S180细胞凋亡与颗粒酶B和TNF-α的分泌有关。

SEA诱导人PBMC对结肠癌Caco-2细胞的杀伤效果观察

目的通过蛋白注入和基因转染两种形式,观察金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导人外周血单核细胞(PBMC)对结肠癌Caco-2细胞的杀伤效果。方法密度梯度离心法分离PBMC,用不同浓度SEA诱导;MTT法测定PBMC对Caco-2细胞的杀伤率;用阳离子脂质体法将重组质粒pEGFP-N1-SEA转染至Caco-2细胞,检测PB-MC对该细胞的杀伤率。结果在一定范围内,随着SEA浓度的升高,PBMC对Caco-2细胞的杀伤率显著上升,在36h、高效靶比、高SEA浓度的情况下,杀伤率可达57.23%;将pEGFP-N1-SEA转染至Caco-2中,转染效率达55%,同时能显著提高PBMC的杀伤率,转染60h后杀伤率可达54.62%。结论通过蛋白注入和基因转染两种形式,SEA均能诱导并增强PBMC对Caco-2细胞的杀伤效果。

金黄色葡萄球菌肠毒素A对H22小鼠移植瘤的抑制作用

旨在探讨金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)在KM鼠体内的抑瘤效果。建立H22荷瘤小鼠模型,将20只小鼠随机分为对照组(生理盐水)、低剂量组(15μg/ml)、中剂量组(25μg/ml)和高剂量组(50μg/ml),观察肿瘤生长趋势,计算抑瘤率,通过ELISA检测IL-2的含量。结果显示,给药组肿瘤生长趋势均较对照组缓慢;对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的抑瘤率分别为0,28.9%,34.0%,51.0%(P<0.05);血清中IL-2含量分别为58.9pg/ml、83.6pg/ml、91.8pg/ml、118.1pg/ml。金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)可抑制H22肿瘤的生长,并上调IL-2的分泌。