LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芦荟苦素浓度及其药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中芦荟苦素浓度的方法,并考察芦荟苦素的药动学特征。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以芦荟新苷D为内标,采用液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中芦荟苦素的血药浓度。以Synergi Hydro-RP为色谱柱,以0.1‰甲酸溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为0.50 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 393.1→272.9(芦荟苦素)、m/z 555.3→144.9(内标)。采用上述方法测定大鼠尾静脉注射(3.35 mg/kg)和灌胃(16.75 mg/kg)芦荟苦素后0.083、0.167、0.333、0.667、1、1.5、2.5、4、6、8、10 h静脉血中芦荟苦素的质量浓度,采用DAS 3.0软件计算药动学参数。结果:芦荟苦素检测质量浓度的线性范围为1~600 ng/mL(r=0.9945),定量下限为1 ng/mL,批内、批间RSD均小于15%,批内、批间准确度在±15%内,基质因子为(92.74±4.33)%~(94.84±2.57)%,提取回收率为(69.04±2.13)%~(75.03±2.84)%,稳定性试验的实测结果与理论值的偏差在±15%内。大鼠静脉注射和灌胃芦荟苦素后,主要药动学参数c_(max)分别为(10693.3±2745.3)、(223.3±36.2)ng/mL,t_(1/2)分别为(2.45±1.45)、(3.33±1.91)h,AUC_(0-24 h)分别为(4190.6±883.6)、(1210.1±93.9)ng·h/mL(n=3),口服绝对生物利用度为11.13%。结论:本研究成功建立了一种快速、灵敏的芦荟苦素血药浓度测定方法,适用于其药动学研究。