四种氟喹诺酮类药物对眼部分离细菌的体外敏感试验

目的研究眼部分离细菌对4种氟喹诺酮类药物的敏感性。方法对525份眼部标本行体外细菌培养,K-B法观察培养阳性细菌对环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星和加替沙星的敏感性。结果体外培养阳性细菌321株,革兰阳性球菌最多,为245株(76.3%),其次,革兰阴性杆菌48株(15.0%),革兰阳性杆菌20株(6.2%),革兰阴性球菌8株(2.5%),环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星和加替沙星的总敏感性分别为59.2%、66.4%、80.7%和96.6%。环丙沙星、氧氟沙星对表皮葡萄球菌的敏感性(47.6%,55.3%)明显低于左氧氟沙星和加替沙星(76.0%和97.1%)(P<0.05)。结论眼部分离细菌以表皮葡萄球菌最多,其次为金黄色葡萄球菌。加替沙星的敏感性最好,其次是左氧氟沙星。

90例真菌性角膜炎菌种鉴定

目的 分析2000年河南省的真菌性角膜炎致病菌种类。方法 收集真菌性角膜炎患者的标本,Sabouraud’s琼脂培养基分离后,选择合适培养基培养,10%KOH湿封片观察鉴定。结果 共分离出真菌菌株 10属 90株,致病真菌以镰孢菌属最多(73．3%),尤以紫二孢镰孢菌最多见(18．9%)。结论2000年河南省的真菌性角膜炎以镰孢菌属最多,镰孢菌属的基础研究需进一步加强。

抗菌药物对眼部铜绿假单胞杆菌防突变浓度的测定

目的探讨氟喹诺酮药物和庆大霉素、妥布霉素对眼部分离的铜绿假单胞杆菌的防突变浓度(MPC),并比较MPC与最低抑菌浓度(MIC)的关系。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)微量液基法,应用含钙Muller Hinton肉汤培养基,测定环丙沙星敏感的铜绿假单胞杆菌对环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星和加替沙星以及庆大霉素、妥布霉素的MIC值,细菌接种量104CFU;采用混菌法,菌接种量1010CFU,应用MHA培养基,药物与细菌和MHA混悬液1∶19,测定MPC值。结果环丙沙星的MIC50,为0·12mg/L,左氧氟沙星为0·25mg/L,氧氟沙星为1mg/L,妥布霉素为0·50mg/L,庆大霉素为2mg/L。环丙沙星对铜绿假单胞杆菌的MPC50和MPC90分别为4mg/L和8mg/L,左氧氟沙星、加替沙星和氧氟沙星均为8mg/L和32mg/L,妥布霉素分别为16mg/L和64mg/L,庆大霉素为32mg/L和128mg/L。结论新型氟喹诺酮类药物和庆大霉素、妥布霉素对铜绿假单胞杆菌有良好的抗菌作用,环丙沙星在预防铜绿假单胞杆菌产生耐药突变方面有明显优势。

中原地区真菌性角膜炎患病因素调查

目的为真菌性角膜炎的预防及治疗提供依据。方法选择疑似真菌性角膜炎患者,角膜刮片镜检真菌菌丝阳性或角膜移植术后角膜片真菌培养阳性者,对其年龄、性别、职业、外伤史、发病时间、地区来源、发病月份、感染菌种等进行调查。结果5年共收集真菌性角膜炎患者1622例,男986例(60.8%),女636例(39.2%);双眼患病1例,余均为单眼;平均年龄(43.44±14.08)岁;就诊时间1d至3年。10～12月份占全年发病人数的55.5%。患者主要来自中原地区中东部。农民占92.4%,有外伤史者644例,植物性外伤者占46.8%。共分离出真菌525株,镰孢菌占61.0%,曲霉菌占12.6%。就诊时间和发病年龄呈线性相关(P<0.05)。结论真菌性角膜炎的发病与农业活动密切相关,感染菌种以镰孢菌最多,其次是曲霉菌。

视网膜脱离状态下色素上皮细胞的凋亡变异

探讨视网膜脱离（ＲＤ）后色素上皮（ＲＰＥ）细胞的凋亡。方法 制造有色眼家兔的ＲＤ模型，以流式细胞仪（ＦＣＭ）技术分析ＲＤ后２８天内ＲＰＥ细胞的凋亡变化。结果 ＲＤ后８ｈ ＲＰＥ细胞凋亡显著增加，第７天达顶峰，凋亡细胞平均数由正常的１３１．６７±３５．６７上升至１１９６．２±２３８，凋亡率由正常的０．７０％±０．２１％上升至５．９８％±１．２１％，然后缓慢下降，第２８天仍显著高于正常。结论 ＲＤ可导致ＲＰＥ细胞的凋亡。ＲＤ后２８天内，随时间延长，ＲＰＥ凋亡增加。

家兔视网膜脱离状态下玻璃体NGF水平及视网膜细胞动态观察

目的 :研究视网膜脱离状态下玻璃体内源性神经生长因子 (NGF)水平及视网膜细胞的动态变化 ,为视网膜脱离的治疗提供实验依据。方法 :健康青紫兰家兔制备视网膜脱离模型 ,模型制备后 8h ,1d ,4d ,7d ,14d以夹心酶免疫反应方法检测玻璃体NGF的水平 ,同时制备视网膜光镜、电镜标本 ,观察视网膜细胞的动态变化。统计学方法采用方差分析、秩和检验和直线相关分析。结果 :①家兔正常玻璃体NGF的水平为 (16 48± 2 5 2 )ng/L。视网膜脱离后 8h玻璃体NGF水平已增加 ,1d后达正常水平的 12 6倍 ;脱离后第 4d为正常水平的 4倍 ;第 14d降至正常水平。②视网膜脱离后第 4～ 7d变性及凋亡视细胞数增加 ,与玻璃体NGF水平显著负相关。③视网膜脱离 7d后神经节细胞层的厚度与玻璃体NGF水平显著正相关。结论 :NGF对视网膜细胞可能具有保护作用 。

神经生长因子及其受体与视神经视网膜疾病的研究进展

目前关于神经生长因子在视网膜视神经疾病中的作用研究很多 ,但观点很不一致。本文着重论述神经生长因子及其受体在视觉系统的分布、视神经损伤、缺血性视网膜疾病、视网膜变性疾病及增生性玻璃体视网膜疾病中的作用。

角膜溃疡刮片病原学两种检查方法比较

随着真菌、棘阿米巴性角膜炎的发病率逐渐增高,角膜刮片查病原以明确诊断的方法逐渐受到重视.目前常用方法为10%KOH湿片法和Giemsa染色法,为寻找更适合眼科应用的方法,我们对2001年12月至2002年2月在我所就诊的所有角膜溃疡患者均行2种方法检查,以比较其优劣.

视网膜脱离状态下色素上皮细胞的动力学变化

目的 :研究视网膜脱离后色素上皮细胞 (RPE)细胞增殖与凋亡改变 ,为增生性玻璃体视网膜病变的治疗提供实验依据。方法 :在青紫兰家兔眼建立RD模型 ,通过流式细胞仪技术定量分析RPE细胞的增殖和凋亡改变。结果 :RD后 ,RPE细胞可发生增殖和凋亡改变 ;RD后 8hRPE细胞增殖及凋亡增加 ,RPE细胞增殖第 14d达到最高峰 ,第 2 8d接近正常 ;其凋亡 2 4h形成高峰 ,至第 2 8d仍然高于正常。RD后 8hRPE细胞增殖和凋亡之间具有显著的正相关 (r=0 945 2 ,P >0 0 5 ) ,RD后 1d后RPE细胞增殖和凋亡之间未见显著相关(P >0 0 5 )。结论 :RD后 ,RPE细胞可发生增殖和凋亡改变 ;

KOH湿片镜检法与CFW荧光染色法诊断真菌性角膜炎的效果比较

目的:探求早期、快速和准确诊断真菌性角膜炎的实验室方法。方法:对58例真菌培养阳性的真菌性角膜炎患者的角膜刮片进行涂片镜检,同一涂片先行KOH湿片镜检,然后行Calcofluor White(CFW)荧光染色镜检。以真菌培养阳性为诊断真菌性角膜炎的金标准,对检查结果进行对比分析。结果:同一涂片KOH湿片阳性率为81.0%(47/58),而CFW荧光染色阳性率为96.6%(56/58),2者共阳性47例,共阴性2例,CFW荧光染色阳性率高于KOH湿片镜检法(χ2=7.11,P<0.001)。结论:角膜刮片CFW荧光染色镜检诊断真菌性角膜炎优于KOH湿片镜检。

角膜激光共焦显微镜对诺卡菌角膜炎的临床观察

诺卡菌角膜炎临床非常罕见，仅占细菌性角膜炎的0．3％～0．8％。以往报道诺卡菌角膜炎继发于准分子激光角膜原位磨镶术（laser in situ keratomilusis，LASIK）术后、角膜移植术后及戴角膜接触镜后。该病属于罕见病，易误诊、误治，值得临床医师高度警惕。目前，国内尚无活体状态下观察诺卡菌的报道，我们收集经角膜激光共焦显微镜观察并诊治的5例患者，报道如下。

多重PCR对真菌性角膜炎主要致病菌的菌属鉴定

目的:建立多重PCR体系对真菌性角膜炎主要致病真菌进行快速诊断并同时进行菌属鉴定的方法。方法:建立两个多重PCR体系(体系1和体系2),对真菌性角膜炎九种主要致病真菌DNA进行检测,观察该体系对真菌临床菌株、人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的检测结果。结果:体系1对镰孢菌属扩增均产生约360bp的特异产物,对曲霉菌属、牵连青霉菌和新月弯孢菌扩增均产生约470bp的特异产物。体系2对镰孢菌属、曲霉菌属均无特异产物,而对牵连青霉菌产生了360bp的特异产物,对新月弯孢霉产生了300bp的特异产物。根据DNA模板在两个多重PCR体系中扩增出的不同特异条带可将九种真菌分为四个菌属。57株真菌临床菌株中55株的鉴定结果与常规鉴定结果一致。两体系对人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的扩增结果均为阴性。结论:通过两个多重PCR体系检测可将真菌性角膜炎在菌属水平进行诊断及鉴定。该方法具有快速、简便、特异、灵敏的特点,具有较好的临床应用前景。

腐皮镰刀菌和黄曲霉菌感染小鼠角膜的共焦显微镜研究

目的应用激光共焦显微镜活体观察腐皮镰刀菌、黄曲霉菌感染小鼠角膜的过程,为真菌性角膜炎的临床和基础研究提供影像学资料。方法20只C57BL/6小鼠随机分为两组,右眼分别接种腐皮镰刀菌和黄曲霉菌,采用角膜划痕法制作真菌性角膜炎动物模型,在造模后不同时间点行激光共焦显微镜观察。结果激光共焦显微镜图像显示:在感染早期,腐皮镰刀菌表现为短线状或蚯蚓状结构,中期为长而支挺、分支极少的长线状结构,病变部位角膜形态结构破坏明显;黄曲霉菌在早期为短小、弯曲的蠕虫状结构,中期为走行更加弯曲,分支较多呈树枝状或簇状结构,病变部位角膜形态结构消失。后期均未见真菌结构。结论不同菌种感染所致真菌性角膜炎激光共焦显微镜下菌丝有不同的影像学特点,且同一菌种不同时期在角膜组织中菌丝形态也有较大差异。

镰孢菌属真菌性角膜炎的临床及共焦显微镜特征分析

目的回顾性分析镰孢菌感染所致的真菌性角膜炎共焦显微镜影像特征及疗效。方法将43例(43眼)临床确诊的镰孢菌感染所致的真菌性角膜炎进行裂隙灯显微镜及共焦显微镜检查,并详细记录。结果43例镰孢菌感染所致的真菌性角膜炎裂隙灯显微镜观察:23例(92%)可见菌丝苔被,20例(80%)可见羽毛状浸润边缘,8例(18·6%)观察到前房积脓;共焦显微镜下显示:19例(44·2%)上皮层及浅基质层检查到长度50～200μm,直径2～5μm的树枝状菌丝;16例(37·2%)显示浅中基质层的杂乱分布的直、长线状菌丝,直径3～7μm,长度150～300μm。结论菌丝苔被、羽毛状浸润边缘是镰孢菌属感染所致的真菌性角膜炎的主要临床特点。不同菌种镰孢菌属感染所致的真菌性角膜炎的共焦显微镜影像表现较为一致,可见典型的菌丝形态。

氧氟沙星点眼及结膜囊冲洗预防LASIK术后感染作用的探讨

目的探讨0.3%氧氟沙星滴眼液手术前点眼以及结膜囊冲洗对预防LASIK术后感染的作用。方法行准分子激光治疗的近视眼患者92例183眼,手术前结膜囊冲洗前后分别做结膜囊分泌物细菌培养。结果未点眼组和点眼1、2、3、4d组结膜囊冲洗前细菌培养阳性率分别为21.21%(7/33)、19.19%(19/99)、22.22%(4/18)、5.88%(1/17)和31.25%(5/16);点眼1、2、3、4d组与未点眼组相比,经统计学处理,差异均无显著性(P>0.05,χ2=3.294)。结膜囊冲洗前细菌培养阳性率19.67%,冲洗后阳性率4.92%,经统计学处理具有显著性差异(P<0.01,χ2=18.47)。在培养阳性的45眼中,葡萄球菌39眼,占87.7%,杆菌6眼,占13.3%。结论结膜囊细菌培养阳性者中以葡萄球菌为主,LASIK术前充分的结膜囊冲洗是预防术后感染的重要措施,抗生素点眼应选择对球菌作用强兼顾杆菌的有效抗生素或联合用药。

外伤所致真菌性角膜溃疡的病原学及治疗分析

目的 研究外伤所致真菌性角膜溃疡的发病情况及疗效与病程的关系。方法 对 1 999～ 2 0 0 2年收治的主要由眼外伤所致的 57例真菌性角膜溃疡病例 ,分析发病与季节的关系 ,总结用碘酊烧灼 +局部二性霉素B、氟康唑滴眼液治疗的效果。结果 9～ 1 1月份发病最多 ;眼外伤是其主要致病原因 ,治愈 2 4例占 42 .1 1 % ,发病 1 0日内就诊者治愈率61 .9% ,2 1天后就诊者仅 1 1 ,1 1 % ,说明疗效与病程密切相关。结论 男性农民为真菌性角膜溃疡高危人群 ,应早发现。

糖皮质激素对真菌性角膜炎的影响

目的探讨糖皮质激素对真菌性角膜炎(MK)的影响。方法C57BL/6小鼠分别制作茄病镰刀菌角膜炎及烟曲霉菌角膜炎模型各112只,20只小鼠为对照组。接种后连续3d各取56只给予地塞米松滴眼液点眼,观察不同时期应用地塞米松组眼部表现及病理检查与未用药组、对照组的差别。结果应用地塞米松小鼠病程延长,接种后2周内真菌性角膜炎表现比未用药组严重,差异有统计学意义(P<0.05),病理检查显示角膜中病原菌负荷量及其侵袭力增加(P<0.05)。结论糖皮质激素通过增加真菌繁殖力及侵袭力,延长组织修复周期,加重病情延长病程。

人肝癌特异性EB病毒载体-p^(EBAF)介导hGM-CSF基因的转移及表达

目的 :探索人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (hGM -CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法 :构建 pEBAF/hGM -CSF基因克隆 ,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白 (AFP)的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC772 1,构建两转基因的细胞克隆HepG2 /hGM -CSF、SMMC772 1/hGM-CSF ,用MTT比色法测定细胞上清中hGM -CSF活性。结果 :HepG2 /hGM -CSF细胞上清hGM -CSF活性平均为 46 .5ng/ml/10 6/2 4h ,SMMC772 1细胞上清中无明显hGM -CSF活性。结论

真菌性角膜炎的早期诊断技术

真菌性角膜炎是危害人类的严重眼科疾病,早期诊断是降低其致盲的关键步骤。概述真菌性角膜炎早期诊断技术的发展简史,分析各种早期诊断技术的优缺点。启示综合运用真菌性角膜炎的早期诊断技术,可提高本病的早期诊断率,改善人类生活质量。