玉米芯水溶性多糖的分离纯化和抗凝血活性研究

从玉米芯中提取到水提水溶性粗多糖,通过乙醇分级、冻融、凝胶过滤层析,生物测定导向等手段,分离到一种能延长体外凝血时间,而且具有外源抗凝血功能的多糖CCⅢ.CCⅢ对活化部分凝血酶原时间(APTT)无显著影响,但可显著延长体外抗凝血时间(PT).将CCⅢ纯化,经糖组成分析、甲基化、高碘酸氧化、Smith降解和GC-MS分析,确定该多糖结构为:β-(1→4)Glc,(1→3)Xyl构成主链,Glc在6-O处有分枝.平均每10个糖残基有1个分枝,支链由β-(1→3)Xyl,(1→3)Glc构成.

玉米芯碱提水溶性多糖及其硫酸酯抗病毒活性的研究

从玉米芯中,用2%NaOH提取,HCl中和,经乙醇醇析,制备碱提水溶性多糖.用氯磺酸吡啶法修饰制备多糖硫酸酯.离子色谱法测其硫酸根含量为11.23%.玉米芯多糖经硫酸化修饰后对柯萨奇病毒(Coxsackie B3Virus)有一定的抑制作用,但对人全血凝血时间无显著影响.

转化pCAMBIA1301载体蓝猪耳F_1代植株的花粉育性研究

通过自花和异花授粉、电镜扫描、花粉活力测定等方法,对转pCAMBIA1301基因蓝猪耳的9个转基因株系的F1代植株的育性进行了研究.结果表明：蓝猪耳不存在自交不亲和现象但其转基因植株出现花粉败育;对9个转基因株系进行测定,发现其花粉活力与对照（77.3%）差异显著,仅为9.8%- 30.6%,表明转基因蓝猪耳花粉败育不是由于基因的插入引起的,普通培养基组培瓶蓝猪耳花药活力与在土壤中萌发的蓝猪耳花粉活力均为75%左右,表明组培环境也不是引起花粉败育的原因,因此继代培养基是引起花粉不育的唯一原因.

拟南芥抗凋亡突变体fbr136的分离鉴定与分析

植物细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)在植物的生长发育进程以及防御生物与非生物胁迫的过程中具有重要的作用.Fumonisin B1(FB1)是一种真菌毒素,是鞘脂生物合成途径中关键酶神经酰胺合酶(ceramide synthase)的竞争性抑制剂.FB1在动植物细胞中均能够诱导PCD.为了探索植物PCD的机制,通过筛选拟南芥抗FB1的突变体,分离鉴定了11个fumonisin B1resistant(fbr)突变体.遗传分析表明,这些突变体分别是由9个相同或者不同的遗传座位突变造成的.对其中一个代表性的突变体fbr136进行了详细的表型分析和初步遗传定位.fbr136对其他PCD诱导剂,例如H2O2或paraquat也表现出一定的抗性或耐受性,而且在fbr136突变体中FB1不能正常诱导PR1基因的表达,说明fbr136突变体PCD的发生可能受到阻碍.硝基四唑(Nitroblue tetrazolium,NBT)染色表明,FB1处理fbr136突变体后产生和积累活性氧(reactive oxygenspecies)比野生型植物显著降低,暗示其抗凋亡表型可能与活性氧的产生有关.推测FBR136可能是FB1在诱导PCD过程中,从鞘脂含量变化到活性氧积累变化这一途径的一个重要的调控因子.fbr136被定位于染色体Ⅲ上,与以往鉴定的抗FB1突变基因的定位都不同,因此,FBR136可能是FB1诱导PCD信号途径中的一个新基因.

《分子生物学》课程培养学生思维的几种教学方法

《分子生物学》教学内容抽象、复杂，采用形象比喻和多媒体教学以及运用启发式教学等方法可以使学生理解掌握知识，达到较好的教学效果，引导学生讨论、鼓励他们课后自主学习以及开展适时的实验教学方法，有利于培养学生的创新思维．

植物生长物质对蓝猪耳二长雄蕊运动的影响

蓝猪耳在雄蕊授粉过程中二长雄蕊存在翻转运动的现象.为了探讨蓝猪耳二长雄蕊运动的生理机制,研究外施植物生长物质及其相关抑制剂对翻转运动的作用.结果表明:GA3和NAA缩短开花后二长雄蕊至翻转结束时间分别为对照的49.1%和53.6%,GA合成抑制剂PAC和生长素运输抑制剂TIBA分别使该过程延长165.3%和59.6%.表明植物激素GA和生长素参与对蓝猪耳二长雄蕊的翻转运动的调控.

授粉后红球姜雌性生殖器官qRT-PCR的内参基因筛选

根据授粉后不同时间点的红球姜转录组数据库以及相关文献报道的传统内参基因,筛选出10个表达相对稳定的基因Actin-2(ACT2)、Actin-7(ACT7)、Beta tubulin-1(TUB1)、Beta tubulin-5(TUB5)、Alpha tubulin-3(TUA3)、Ubiquitin(UBQ)、Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH)、Elongation factor 1-alpha(EF-1α)、Cyclophilin(CYP)、Histone(H2A)作为候选内参基因,采用qRT-PCR技术,结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件对候选内参基因的表达稳定性进行分析.结果表明,在红球姜雌性生殖器官授粉后的发育过程中,GAPDH和UBQ的表达稳定性最好,均适合作为内参基因,同时使用2种作为内参基因能使实时荧光定量PCR标准化分析结果更精确.因此,最终选择GAPDH和UBQ作为实时荧光定量PCR标准化分析红球姜雌性生殖器官相关基因表达的内参基因.该研究将为探究红球姜败育的分子机理奠定基础,也为近源姜属植物内参基因的筛选提供线索.

不同光质对珊瑚姜组培苗生长的影响

红光和蓝光是植物进行光合作用和光形态建成的主要光质,不同植物对红光和蓝光光质配比的需求有所差异。本研究采用发光二极管(LED)辐射产生的不同光质,探究不同光质对珊瑚姜愈伤组织诱导、芽增殖及组培苗生长发育的影响。结果表明,在愈伤组织诱导阶段,黑暗和红光的条件更利于珊瑚姜愈伤组织的诱导和生长,二者没有显著性差异。不同光质下珊瑚姜愈伤组织诱导率从高到低依次为黑暗>红光>白光>蓝光、红蓝组合光,为节能省电,建议使用黑暗条件诱导珊瑚姜愈伤组织。在珊瑚姜芽增殖阶段,红蓝组合光下珊瑚姜芽增殖系数最高,红光次之。相比白光,红光会促进珊瑚姜组培苗长高,而蓝光使苗矮化。但红光条件下,幼苗生长状态较柔弱。红蓝组合光和白光条件下,幼苗较为健壮。因此,建议使用低耗能、低散热、寿命长的LED红蓝组合光替代普通白炽灯作为珊瑚姜芽增殖培养的光源。该研究结果为LED系统在珊瑚姜的规模化生产中的应用提供参考。

过量表达tMEK2基因的大岩桐植株对温度胁迫的反应

构建番茄中MAPKK基因tMEK2的过量表达载体并转化到大岩桐中,通过PCR和Southernblot鉴定出转基因株系并对其进行抗性分析。结果表明,转基因植株与对照相比叶片变小,叶片的叶绿素含量显著增加,在4℃低温和40℃高温胁迫之后的恢复能力明显比对照增强。

非洲菊原生质体制备及瞬时转化系统的建立

非洲菊(Gerbera hybrida)已成为研究复杂花序进化与发育的模式植物。以非洲菊无菌组培苗叶片为材料,分析不同浓度纤维素酶及离析酶配比对非洲菊原生质体提取效率的影响,建立了稳定、高效的非洲菊原生质体提取与瞬时转化体系。结果表明,以2.0%纤维素酶+0.3%离析酶组合,在0.4 mol·L^(–1)甘露醇溶液中,酶解4小时,酶解温度为25°C,得到产量高达2.2×10~7个·g^(–1) FW及活力较高的原生质体,可直接用于植物蛋白亚细胞定位和蛋白间相互作用实验,转化效率达80%。该研究建立了非洲菊原生质体制备和瞬时转化体系,为非洲菊基因功能研究奠定重要的技术基础。

分离鉴定拟南芥开花调控基因Flowering Locus D(FLD)的一个新等位突变

高等植物的开花是由植物的内在因素和环境因素两方面控制的.在拟南芥中,控制开花的几个主要的遗传位点已经被鉴定.拟南芥FloweringLocusC基因(FLC)通过作用于自主途径抑制由营养生长向生殖生长的转化.FLC的表达能被FLD抑制,而后者编码组蛋白去乙酰化酶复合体的一个成分.本研究分离鉴定了一个新的FLD等位突变体fld-5.遗传分析表明,fld-5(Wassilewskija生态型)和前人报道的fld-3和fld-4(Colombia-0生态型)是等位突变体.遗传学和分子生物学分析表明,fld-5在FLD编码区有一个移码突变,从而导致其可读框的提前终止.在fld-5突变体中FLC的表达显著增加,因此可能导致该突变体呈现出异常的晚花表型.