基于PTEN/Akt/mTOR通路探讨养肾方干预肾纤维化的自噬调控效应和机制

目的:探讨养肾方干预肾纤维化的自噬调控效应和机制。方法:将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组及养肾方低、高剂量组。假手术组仅分离左侧输尿管,其余各组采用单侧输尿管结扎的方法制备肾纤维化模型。药物连续干预4 w后,检测小鼠24 h尿蛋白、Scr、UREA、Cys-C,计算肾脏指数,HE及Masson染色观察肾组织病理改变及肾纤维化程度,电镜观察小鼠细胞中自噬小体的数量,Western Blot检测肾组织P62、Beclin-1、LC3A/B、PTEN、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组肾脏指数、24 h尿蛋白、Scr、Cys-C水平显著升高(P<0.05或P<0.01),肾脏结构受到破坏,纤维化明显,肾组织LC3A/B、P62、Beclin-1、p-mTOR、mTOR、p-Akt蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,养肾方各剂量组24 h尿蛋白、Scr显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织结构的损伤程度减轻,自噬小体数量及LC3A/B蛋白表达显著升高,肾组织Akt蛋白表达显著降低,低剂量组肾组织mTOR、p-mTOR蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:养肾方可改善肾纤维化小鼠的肾功能、抗肾纤维化,其机制可能与养肾方调控PTEN/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达,激活自噬有关。