市政道路改造管线工程施工技术

市政道路改造工程中,管线工程施工是至关重要的一环,它直接关系到道路的通行、基础设施的正常运转、城市的安全和整体形象等方面。本文将从管线工程施工的几个要点进行阐述,对市政道路改造工程中的管线工程施工技术进行探讨。

医学院校网络题库的建设

在校园网的网络环境下建立网络题库，首先要选择合适的程序语言，定义好题库的结构；然后采用开放式的题库管理，并提供手工和自动两种组卷方式。本文结合实践就此问题进行了介绍。

TRPM2蛋白在大肠杆菌的表达纯化和多克隆抗体制备

目的获得人瞬时受体电位M2(TRPM2)离子通道蛋白N末端的原核表达融合蛋白,制备兔抗人TRPM2多克隆抗体。方法采用PCR扩增编码人TRPM2蛋白N末端1～334位氨基酸残基(在人与小鼠中高度保守)的cDNA序列,将其克隆至谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒pGEX-4T-3上。将原核表达重组质粒转化BL2l(DE3)感受态细胞,IPTG诱导GST-TRPM2N融合蛋白的表达,并纯化获得相对分子质量(Mr)约70000的GST-TRPM2融合蛋白。将此融合蛋白与弗氏完全佐剂混合后采用经典的4次免疫法免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用Western blot法对该抗体进行鉴定。结果通过PCR扩增获得编码TRPM2蛋白N末端的cDNA片段并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T3中,采用IPTG诱导、蛋白质的变性与复性纯化获得融合蛋白GST-TRPM2N,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备获得特异性抗TRPM2蛋白的多克隆抗体。结论成功制备了特异性抗人TRPM2蛋白的多克隆抗体。

改革医学院校计算机基础课考试方式

为了开发一个基于Web技术的网上考试系统，首先比较了C／S(Clien/Server)结构和B／S(Browse／Server)结构在网络应用中的优缺点，然后介绍了本网上考试系统的设计方案，所采用的主要技术，以及所能实现的功能。

医学院校积件系统的建设构想

通过积件思想与课件思想的比较，论述了计算机辅助教学从课件走向积件的必然性，同时介绍了积件系统的结构，并提出了数字化积件库建设的重要性。

应用VRML建设虚拟医学教学环境的构想

为了提高教学质量，改变传统医学教学模式，可以在校园网平台下建设虚拟医学教学环境。文章着重介绍了用虚拟现实建模语言VRML建设虚拟医学教学环境的方法和步骤，以及虚拟医学教学环境的工作模式等问题。

医学院校计算机基础课教学探索

目前,医学院校计算机基础课的教学存在一些问题。针对这些问题,给出改革的方法,并展望了今后的发展方向。

在VC++中如何取得Windows的消息监控权

要取得Windows的消息监控权,就要使用到钩子。本文首先讨论了全局钩子的运行机制。由于全局钩子必须包含在DLL中,所以又介绍了MFCDLL的分类、特点和实现方法。最后通过一个实例来加以实现。

制作带字幕的启动封面的方法

通过一个实例,介绍了制作自下而上循环滚动显示文字信息的启动封面的方法。

在任务栏通知区中插入图标的方法

通过实例,介绍在任务栏通知区中插入图标的方法。

RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α转录后调控机制的初步研究

目的:探讨RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α(IκB-α)转录后调控机制。方法:构建IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒,并转染3T3细胞;体外生物素标记IκB-αmRNA 3'UTR并进行RNA pull-down;过表达及干扰HuR后,qPCR检测其对IκB-αmRNA稳定性的影响,Western bltting检测其对IκB-α蛋白表达的影响。结果:(1)IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒构建成功;(2)报告基因检测:共转染pcDNA3-HA-HuR质粒及IκB-αmRNA 3'UTR报告基因质粒后与对照组相比其数值明显增高;(3)用生物素标记的IκB-αmRNA3'UTR探针进行RNA pull-down,可以检测到特异性结合的HuR蛋白;(4)过表达HuR,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显上调;干扰HuR表达后,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显下调。结论:(1)HuR可以与IκB-αmRNA 3'UTR特异性结合并参与调节IκB-αmRNA 3'UTR的功能;(2)HuR对IκB-αmRNA稳定性无明显影响,其主要调控IκB-α蛋白表达,使其表达上调。

高龄股骨转子周围骨折病人围手术期并发症的观察与护理

目的总结高龄股骨转子周围骨折病人的围手术期并发症观察与护理。方法2005年6月至2008年3月进行手术治疗的年龄>80岁股骨转子周围骨折病人48例,股骨转子间骨折41例,股骨转子下骨折4例。统计病人一般资料,观察术前伴随症及围手术期并发症。结果并存术前伴随症33例(68.75%),术前伴随症发病率最高为贫血。发生围手术期并发症17例(35.42%),围手术期并发症发病率最高为肺部感染(16.67%)。性别、年龄、术前时间与发生围手术期并发症无明显相关性(P>0.05),唯一与围手术期并发症发生存在明显相关性的为术前伴随症,术前伴随症越多,围手术期并发症发生的可能性就越大。结论术前伴随症数量是高龄股骨转子周围骨折病人围手术期并发症的主要影响因素,做好对病人贫血、心血管系统疾病、卧床并发症、术后谵妄、下肢深静脉血栓的观察与护理,在治疗过程中具有重要的作用。

自主呼吸停止13个月的一例高位颈髓损伤病人的护理体会

目的总结一例自主呼吸停止13个月的高位颈髓损伤病人的护理体会。方法对1例自主呼吸停止13个月的高位颈髓损伤病人的进行护理,护理措施包括病房管理、严密观察病情变化、呼吸道的管理、预防并发症、心理护理等。结果通过13个月的护理,病人病情稳定,护理人员对高位颈髓损伤致自主呼吸停止的病人积累了宝贵的经验。结论良好的护理是延长病人生命的重要保证。

一例自主呼吸停止9个月的高位颈髓损伤患者的护理体会

我科收治外伤性高位颈髓损伤致高位截瘫、无自主呼吸、神志清醒患者一例，持续机械性通气治疗长达9个月，现将护理体会报告如下。

pEGFP-HuR真核表达载体的构建及热休克刺激后细胞内定位的改变

目的构建人抗原R(HuR)的绿色荧光真核表达载体,初步探讨其生物学功能。方法克隆构建pEGFP-HuR(绿色荧光蛋白HuR)真核表达载体,并使用脂质体转染的方法将pEGFP-HuR转染入NIH 3T3细胞,Western blotting(WB)检测其表达,并给予热休克处理,利用荧光显微镜观察其在细胞内定位及与应激小体的共定位情况。结果 pEGFP-HuR真核表达载体构建成功,转染入细胞后,利用WB技术及荧光显微镜技术均能观察到其在细胞内高表达,并主要定位于细胞核内,给予热休克处理后,HuR向胞外移出并形成颗粒状小体,与应激小体的主要成分G3BP1蛋白存在共定位。结论 HuR主要定位于细胞核内,给予热休克处理后,HuR向胞外移动并与应激小体形成共定位,提示HuR定位的改变可能在应激时具有重要意义。

城市微型管廊预制生产工艺研究

微型管廊不仅在城市日常运行过程中发挥着重要作用,在旧城改造与城市化进程中也有重要的作用,对于城市的发展至关重要。因此,文章对城市微型管廊的预制生产工艺进行研究,以某微型管廊的施工项目为例,在介绍其工程概况的基础上,对其预制生产工艺的流程和技术要点进行分析。实践证明,微型管廊预制生产工艺能有效节约工期,提高施工效率,具有很高的推广应用价值。

小鼠DUSP13＇-UTR双荧光素酶报告基因表达系统的建立及功能鉴定

目的建立小鼠双特异性磷酸酶1(DUSP1)3'端非翻译区(UTR)双荧光素酶报告基因表达系统,并对其进行功能鉴定。方法提取RAW264.7细胞总RNA并反转录为cDNA,以其为模板通过PCR扩增获得小鼠DUSP1 3'-UTR全长序列,酶切后克隆至pGL3-control载体荧光素酶编码基因的下游,获得重组载体LuDP,经PCR、限制性内切酶酶切、DNA序列分析鉴定正确后与内参照质粒pRL-TK共转染NIH3T3细胞,48h后检测双荧光素酶报告基因的表达。将含有小鼠DUSP1 3'-UTR的荧光素酶表达模块与来源于pRL-TK质粒的RL表达模块克隆至pLenti6-TR质粒中,获得双荧光素酶报告基因表达载体LuDP/RL,将其与RNA结合蛋白HuR表达载体(pcDNA3.1-HuR-FLAG)、mmu-miR-101a分别共转染NIH3T3细胞,检测双荧光素酶的活性,分析HuR、mmu-miR-101对荧光素酶基因表达活性的影响。结果成功构建了双荧光素酶报告基因表达载体。小鼠DUSP1 mRNA 3'-UTR可显著下调与其相连的荧光素酶的表达活性(0.14±0.01倍,P<0.01);共转染HuR可上调荧光素酶的表达活性(1.40±0.20倍,P<0.05),共转染mmu-miR-101a则可下调荧光素酶表达活性(0.57±0.18倍,P<0.05)。结论成功构建了DUSP1 3'-UTR双荧光素酶报告基因表达系统,该系统可用于转录后调控元件对小鼠DUSP1基因表达的调控机制研究。

建立与实施企业档案内部控制规范的思考

本文根据企业档案工作内部环境、风险评估、控制活动等内部控制基本规范五要素的分析,结合工作实际,对建立与实施企业档案内部控制规范进行了较为深入的思考,提出了建立与实施企业档案内部控制规范应遵循的原则和措施。

含山成立电力设施和电能保护行政职能机构

为了进一步健全全县电力行政管理机制．推动电力发展和经济社会建设，2011年10月13日．安徽省含山县成立了电力设施和电能保护办公室。归属县经济和信息化委员会管理，并从县经济和信息化委员会、供电公司抽调骨干人员，参加省级电力行政管理部门的培训、考试，取证后方可上岗。政企分离以后．拥有电力行政执法权的政府经济综合主管部门——经贸委，由于人力、物力、财力等诸多因素的制约，无法全面履行电力管理职责；

对保险公司参与新型农村合作医疗的建议

建立新型农村合作医疗制度是新时期农村卫生工作的重要内容。保险公司根据政府组织、自愿参与的基本原则,结合新型农村合作医疗建设的实际情况,扬长避短,积极参与新型农村合作医疗建设。