DEHP致草鱼肝细胞凋亡的三种检测方法分析

为了验证邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)所致细胞凋亡的最佳检测方法,本文以对数生长期的草鱼肝细胞为实验对象,通过3种不同检测方法,即AO/EB染色、Hoechst 33342染色以及Rhodamine123染色来对比研究DEHP对草鱼肝细胞凋亡的影响并比较检测方法之间的优缺点。结果显示,在三种染色方法中均可见到草鱼肝细胞凋亡现象。AO/EO染色可区分四种细胞形态,但仅可在细胞悬液状态下使用且EB染料对人体有一定毒害作用。Hoechst 33342染色易区分正常细胞与凋亡细胞,但少数细胞的染色结果会与实际凋亡情况相反,因此该染色方法不应单独使用。Rhodamine123染色对细胞无任何毒性作用可在第一时间提示细胞凋亡的发生,但染色可能与线粒体能量状态无关,染色剂在细胞内保留性差,膜电位的变化也可能由其他因素导致,使测量结果没有指向性。综上所述,三种检测方法均表明DEHP可以诱导草鱼肝细胞凋亡,将对水生生物造成严重威胁。若要真正有效的反映细胞发生凋亡的情况,需结合多种染色方法综合分析。