烧伤创面早期深度变化病理学研究

烧伤创面早期深度变化病理学研究孙家玲，王晓红，葛绳德，陈玉林热力对皮肤组织的损伤是：一个动态的变化过程。目前临床上判断烧伤深度仍以经验为主，尚无一个客观的评价指标。另外，烧伤创面本身可以有继发性损伤和创面逐步加深加重的变化。而实验性烧伤病理学检查能够...

一种提高皮肤表皮郎格罕细胞ATP酶染色显示的改良方法

一种提高皮肤表皮郎格罕细胞ＡＴＰ酶染色显示的改良方法孙家玲，王文正，戴方平，陈玉林，葛绳德严重大面积烧伤创面愈合的进程与机体的免疫状态有关。而表皮郎格罕细胞（Ｌａｎｇｅｒｈａｎ’ｓｃｅｌｌ，ＬＣ）是一种在皮肤分布广泛，具有重要免疫功能的细胞，在皮肤免...

中药脱痂膏对烧伤创面的作用

目的：探讨外用中药脱痂膏对深度烧伤创面的脱痂机制。方法：取经脱痂膏和Ａｇ－ＳＤ霜换药的深Ⅱ度烧伤创面组织标本及渗液，用抗ＣＤ６８单抗标记深度烧伤创面组织中的巨噬细胞，并计数创面渗液细菌，比较两组间的差异。结果：使用脱痂膏的创面组织含有较多的ＣＤ６８＋细胞（巨噬细胞），而创面渗液细菌数量与Ａｇ－ＳＤ组无明显区别。结论：脱痂膏通过招引巨噬细胞至创面局部，吞噬和分解坏死组织，从而达到脱痂的目的。

胶原作为体内支撑材料的研究——戊二醛交联胶原的动物实验

从猪皮真皮提取胶原,经胃蛋白酶处理后再组建成胶原溶液(20mg/ml),用0.06—0.1％戊二醛交联后,经冻干、漂洗后作家兔皮下埋藏,戊二醛胶原埋藏后的90天,有成纤维细胞侵入和新生的血管。并证明应用0.06％戊二醛交联也可达到预防胶原生物降解。

胶原对小鼠烧伤创面愈合的影响

本实验将胶原用于小鼠烧伤创面局部,观察对创面愈合的影响,以探讨其应用价值。实验用18～22 g的小鼠20只,分为烧伤胶原治疗组和烧伤对照组。制作成7％Ⅱ度烧伤模型,伤后分别在创面涂用胶原和盐水(0.4ml/次,每日1次)。通过创面愈合率和光镜的观察,发观胶原对创面愈合有明显的促进作用。

Ⅲ型胶原在烧伤创面的应用

胶原作为一种新的生物材料已应用于临床。Ⅲ型胶原有粘附作用,抗原性低,无毒性,无刺激性,在37℃下能成膜,作表皮细胞培养的支持物时,有促使表皮细胞贴壁和增殖作用。我们将自制的猪皮Ⅲ型胶原应用于创面换药,能促进创面愈合,取得较满意的效果。

修复细胞和细胞外基质在创面愈合过程中的动态分析

目的：动态分析烧伤创面中性粒细胞、巨噬细胞、Ｔ淋巴细胞及成纤维细胞的时空分布，以及细胞外基质主要成分的变化，阐述上述变化与创面愈合的联系。方法：大鼠创面组织ＨＥ、ＶＧ、Ａｌｃｉａｎｂｌｕｅ染色，并进行图像分析；免疫组化及生化方法分别观察细胞与细胞外基质的变化。结果：中性粒细胞于伤后第１天最高，并主要分布于真皮下组织，第５天已恢复到正常水平；巨噬细胞与Ｔ淋巴细胞伤后第３天才明显增多，分别于伤后第５天，第７天达峰值，此期上皮细胞的迁移、增殖最为活跃；成纤维细胞于伤后第３天开始增加，并在上皮化接近完成、真皮层重建较活跃的期间增至最高值。细胞外基质的主要成分─－胶原与氨基聚糖都呈现从破坏分解到重新合成的变化模式。结论：中性粒细胞未参于创面的修复，巨噬细胞、Ｔ淋巴细胞和成纤维细胞是创面的主要修复细胞。

大鼠烧伤后肺中性粒细胞浸润及肺损伤

目的：研究大鼠烧伤后肺中性粒细胞（ＰＭＮ）浸润及肺损伤的时间过程。方法：大鼠背部皮肤浸入沸水１０ｓ，致１５％ＴＢＳＡⅢ度烧伤。伤后不同时间点杀死大鼠，测定肺净含水量、肺微血管通透性的变化、肺间质及肺泡ＰＭＮ的浸润。结果：烧伤后４～８ｈ，肺ＰＭＮ浸润及肺损伤明显；烧伤后１２～１６ｈ，肺巨噬细胞数量增加，肺损伤及肺ＰＭＮ浸润逐渐减轻；烧伤后２０～２４ｈ，肺炎症反应基本消退。结论：大鼠皮肤烧伤可以导致远隔部位肺ＰＭＮ浸润和损伤。

烧伤皮肤组织制片法的改良

近年来免疫组织化学、原位核酸分子杂交等新技术被广泛地应用于病理学的研究和临床病理诊断，但这些新技术、新方法的应用，都必须建立在高质量的组织制片基础上，否则影响到实验结果。皮肤组织已被公认是最难制片的组织之一，而烧伤后的皮肤组织制片则更为困难［１］。为...

严重烫伤休克大鼠肾脏组织血管内皮细胞生长因子表达增加

目的：研究正常和烫伤大鼠肾脏组织血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）表达情况。方法：实验分正常对照组、烫伤后６，１２，２４ｈ组。免疫组织化学采用ＡＢＣ法。结果：正常对照组和烫伤各组部分肾小管和集合管呈阳性反应，尤以近曲小管最为明显，而肾小球未见阳性反应；烫伤各组的肾小管上皮细胞的阳性反应均较正常对照组强烈，以伤后１２ｈ组最强，伤后２４ｈ组次之。再次是伤后６ｈ组。结论：ＶＥＧＦ可能参与烧伤休克的发生和发展，还可能与烧伤后肾功能损伤、创面愈合存在一定关系。

免疫抑制对大鼠浅Ⅱ度烧伤创面转移生长因子α,β和血小板衍生生长因子表达的影响

为将６０Ｃｏ照射造成免疫抑制，观察全身免疫抑制对浅Ⅱ度烧伤创面局部转移生长因子α、β（ＴＧＦ－α，ＴＧＦ－β）和血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）ｍＲＮＡ表达的影响。结果显示：正常组渗液细胞中这３种因子的表达极少。与免疫抑制组相比，烧伤对照组的ＰＤＧＦ和ＴＧＦ－α在伤后１ｄ和３ｄ明显升高，而免疫抑制组无明显变化。ＴＧＦ－β在两组均有表达。说明创面局部生长因子ＰＤＧＦ和ＴＧＦ－α的表达减少是免疫抑制造成创面愈合不良的直接原因。ＴＧＦ－β的变化反映其生物学作用的复杂性。

严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞CD14的动态变化

目的：探讨烧伤后早期腹腔巨噬细胞（Ｍφ）ＣＤ１４分子的动态变化。方法：采用ＢＡＬＢ／ｃ小鼠２０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞，用免疫组织化学方法，观察了烧伤复苏组和延迟复苏组伤后１２ｈ内不同时间ＣＤ１４的变化。结果：烧伤复苏组和延迟复苏组在伤后１ｈ腹腔ＭφＣＤ１４表达就明显增加，复苏组、延迟复苏组阳性强度分别在伤后２，８ｈ达到峰值，这种改变在伤后１２ｈ内呈持续状态。从伤后８ｈ起，延迟复苏组小鼠上述改变均较立即复苏组明显。结论：在伤后过度炎症反应的发生发展中起重要作用的Ｍφ的激活及其反应性的增高，可能与烧伤引起ＣＤ１４的上调，从而使其增敏有关。

严重烧伤对小鼠CD14 mRNA表达的影响

单核、巨噬细胞（Ｍφ）被激活产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）等重要炎性介质的最基本途径是脂多糖（ＬＰＳ）／脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）复合物与单核细胞、Ｍφ表面的ＣＤ１４结合，继而引发细胞内一系列反应［１］。ＣＤ１４能提高免疫细胞对内毒素的敏感性，而使内毒素的...

膜引导组织再生技术应用于即刻种植的细胞学研究

即刻种植(将种植体种植在新鲜的拔牙槽)较二期种植有其优越性.近年来,GTR技术(膜引导组织再生)利用生物相容性膜作为屏障阻止结缔组织、上皮组织长入某些区域,从而保证某些组织细胞如骨细胞在该区域生长修复,作为一种方法应用于即刻种植以提高种植体周围的骨整合.本文应用牙龈上皮细胞体外培养方法,研究上皮细胞在致密型羟基磷灰石、加成型硅橡胶2种不同性质薄膜材料上生长情况,为今后的研究和临床应用提供依据.本实验将正常人牙龈组织块分别与加成型硅橡胶、致密型羟基磷灰石联合培养8天,在倒置显微镜下观察其生长晕(outgrowth)扩展情况并进行统计学处理,结果表明牙龈上皮细胞—硅橡胶联合标本第6、第8天生长晕扩大不显著(P>0.05),而致密型羟基磷灰石—牙龈上皮细胞联合标本第6、第8天生长晕扩展显著(P<0.01),提示硅橡胶能阻止上皮细胞生长,有利于骨细胞生长修复,这可能除了由于机械阻挡作用外还与其本身结构、化学成分有关,使上皮细胞生长受到抑制.符合GTR技术对非降解性膜的要求,此结果为临床应用GTR技术提供了体外实验的理论依据.

人牙龈上皮细胞在口腔 BMT 材料上生长的实验研究

用龈上皮细胞在底物上培养，倒置显微镜下观察生长晕（ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ）扩展的程度，扫描电镜下观察细胞贴附情况。细胞在１～８ｄ的培养中在硅酮底物上形成的生长晕明显小于在羟基磷灰石上的生长晕。电镜观察见上皮细胞直接附着ＨＡ，可见分裂相，上皮细胞不附着硅酮，少分裂相。硅酮作为生物隔膜材料（ＢＭＴ）能阻止上皮细胞生长且对牙周病治疗防止龈上皮过长有一定临床意义。

上消化道疾病的胃粘液-碳酸氢盐屏障功能检查

本文分析了10例正常人和88例上消化道疾病患者胃粘液-碳酸氢盐屏障功能,证实其在正常情况下有中和胃酸、减弱胃蛋白酶活性的作用。球溃患者中和指数和粘液保护指数明显低于正常,可能是伴发胃部病变的一个原因,胃部疾病患者HCO3-和酸性粘蛋白减少是病变损伤上皮细胞的继发结果,胃溃患者中性粘蛋白升高可能与胆汁返流加速可见性粘液分解有关,某些药物对HCO3-分泌可能有促进作用。

胶原人工皮覆盖大鼠自体微粒混合移植

应用胶原人工皮覆盖自体微粒皮进行了全层皮肤切除的创面混合移植。实验以猪皮和尸体皮作对照,结果表明,胶原人工皮与创面的粘附力和止血作用比猪皮或尸体皮好(P<0.01)。对创面的愈合作用三者相同(P>0.05)。因此,我们认为胶原人工皮可以替代异体皮或异种皮暂时覆盖Ⅲ度烧伤切痂创面,而且愈合创面的皮下有新生血管和成纤维细胞浸润。

免疫抑制大鼠浅Ⅱ度烧伤创面白介素1、6和肿瘤坏死因子活性变化

目的：研究全身免疫抑制对浅Ⅱ度烧伤创面的ＩＬ－１，ＩＬ－６和ＴＮＦ活性影响。方法：清洁级ＳＤ大鼠分３组：对照组、烧伤对照组和免疫抑制组。以６０Ｃｏ照射造成动物免疫抑制，烧伤对照组及免疫抑制组动物背部制备１５％ＴＢＳＡ浅Ⅱ度烧伤，对照组动物假烫，各组创面两侧各植入海绵一块。观察各组伤后６ｈ，１，３，７，１０和１４ｄ海绵渗液中ＩＬ－１，ＩＬ－６和ＴＮＦ的水平。结果：正常组渗液中３种因子均在极低的水平。与免疫抑制组相比，烧伤对照组的ＩＬ－１和ＩＬ－６在伤后６ｈ明显升高，其值分别为（１．６±０．７）×１０３．（１．５±０．６）×１０４Ｕ／ｍｌ（ｐ＜０．０１），ＩＬ－１在伤后１４ｄ再次明显升高，其值为（１．５±１．２）×１０３Ｕ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）。ＴＮＦ在早期无明显升高，在伤后第１０ｄ有明显的升高，其值为６３±３７Ｕ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）。而免疫抑制组，３种因子仅在伤后１ｄ有明显的升高，其值分别为ＩＬ－１（２．７±０．８）×１０３Ｕ／ｍｌ，ＩＬ－６（１．０±０．３）×１０４Ｕ／ｍｌ，ＴＮＦ１９．４±１０．６Ｕ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１），表现为孤立的、滞后的单峰。结论：免疫抑制时ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ的平衡失调是导?

自异体表皮细胞混合培养悬液移植对大鼠烧伤创面愈合的影响

自异体表皮细胞混合培养悬液移植对大鼠烧伤创面愈合的影响俞为荣，苏波，孙家玲，赵慧玲，陈玉林，葛绳德自从Ｇｒｅｅｎ和Ｒｈｅｗａｌｄ建立表皮细胞培养技术以来，培养的自体表皮细胞膜片已成功地应用于临床治疗各种皮肤缺损中，如大面积烧伤创面和慢性溃疡创面等。经...