青蒿琥酯通过Akt/Snail信号通路逆转结直肠癌细胞上皮间充质转化

目的:探讨青蒿琥酯(ART)对结直肠癌HCT-8细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并探讨ART对结直肠癌细胞迁移,侵袭,EMT能力和蛋白激酶B(Akt)/Snail信号通路的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同药物浓度的ART对HCT-8细胞增殖的影响,采用伤口愈合实验和transwell实验,检测ART对结直肠癌HCT-8细胞迁移侵袭能力的影响。免疫荧光双重染色法检测不同ART浓度对肿瘤细胞HCT-8细胞中EMT相关蛋白波形蛋白(vimentin),E-钙黏蛋白(E-cadherin)分布情况的影响。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin),vimentin,E-cadherin的蛋白表达情况的影响以及对Akt/Snail信号途径中相关蛋白Akt1,磷酸化Akt1(p-Akt1)和Snail1表达的影响。结果:不同浓度的ART作用于HCT-8后,计算细胞增殖抑制率,并绘制出量效曲线,得出ART对HCT-8细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(16.67±1.95)μmol·L^(-1),且与药物质量浓度呈剂量依赖关系,由此实验处理组分为4组,空白组(0μmol·L^(-1)),ART低剂量组(2μmol·L^(-1)),ART中剂量组(10μmol·L^(-1)),ART高剂量组(50μmol·L^(-1));与空白组比较,ART组可显著抑制HCT-8细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);与空白组比较,ART组中相关蛋白E-cadherin表达明显上调,vimentin和N-cadherin表达明显下调,且p-Akt1和Snail1的表达水平明显降低从而抑制EMT(P<0.05)。结论:ART可以抑制EMT引起的迁移和侵袭,其机制可能与抑制Akt/Snail通路活化从而逆转EMT有关。