镍染毒大鼠睾丸生精细胞凋亡及其对Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨硫酸镍诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的类型及其对生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达和雌二醇水平的影响。方法健康性成熟Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组,正常对照组,硫酸镍1.25、2.5、5.0 mg/kg 3个剂量组。腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡;免疫组化SABC法检测生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达;放射免疫法检测血清雌二醇(E2)水平。结果与对照组比较,各剂量组大鼠睾丸生精细胞凋亡增多(P<0.05),且凋亡细胞主要是生精早期和晚期阶段的精原细胞和精母细胞。各剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性表达减少而Bax阳性表达增多,且血清E2水平降低(P<0.05)。结论硫酸镍可诱导大鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡,其机制可能与生精细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调以及雌二醇水平降低有关。

硫酸镍致大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体损伤

目的从氧化应激角度探讨硫酸镍(NiSO4)对大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体的毒性作用。方法健康性成熟Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组:生理盐水(NS)组,硫酸镍(NiSO4)1.25,2.50,5.00 mg/kg组,等容积腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d。制备睾丸组织匀浆,离心提取线粒体和微粒体,采用分光光度法检测睾丸细胞线粒体及微粒体中脂质过氧化物(LPO)、总抗氧化能力(T-AOC)、活性氧(ROS)水平的变化。结果染毒组与对照组比较,大鼠睾丸脏器系数无明显变化(P>0.05)。镍可引起睾丸组织中LPO、ROS含量升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);各染毒组T-TOC均低于对照组(P<0.05)。结论镍对大鼠睾丸细胞的损伤可能与其所致的睾丸细胞线粒体及微粒体氧化应激效应增强有关。

硫酸镍对大鼠心肝肾ATPase毒性的实验研究

Objective To inquire into the mechanism of toxic effect of nickel sulfate (NiSO 4) on heart, liver and kidney.Methods Several groups of rats were exposed to NiSO 4 at dose of 2.5,5 0, 10.0 mg/kg through intraperitoneal infection for 10 days, the cell membrane of myocardium, liver and renal tubules were prepared to assess the activity of Na +·K + ATPase, Ca 2+ ATPase with spectrophotometric assay. Results The result showed that NiSO 4 was able to inhibit obviously the activity of Na +·K + ATPase, Ca 2+ ATPase of the three kinds of cell membrane, and its inhibitiue effect was shown to be the strongest in kidney and the weakest in liver.Conclusion The damage on rat’s heart, liver and kidney by NiSO 4 could be related to the inhibitive activity of cell membrane ATPase. However, the mechanism of toxic effect of nickel sulfate on heart, liver and kidney should be studied further.

镍染毒对小鼠脾脏的脂质过氧化损伤

目的 从氧化应激角度探讨硫酸镍致小鼠脾脏脂质过氧化水平和抗氧化能力的变化。方法 硫酸镍0 8,2 0 ,5 0mg/kg小鼠每日腹腔注射染毒 ,连续 30d。制备脾脏组织匀浆 ,采用分光光度法测定脾脏总抗氧化能力(T -AOC)和谷胱甘肽 (GSH)含量 ;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶 (SOD)活力 ;用TBA法测定丙二醛 (MDA)含量。结果 镍可抑制小鼠脾脏SOD活力 ,使T -AOC和GSH含量降低 ,MDA含量增加 ,并随染毒剂量增加 ,其效应逐渐增加。结论 硫酸镍可致小鼠脾脏抗氧化能力下降 ,引起脂质过氧化损伤。

镍铬钴混合物对小鼠肝脏毒作用机制的研究

目的 探讨镍铬钴混合物致小鼠肝脏损伤的机制 ,为早期防治镍铬钴混合物联合毒性所致的肝脏损伤提供理论依据。方法 模拟金川矿区矿石中Ni、Cr、Co平均含量百分比 (0 2 6∶0 3 0∶0 0 2 ) ,连续 10d小鼠腹腔注射硫酸镍 2 5mg/kg、重铬酸钾 0 14mg/kg、氯化钴 0 41mg/kg及混合物 0 0 9,0 17mg/kg染毒。制备肝细胞膜 ,采用定磷比色法检测肝细胞膜Ca2 + -ATPase活性 ;PDE法检测钙调素 (CaM)含量 ;TBA法检测MDA含量和邻苯三酚自氧化改进法测定SOD活性。结果 各单体和混合物明显抑制肝细胞膜Ca2 + -ATPase活性 ,使肝组织中钙调素 (CaM )含量降低 ,MDA含量升高的同时抑制SOD活性 ,尤以混合物组显著 ,并且混合物毒性大于各单体毒作用。结论 混合物在体内可能产生联合毒性 ,抑制肝细胞膜Ca2 + -ATPase活性 ,使钙调素 (CaM)含量降低 ,导致钙稳态失衡 ;

扶正解毒颗粒对硫酸镍致大鼠睾丸生殖细胞损伤的拮抗作用

目的探讨扶正解毒颗粒(FJK)对镍致大鼠睾丸生殖细胞毒作用的拮抗作用。方法选择健康成年Wistar雄性大鼠,硫酸镍(NiSO4)2.5mg/kg腹腔注射染毒,FJK2.5、5.0和10.0灌胃处理。采用流式细胞术检测各组大鼠睾丸组织中各倍体细胞所占的比率及其细胞周期的变化;透射电子显微镜观察睾丸细胞的形态学变化。结果NiSO4可使睾丸组织G0/G1期细胞数减少,G2/M期细胞数增加(P<0.05);各倍体细胞比率的分析发现,1C∶2C、4C∶2C和4C∶S比值升高(P<0.05);用FJK处理后,FJK5.0、10.0g/kg组睾丸G0/G1期细胞数回升,G2/M期细胞数减少,各倍体细胞比率趋于正常,与NiSO4组比较差异有统计学意义(P<0.05)。电子显微镜观察显示,NiSO4可引起大鼠生殖细胞核固缩、核质间隙增宽,核膜皱缩、染色质聚集、胞浆可见空泡、线粒体肿胀等不同程度的形态学改变;用FJK处理后,FJK5.0、10.0g/kg组上述表现明显改善,尤其FJK10.0g/kg组超微结构基本恢复正常。结论FJK对NiSO4所致大鼠睾丸各倍体细胞比率、细胞周期和超微结构的异常改变均具有逆转作用。

镍铬钴混合物对肾毒作用机理的研究

目的 探讨镍铬钴混合物致肾毒作用机理 ,为早期防治镍、铬、钴联合毒性所致的肾脏损伤提供理论依据。方法 模拟金川矿区矿石中镍、铬、钴平均含量百分比 (Ni∶Cr∶Co =0 2 6∶0 30∶0 0 2 ) ,连续 10日小鼠腹腔注射硫酸镍2 5mg/kg、重铬酸钾 0 14mg/kg、氯化钴 0 4 1mg/kg及其混合物 0 0 9mg/kg、0 17mg/kg染毒。制备肾小管细胞膜 ,采用定磷比色法检测肾小管细胞膜Na+ K+ -ATPase、Ca2 + -ATPase活性。结果 各单体和混合物明显抑制肾小管细胞膜Na+ K+ -ATPase、Ca2 + -ATPase活性 ,尤以混合物组显著 ,并且混合物毒性大于各单体毒作用。结论 混合物在体内可能产生联合毒性 ,抑制肾小管细胞膜ATPase活性而致肾脏损伤。

镍对雄性小鼠脾脏损伤的研究

予小鼠腹腔注射硫酸镍0.8、2.0、5.0 mg/kg染毒,连续30 d。制备脾脏组织匀浆,采用酶法测定一氧化氮合酶(NOS)活力、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力;分光光度法测定还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)。结果染镍各剂量组NOS活力显著低于生理盐水(NS)组,NO含量亦低于生理盐水组;镍可抑制SOD活力,使T-AOC、GSH含量降低,而引起MDA含量升高,且随着染毒剂量的增加,其效应逐渐增强。

硫酸镍、重铬酸钾和氯化钴混合物对小鼠心肌钠钾泵、钙泵活性的影响

模拟金川矿区矿石镍、铬、钴平均含量百分比 ( 0 2 6∶0 3 0∶0 0 2 ) ,连续 10日小鼠腹腔注射硫酸镍、重铬酸钾、氯化钴及其混合物染毒。制备心肌细胞膜 ,定磷比色法检测各单体和混合物对钠钾泵、钙泵活性的影响。结果发现 :各单体和混合物明显抑制心肌细胞膜钠钾泵、钙泵活性。提示 :混合物在体内可能产生联合毒性 ,引起心肌细胞膜电位变化、离子运动异常 ,从而导致心肌损伤。

硫酸镍对小鼠脑组织钙调素、ATP酶活性的影响

为探讨镍化合物对中枢神经系统毒作用及其机理 ,用小鼠腹腔注射 (ip)硫酸镍染毒 ,检测小鼠自发活动和协调运动 ;并于 0～ 4℃条件下制备脑匀浆 ,梯度分离酶蛋白 ,用比色法检测脑组织中Na+·K+—ATPase、Ca2 +—ATPase活性及钙调素 (CaM )含量。结果表明 :ip染毒后小鼠脑匀浆中Na+·K+—ATPase、Ca2 +—ATPase活性及钙调素含量明显降低。提示 :镍可通过血脑屏障 ,抑制能量供给、信息传递 ,导致外周运动神经瘫软 ,小鼠活动次数降低 ,伏着力下降 。

镍致小鼠中枢神经毒性机制的研究

对小鼠脑内微量注射硫酸镍 0 2mg/kg ,0 4mg/kg ,0 8mg/kg一次性染毒 ,制备脑突触小体。检测脑组织Ca2 + ATPase活性、钙调素 (CaM)以及丙二醛 (MDA)、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果显示 ,硫酸镍明显抑制脑突触小体膜Ca2 + ATPase活性 ,使CaM含量降低 ;脑组织中MDA含量升高的同时SOD活性受抑制 ,并引起GSH含量减少。说明硫酸镍可导致钙稳态失衡 。

硫酸镍对大鼠睾丸生精细胞c-Fos和HSP70 mRNA表达的影响

目的观察硫酸镍（NiSO4）对大鼠睾丸生精细胞c—Fos和HSP70mRNA表达的影响。方法健康性成熟Wistar雄性大鼠32只，随机分为4组：正常对照组（Ns组）、NiSO4 1．25、2．5、5．0mg／kg组。腹腔注射染毒，1次／d，连续30d。采用原位杂交技术检测大鼠睾丸生精细胞c—Fos和HSP70 mRNA的表达水平。结果NiSO4 2．5、5．0mg／kg组睾丸精原细胞c-Fos mRNA阳性表达细胞数减少，主要见于生精周期Ⅰ～Ⅵ期、Ⅻ～ⅩⅢ期和ⅩⅣ期；精母细胞HSP70 mRNA阳性表达细胞数明显增多，主要见于生精周期Ⅰ～Ⅵ期和Ⅻ～ⅩⅢ期。结论NiSO4引起大鼠睾丸生精过程障碍可能与其所致的精原细胞c—Fos mRNA表达下调和精母细胞HSP70 mRNA表达上调有关。

镍铬钴混合物对小鼠免疫毒性的研究

目的 研究镍、铬、钴混合物对免疫功能的影响 ,对防治混合物联合毒性提供理论依据。方法 模拟金川矿区矿石中Ni、Cr、Co平均含量百分比 ( 0 2 6∶0 30∶0 0 2 ) ,连续 10d小鼠腹腔注射染毒。采用特异性免疫指标 :血清凝集素、溶血素、抗体分泌细胞、α ANAE+率、体内淋巴细胞转化率和非特异性免疫指标 :巨噬细胞吞噬率、吞噬指数 ,观察混合物毒性。结果 混合物可导致各项免疫指标降低 ,抑制机体免疫功能 ,尤以混合物大剂量组显著。结论 混合物在体内可能产生联合毒作用 ,导致机体免疫功能低下 。

硫酸镍对小鼠骨髓有核细胞DNA、RNA的影响

镍毒性的系列研究发现：大剂量镍抑制粒细胞生成，剂量不详〔１〕。为了探讨粒细胞减少的原因，本文采用细胞组织化学法，以ＤＮＡ、ＲＮＡ为指标，探讨镍致粒细胞毒性的机制。材料与方法（１）材料：健康昆明种小白鼠，１８～１９ｇ，雌雄各半，由兰州医学院动物室提供，...

镍对小鼠外周血红细胞膜ATP_(ase)活性的影响

目的 探讨硫酸镍小鼠脑内微量注射染毒对其外周血红细胞膜Na+ K+ ATPase、Ca2 + ATPase活性的影响 ,为镍毒性的防治提供理论依据。方法 对小鼠采用脑内微量注射硫酸镍 0 2mg/kg、 0 4mg/kg、 0 8mg/kg一次性染毒 ,用定磷比色法检测红细胞膜Na+ K+ ATPase、Ca2 + ATPase活性。结果 硫酸镍明显抑制红细胞膜ATPase活性 ,并呈剂量 效应关系。结论 镍可导致红细胞损伤 ,从而引起脑组织缺氧 ;

镍对大鼠脑组织一氧化氮、一氧化氮合酶的影响

给大鼠腹腔注射染毒硫酸镍 1 2 5mg/kg、 2 5mg/kg、 5 0mg/kg ,每日 1次 ,连续 2周。用原子吸收分光光度法检测脑组织中Ni含量 ;酶法检测脑组织中一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果显示硫酸镍腹腔注射染毒后脑组织中镍含量显著增多 ,使一氧化氮合酶 (NOS)活性增强的同时引起一氧化氮 (NO)含量的升高。提示镍可透过血脑屏障进入脑组织 ,引起一氧化氮 (NO)过量合成而致中枢神经损伤。

硫酸镍对白细胞系统的影响

采用小鼠连续腹腔注射硫酸镍2.5,5.0,10.0mg/kg,染毒10d,观察硫酸镍对白细胞系统的毒性。结果表明硫酸镍可导致白细胞总数减少;白细胞分类计数以中性粒细胞减少为主,淋巴细胞数相对增多。提示硫酸镍对白细胞系统具有明显毒性损害。