人体正中神经内部显微结构的三维重建与可视化研究

[目的]探索应用计算机处理人体正中神经全长连续冰冻组织切片的二维图像信息,开发3DNerve神经三维可视化系统,重建人体正中神经内部显微结构并实现三维可视化。[方法]取新鲜人尸正中神经标本1例,以人长发为定位线、OCT包埋剂包埋、采用连续冰冻组织切片、乙酰胆碱脂酶组织化学法染色、高分辨率扫描仪获取二维数码信息后、应用3DNerve对正中神经显微结构进行三维重建。[结果]正中神经在不同断面神经束的数目、位置以及神经束内神经纤维的性质变化较大。连续断面观察显示各神经束均是混合束,未见有纯粹的感觉束或运动束的出现。通过3DNerve可在任意断面放大的视野下观察正中神经的显微结构,追踪各神经束在正中神经内的立体行径。从而动态地展示正中神经内部神经束的复杂结构。[结论]重建的正中神经三维可视化真实地再现正中神经干全长及其内部各神经束和束组的三维立体结构,可为临床修复正中神经损伤提供精确的断层解剖图像。

静脉滴注联合局部使用氨甲环酸在老年全膝关节置换术围手术期血液管理中的作用

目的探讨手术切皮前静脉滴注、术中局部浸泡和术后关节腔内灌注等3种方式联合使用氨甲环酸在减少老年人工膝关节置换手术(TKA)围手术期失血和输血比例中的作用。方法选取诊断为膝关节骨性关节炎且拟行单侧TKA患者共60例,随机分成观察组(30例)和对照组(30例),观察组患者分别于切皮前静脉滴注1 g氨甲环酸、术中氨甲环酸原液局部浸泡和缝合后关节腔内灌注1 g氨甲环酸(50 m L),对照组患者于切皮前静脉滴注1 g氨甲环酸;术后常规夹闭引流管6 h。分别计算两组患者围手术期失血量、输血比例、术后24 h和72 h的血红蛋白、红细胞比容和血浆D-二聚体及术后深静脉血栓发生率等。结果两组患者的一般临床资料(性别、年龄、体质指数、术前红细胞比容、血浆D-二聚体和血红蛋白)等差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组围手术期失血量和术后引流量均明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后1 d和3 d血红蛋白及红细胞比容明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者输血比例上的差异也有统计学意义(P<0.05);住院期间及术后3个月的随访中,两组均未出现下肢深静脉血栓、感染和肺动脉栓塞等并发症。结论术前、术中和术后3种不同方式联合使用氨甲环酸可有效减少TKA围手术期失血量和术区引流量,降低输血比例,且不增加血栓性并发症的发生率,从而有助于实现TKA术后的快速康复。

Livin和PlGF在骨肉瘤中的表达及临床意义

背景与目的:骨肉瘤是临床常见的成骨性恶性肿瘤,预后差。Livin是近年来发现的人凋亡抑制蛋白家族的新成员,特异性高表达于某些实体肿瘤组织,能抑制细胞凋亡。胎盘生长因子(placentalgrowth factor,PlGF)在肿瘤等病理性血管生成中发挥着极为重要的作用。本研究旨在探讨Livin及PlGF在骨肉瘤中的表达,分析两者在骨肉瘤的临床诊断及治疗中的意义。方法:应用免疫组化方法检测本院骨科于2003年—2008年间收治的57例骨肉瘤患者的肿瘤组织及10例正常骨组织标本中Livin及P1GF的表达,根据阳性细胞百分比和染色强弱判断两者的表达水平,分析两者表达的相关性及与骨肉瘤各项临床病理指标之间的关系。结果:Li vin与PlGF在57例骨肉瘤患者的肿瘤组织中阳性表达率分别为52.6%和64.9%,而在10例正常骨组织中均不表达,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。Livin与PlGF阳性表达与骨肉瘤大小及Enneking分期相关,与患者年龄、性别、病理分型及肿瘤部位无关;Livin的阳性表达与PlGF的阳性表达之间无相关性(P=0.642)。结论:Livin及PlGF均在骨肉瘤中高表达,并与骨肉瘤的肿瘤大小及Enneking分期呈正相关,可能与骨肉瘤的发生、发展相关。

RNA干扰Livin基因表达增强骨肉瘤MG-63耐药细胞对多柔比星的化疗敏感性

目的:研究凋亡抑制蛋白基因Livin在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法:应用多柔比星逐步诱导法诱导人骨肉瘤MG-63细胞建立耐药细胞株,MTT实验检测耐药细胞株的耐药指数,Western blotting法检测MG-63细胞和耐药细胞中Livin蛋白表达的差异。构建Livin shRNA真核表达载体,应用LipofectmineTM2000转染至耐药骨肉瘤细胞中,Real-time PCR和Western blotting分别检测Livin shRNA转染前后MG-63耐药细胞中Livin基因和蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,MTT法检测对多柔比星化疗敏感性的变化。结果:成功构建重组质粒p Silencer3.1-H1 neo-Livin si。诱导的耐药细胞MG-63/R对多柔比星的耐药指数为81.32±5.33。Livin shRNA可抑制MG-63细胞中Livin基因和蛋白表达,明显低于空白对照组和非特异性转染组(分别下调72%和69%,P<0.05)。特异性转染Livin shRNA组MG-63/R细胞的凋亡率显著高于未转染组和非特异性转染组[(22.4±3.2)%vs(4.2±1.1)%、(4.7±0.6)%,P<0.05]。3组细胞在加入多柔比星后增殖均受到不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但特异性转染组细胞的存活率均显著低于其他两组(P<0.05)。结论:应用RNA干扰技术下调Livin的基因表达可有效促进耐药MG-63骨肉瘤细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性。

骨肉瘤基因治疗研究进展

新辅助化疗结合手术(截肢或保肢)使骨肉瘤患者5年生存率提高至50%～65%,但仍有近三分之一原发病变患者及80%有转移病变患者会复发,复发患者生存率近20年未见明显改善。近年随着分子生物学研究的发展,对骨肉瘤发生机制在分子水平有了一定认识,骨肉瘤综合治疗,尤其是基因治疗研究也有一定进展。该文就骨肉瘤基因治疗载体、抗骨肉瘤血管生成基因治疗、促骨肉瘤细胞凋亡基因治疗、骨肉瘤免疫基因治疗及自杀基因治疗等研究进展作一综述。

关节镜下可吸收螺钉治疗前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折

目的探讨关节镜下可吸收螺钉治疗前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折的方法及临床疗效。方法2010年1月～2011年12月,对15例前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折患者于关节镜下进行骨折复位,并应用可吸收螺钉进行骨折固定。前抽屉试验及Lachman试验均呈阳性,Lysholm评分为（42.1±5.7）分,国际膝关节文献委员会（IKDC）2000主观膝关节评分为（43.2±5.3）分。结果患者均获随访,随访时间3～12个月,平均9.1个月。术后即刻X线片检查示前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折复位良好,术后3个月X线片复查示前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折均愈合。末次随访时,患肢膝关节活动范围达0～120°;除2例Lachman试验阴性、前抽屉试验弱阳性外,其余10例两项检查均呈阴性;Lysholm评分为（89.7±3.1）分,与术前比较差异有显著性（t=21.800,P=0.000）;IKDC2000主观膝关节评分为（93.5±6.4）分,与术前比较差异有显著性（t=21.700,P=0.000）。结论关节镜下可吸收螺钉治疗前交叉韧带胫骨止点撕脱性骨折,能实现有效复位、牢固固定以及骨折临床愈合,具有简单易行、固定准确牢固及无需二次手术等优点。

人体桡神经连续组织切片计算机辅助三维重建研究

目的:探索一种人体桡神经计算机三维重建的实用方法。方法:采用发丝作为定位材料,将桡神经进行连续组织切片后乙酰胆碱脂酶(acetylchohnesterase,AChE)组织化学染色,高分辨率扫描仪获取二维数码信息后进行三维重建。结果:真实地再现人体桡神经的三维立体结构及桡神经内各神经束的三维立体行径,重建结构均能单独或搭配显示,还能任意角度显示。结论:人体桡神经计算机辅助三维重建方法的图像显示效果较好,是一种较为实用的方法。

VSD闭式冲洗引流技术在治疗脊柱后路内固定术后感染中的应用

目的评价VSD闭式冲洗引流技术应用于脊柱后路内固定术后感染的治疗效果。方法回顾性分析南昌大学第二附属医院2010年1月至2014年6月脊柱后路内固定手术后发生感染的15例患者的治疗过程,全部病例均早期进行清创,术中安装VSD装置进行闭式冲洗引流,根据细菌培养结果给予敏感抗生素,7d后拆除VSD装置,根据伤口情况及引流液细菌培养情况,决定是否直接闭合伤口或更换VSD继续冲洗引流,直至伤口可以闭合为止。结果 15例患者冲洗7-21d(平均13.5d)后二期关闭伤口,全部获得愈合,C反应蛋白、血沉降至正常水平,随访5-48个月,无感染复发病例。结论 VSD闭式冲洗引流技术是治疗脊柱后路内固定术后感染的有效治疗方式。

中国骨质疏松性骨折围手术期处理专家共识(2018)

骨质疏松性骨折是继发于骨质疏松症、低能量暴力导致的骨折。伴随我国进入老年社会,骨质疏松性骨折发病率逐年快速升高,逐渐成为骨质疏松症患者的首发症状和就诊原因。骨质疏松性骨折多为高龄老年患者,合并内科基础疾病较多,病情复杂,手术风险显著增加;患者骨量下降,多为粉碎性骨折,内固定失败率相对较高;骨质疏松性骨折愈合缓慢,甚至不愈合,容易再发骨折。围手术期处理是骨质疏松性骨折手术治疗的最重要环节,决定着治疗的成败,其处理原则、处理方法与一般常见骨折有共同之处,但也有特殊要点,推动骨质疏松性骨折标准化、规范化治疗是当下亟待解决的问题。因此,中华医学会骨科学分会青年骨质疏松学组召集了国内骨质疏松性骨折相关研究领域的专家,结合国内外最新的循证医学证据和临床经验,撰写了本共识,旨在为骨质疏松性骨折围手术期的处理提供一个适合国情且规范标准、容易操作的治疗方案,有效提升我国骨质疏松性骨折的治疗效果,改善患者预后。1 概 述骨质疏松性骨折是骨质疏松症最严重的后果之一。患者发生骨质疏松时骨密度和骨质量下降、骨强度减低,受到轻微暴力即可发生骨折,故属于脆性骨折。常见的骨折部位包括脊柱、髋部、桡骨远端和肱骨近端,其中最常见的是椎体骨折,最严重的是髋部骨折。据统计,全世界每3 s就发生1次骨质疏松性骨折,50岁以后约1/3的女性和1/5的男性将会罹患1次骨质疏松性骨折[1]。国内基于影像学的流行病学调查显示:50岁以前女性椎体骨折患病率约为15%,50岁以后椎体骨折的患病率随年龄而渐增,80岁以上女性椎体骨折患病率可高达36.6%[2]。2015年我国主要骨质疏松性骨折(腕部、椎体和髋部)约为269万例次,预计2035年约为483万例次,到2050年约达599万例次[3]。女性一生发生骨质疏松性骨折的危险性(40%)高于乳腺癌、子宫内膜癌和卵巢癌的总和,男性一生发生骨质疏松性骨折的危险性(13%)高于前列腺癌[4-5]。

人骨肉瘤组织中Livin和Caspase-7蛋白的表达及其临床意义

目的:分析Livin和Caspase-7蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨两者在骨肉瘤的临床诊断、治疗及预后中的意义。方法:收集2001年2月至2012年12月我院骨科收治的51例骨肉瘤患者的石蜡切片标本及12例正常骨痂组织标本,采用免疫组化法检测标本中Livin和Caspase-7蛋白的表达,并分析两者表达的相关性及与骨肉瘤各临床病理指标和预后之间的关系。结果:与正常骨痂组织相比,骨肉瘤患者组织中Livin蛋白的阳性表达率明显增高[66.7%(34/51)vs 8.3%(1/12),P<0.01];而Caspase-7蛋白的阳性表达率则明显降低[49.0%(25/51)vs 100.0%(12/12),P<0.01]。Livin和Caspase-7蛋白的阳性表达与骨肉瘤的大小、Enncking分期及患者5年生存率显著相关(P<0.01),与患者年龄、性别、病理分型及肿瘤的部位无相关性(P>0.05);Livin蛋白的阳性表达和Caspase-7蛋白的阳性表达之间呈负相关性(r=-0.305,P=0.029)。结论:Livin蛋白在骨肉瘤组织中高表达,而Caspase-7蛋白在骨肉瘤组织中低表达,两者表达呈负相关性;Livin可能通过某种机制调控Caspase-7的表达,从而抑制了骨肉瘤细胞凋亡并促使骨肉瘤的发生与发展。

间充质干细胞来源外泌体在恶性肿瘤中的作用及应用前景

间充质干细胞(MSCs)是一类具有高度自我更新能力及多向分化潜能的干细胞,能分化为多种不同细胞。研究表明间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EXO)是肿瘤微环境的主要组成部分,并且对恶性肿瘤的发生发展发挥着重要作用。外泌体是由真核细胞分泌的一类细胞外囊泡,能够在细胞间传递生物活性脂质、核酸以及蛋白质等生物活性分子,广泛参与细胞之间的信息交流。本文就间充质干细胞来源的外泌体在恶性肿瘤中发挥的作用及其应用前景作一综述。

腹腔镜与开腹手术治疗急性阑尾炎比较

目的:比较腹腔镜阑尾切除术(LA)与开腹阑尾切除术(OA)治疗急性阑尾炎的优缺点。方法:对2004年1月—2005年12月的91例LA与同期的115例OA进行回顾分析。结果:LA的术后住院天数、胃肠功能恢复时间、术后疼痛程度、切口感染与OA均显著差异(P<0.05)。LA与OA的手术时间、综合住院费用均无显著差异(P>0.05)。结论:LA与OA都是安全可靠的术式,但LA手术较OA手术具有创伤小、恢复快、并发症少等优点。

老年骨质疏松性肩关节周围骨折诊疗中国专家共识(2023版)

肩关节周围骨折是老年人最常见的骨折类型之一,术后常出现内固定失败、肱骨头缺血坏死、上肢功能障碍等不良事件,严重危害老年人群运动健康。相比骨量正常的肩关节周围骨折类型,骨质疏松性骨折类型复杂、愈合慢、康复效果差,临床处理更为棘手,且目前国内尚无该类骨折诊疗的指南或共识。为此,中华医学会骨科学分会青年骨质疏松学组、中国老年学和老年医学学会老年病学分会骨科专家委员会、中国医师协会骨科医师分会青年委员会骨质疏松学组、上海中西医结合学会骨质疏松专业委员会组织相关专家制订《老年骨质疏松性肩关节周围骨折诊疗中国专家共识(2023版)》,从骨质疏松性肩关节周围骨折的诊断、治疗策略等方面提出9条推荐意见,旨在推广规范化、系统化、个性化诊疗理念,改善老龄化背景下骨质疏松性肩关节周围骨折患者功能预后与生活质量。

胭窝囊肿压迫致腓总神经损伤一例

患者 女性，52岁，因左腘窝肿块4个月伴小腿麻木1个月入院，患者4个月前发现左侧腘窝内侧有一直径约5mm肿块，主诉无疼痛及其他特殊不适。于当地医院就诊时行彩超检查示左腘窝囊肿，未行特殊处理。后肿块逐渐增大，入院前1个月以来感觉左小腿外侧及左足背皮肤麻木。入院后查体：左侧腘窝内侧扪及一约3cm×2cm肿块，质中、张力较大、活动可、边界清、无压痛。左侧小腿外侧、左足背皮肤感觉减退。左腓骨颈部Tinal征（＋）。我院肌电图检查示左侧腓总神经部分损伤。

新型负载多柔比星纳米基因载体的研制及其对骨肉瘤细胞的抑制效应

目的:研究制备葡聚糖(DEX)-多柔比星(ADM)-聚乙烯亚胺(PEI)纳米材料,同时将livinshRNA质粒和ADM转入骨肉瘤细胞,观察其对骨肉瘤的抑制效应。方法:制备了纳米基因载体并进行了表征,用紫外光谱、核磁共振和红外光谱分析测定了这些纳米颗粒的组合物,倒置荧光显微镜和流式细胞术证实了转染效率。应用MTT法检测了ADM和livin基因介导的协同作用,及其纳米颗粒对骨肉瘤细胞的抑制作用。结果:紫外光谱和核磁共振显示纳米载体出现ADM的特征峰,ADM的载药率为(17.43±0.548)%,该载体能有效地将livin shRNA质粒转入骨肉瘤细胞中。转染后骨肉瘤细胞存活率显著低于游离ADM组和纳米基因载体组(P<0.05)。纳米基因载体组对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用显著高于ADM组(P<0.05)。结论:本研究中DEX-ADM-PEI纳米能有效地将ADM和livin shRNA质粒同时转入骨肉瘤细胞中,对骨肉瘤细胞增殖的协同抑制作用显著高于ADM。

调控胎盘生长因子表达对骨肉瘤耐药逆转作用研究

目的胎盘生长因子(placenta growth factor,PlGF)是一种属于血管内皮生成因子家族的分泌性同二聚体糖蛋白,对肿瘤等病理情况下的血管生成有重要作用,其在影响骨肉瘤耐药中的作用研究较少。本研究应用RNA干扰下调PlGF基因表达在逆转骨肉瘤耐药中的作用。方法将骨肉瘤耐药MG-63细胞分为阴性对照组、空白对照组和转染组,转染组转染PlGFshRNA真核表达载体,空白对照组只添加空白转染剂,阴性转染组转染阴性对照RNA干扰试剂,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染前后PlGF基因和蛋白的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,细胞计数盒8法检测各组细胞对化疗药物的敏感性。结果PlGFshRNA可有效抑制MG-63骨肉瘤耐药细胞中PlGF基因和蛋白表达,PlGF基因下调71.3%(F=17.302,P=0.031),蛋白表达下调67.2%,F=27.112,P=0.023。转染组细胞凋亡高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义,F=22.34,P=0.037。3组细胞在加入多柔比星后增殖均具有不同程度的抑制,且呈明显的时间-效应关系,但转染组细胞的存活率均低于其他2组,差异有统计学意义,F=15.22,P=0.007。结论应用RNA干扰技术下调耐药MG-63骨肉瘤细胞PlGF基因表达后,可有效促进耐药细胞的凋亡,从而增加其对化疗药物的敏感性,PlGF基因有可能成为骨肉瘤耐药治疗的新靶点。

正中神经显微结构三维可视化研究

目的将正中神经干全长作连续冰冻组织切片，采集系列切片的神经二维信息，开发3D Nerve可视化系统，实现正中神经内部显微结构的三维可视化。方法取新鲜成人尸体正中神经标本，作好定位并标记、OCT包埋、采用连续冰冻组织切片、染色、用扫描仪获取切片染色前后的连续的正中神经断面二维信息数据库，开发并应用3D Nerve可视化系统。结果通过3D Nerve可视化系统观察发现，在不同断面正中神经神经束的数量、位置以及神经束内神经纤维的性质变化较大。在该系统中可在任意断面放大的视野下观察正中神经的显微结构，追踪各神经柬在正中神经内的立体行径；重建的正中神经能在空间位置上绕任意轴作任意角度旋转，便于从不同的角度对各神经柬的形态、空间位置及相互毗邻关系进行观察，从而动态地展示正中神经内部的复杂结构。结论正中神经3D Nerve可视化系统真实地再现正中神经干全长及其内部各神经柬和束组的三维立体结构，可为临床修复正中神经损伤提供精确的断层解剖图像。

创伤性脊柱脊髓损伤康复治疗专家共识(2020版)

创伤性脊柱脊髓损伤(TSCI)患者由于运动感觉功能障碍,导致多种并发症而危及生命.患者的生存质量受到严重影响。本共识在TSCI流行病学的基础上,总结国内外文献和调研结果.对TSCI的损伤分级、康复评定、康复策略和主要康复措施等方面进行归纳和总结,期望对TSCI的康复治疗提供早期合理规范的治疗方案。