壳聚糖-卵透明带DNA纳米微囊的制备及其体外表达

目的:发展壳聚糖-卵透明带口服DNA粘膜免疫避孕疫苗.方法:首先利用基因工程技术构建含卵透明带特异抗原pZP3αDNA的真核质粒表达载体pVAX1-pZP3α,然后用壳聚糖C390包被pVAX1-pZP3α重组质粒制备免疫微囊,测定免疫微囊对质粒DNA的包裹率,用原子力显微镜(AFM)观察壳聚糖-DNA微囊的形态结构,并体外转染HeLa细胞,用间接免疫荧光法(IIF)检测pZP3α的瞬时表达.结果:pZP3αDNA正确插入到载体pVAX1中并与壳聚糖C390形成纳米免疫微囊,对重组质粒pVAX1-pZP3α的包裹率达90%以上.AFM成像技术显示这些微囊的直径为100nm到300nm不等,平均为224 6nm,形状为球形、椭圆形等.体外转染HeLa细胞用IIF法检测到了抗原pZP3α在细胞内的表达.结论:壳聚糖-卵透明带口服DNA纳米免疫微囊制备成功,为进一步发展更安全、方便、有效的卵透明带DNA避孕疫苗打下了基础.

猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达

目的 :构建猪卵透明带ZP3α真核表达载体 ,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法 :采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段 ,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达 ,然后采用RT -PCR和间接免疫荧光技术 (IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果 :真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功 ,用RT -PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa细胞中的转录与表达。结论 :真核表达载体pVAX1-pZP3α的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。

重组人卵透明带ZP3蛋白在毕赤酵母中的表达

利用P .pastoris表达人卵透明带ZP3蛋白。设计特定引物从全长hZP3cDNA上扩增含跨膜区序列的人卵透明带ZP3基因片段 ,并在N末端接上串联组氨酸编码序列的重组基因序列 ;扩增片段插入表达载体pPIC9K中 ;线性化后的重组质粒转入P .pastoris中 ,用高浓度G4 18筛选高拷贝菌株 ,然后甲醇诱导目的蛋白表达。用SDS PAGE和Westernblot分析表达产物。结果发现P .pastoris表达的人ZP3蛋白可以分泌到培养液中 ,并且可溶性好。纯化前后的重组人ZP3蛋白均能与兔抗猪ZP3蛋白抗体发生交叉反应 ,证实表达的目的蛋白具有反应原性。

用AFM对质粒DNA在云母表面的自组装研究

通过原子力显微镜(AFM)对在云母表面上自然挥干的不同质量浓度的质粒DNA分子进行扫描,原子力显微镜图像显示:当质量浓度为0 1μg/mL时,DNA分子呈现出线性结构,随着质量浓度加大至1μg/mL,DNA分子相互缠绕为网状结构,质量浓度为10μg/mL时,呈现出具有典型的聚合形态,当质量浓度进一步加大到100μg/mL,则呈现出明显的树状脉络结构.通过原子力显微镜对质粒DNA分子的形态表征,可以看出质粒DNA分子具有典型的自组装的特性.

唐钢FTSC工艺薄板坯连铸结晶器温度场分析

通过对唐钢FTSC工艺薄板坯连铸结晶器温度场的分析,研究了薄板坯粘结、裂纹等事故状态下结晶器各点的温度变化规律,提出了最佳结晶器温度场状态和弯月面区域最佳温度范围,对如何获得最佳结晶器温度场、减少薄板坯粘结和裂纹漏钢提出了建议。

壳聚糖-铜离子有序凝聚体的形貌

用原子力显微镜对自然风干后的壳聚糖絮凝剂富集铜离子后的样品在非接触模式下进行观察。结果表明 ,在未完全脱水时 ,由壳聚糖 铜离子形成的胶粒有较规则的排列。脱水后的样品中 ,壳聚糖 铜离子胶粒进一步聚集 ,形成较为规则的由一些小颗粒堆积而成的环形凝聚体。铜离子被络合的过程可能类似于以颗粒为组成单元的螺旋盘绕过程。而浓度较大的样品中则形成由胶粒组成的规则圆盘 ,其直径在 3 5～ 5 0 μm之间。

小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究

目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。

中国猕猴预存抗腺病毒中和抗体滴度对腺病毒体外感染单核细胞效率的影响

为了探索通过血液系统利用重组腺病毒载体的方法,以中国猕猴为动物模型,以复制缺陷型人5型腺病毒(human adenovirus serotype 5,HAd 5)为载体携带报告基因在体外直接感染外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)。首先对HAd5在体外感染PBMC的条件进行优化,证实离心力可提高HAd5的感染效率;细胞分群结果表明HAd5特异感染PBMC中的CD14+单核细胞,仅感染小部分自然杀伤细胞,但几乎不感染T淋巴细胞和B淋巴细胞。首次发现:猕猴体内预先存在的抗HAd5中和抗体滴度越高,其单核细胞在体外对HAd5的易感性越强。这种现象将拓宽基于腺病毒载体的基因治疗和疫苗的临床应用范围,尤其是对预先存在腺病毒中和抗体的人群更具意义,为探索更方便有效的基因治疗和疫苗研究带来新的思考。

艾滋病疫苗为什么至今没出现

2018年12月1日是第31个世界艾滋病日。艾滋病防控的局面严峻,不过令人疑惑的是,艾滋病是由病毒引起的典型传染病,而疫苗是人类对抗病毒最伟大的发明,人们通过疫苗,消灭了天花,有效控制了小儿麻痹症、乙肝等多种传染性疾病的流行。而传播广泛的艾滋病为什么至今仍未开发出有效疫苗呢?

H12IA-57.320型氢氮压缩机六段缸扩缸技术改造

安徽金禾实业股份有限公司因新上低压醇生产装置,为使压缩机降低五段缸压力,提高打气量,经研究决定对现有的H12IA-57/320型压缩机的六段缸进行扩充。在通过技术改造后,同比增加了合成氨的产量,单机电耗得到有效下降。生产装置压缩机的五段出口压力从原来的6.4MPa降低到了现有的5.8MPa,满足低压醇装置的压力要求,使生产装置的安全性能得到极大提高。

分析往复式氮氢气压缩机的故障及解决措施

在我国工业中占据极为重要地位的往复式压缩机有着广泛的应用范围,石油天然气、运输及化工等多个领域中均能看到往复式压缩机的身影,由于使用了多极压缩技术导致压缩机结构的复杂度伴随不断增加的技术而大大提升,配件和附件的数量不断增加也提升了压缩机出现故障的频率。因此需要加强对往复式压缩机故障的判断,通过分析故障原因确定有效的解决方法。

一种新型防污气阀在合成氨生产中的应用

钢阀片坚硬,塑性差,遭受坚硬颗粒冲击时有断裂危险。塑料(FWⅡ型PEEK阀片)阀片密度小,弹性模量小,由此产生的疲劳损伤随之降低,阀的运行寿命大大增加,密封性好,塑性好,遭受坚硬颗粒冲击时可以嵌入阀片内,从而保证气阀的连续运行,对压缩机长周期稳定运行创造良好的条件。

三废流化混燃炉运行总结

介绍了75 t/h三废流化混燃炉装置的运行背景、工艺流程以及运行故障,重点阐述了三废流化混燃炉的改进措施,保证了锅炉的稳定运行。

低压甲醇工艺运行总结

介绍了低压甲醇工艺流程,并将投运后的工艺效果进行对比。结果表明:低压甲醇工艺使压缩机五段、六段、七段压力均有不同程度的下降,促进了生产装置的安全稳定运行。低压甲醇装置运行稳定,出口气体CO+CO2转化率高,节约电耗,副产蒸汽,无污染物质排放。

烃化精制工艺运行总结

介绍了烃化工艺流程,并对精炼工艺和烃化工艺投运效果进行对比。结果表明,烃化工艺原料气精制度高、操作简单、运行稳定、物耗少、工作环境清洁,既降低了合成氨能耗和成本,又减少了污染物排放。

固定床增氧间歇气化工艺应用总结

介绍了固定床增氧间歇气化工艺的应用情况,采用变压吸附制氧装置生产富氧,结合专用的增氧DCS控制技术,提高造气炉入炉空气中氧的含量,通过调整吹风、制气时间及相应的工艺指标,平均吨氨煤耗下降70 kg,每年可以减少CO_2排放20%。达到了提高吹风效率、蒸汽分解率及能源利用率,降低原料煤的消耗、合成氨的能耗和成本,减少污染物的排放的目的。

ACE2在不同物种间的同源性分析及其对2019-nCoV宿主范围的启示

目的分析不同物种间ACE2的同源性,并探讨2019-nCoV利用其作为受体在人与动物间跨物种传播的可能性。方法从NCBI网站中下载不同物种ACE2的氨基酸序列,使用MEGA 7软件和在线程序BLAST和iTOL进行分析。结果ACE2全长氨基酸序列(1-805)在哺乳动物中(尤其是非人灵长类动物)同源性较高。进一步分析与2019-nCoV的S蛋白结合的ACE2肽酶结构域(ACE2-PD)序列(19-615),发现反刍动物(牛、羊)和猫与人类ACE2-PD的识别率进一步提高,而蝙蝠略有下降。ACE2蛋白上与S蛋白直接相互作用的20个关键氨基酸(接口氨基酸)序列比对发现,猕猴与人类的接口氨基酸序列完全相同,反刍动物(牛、羊)和猫的接口氨基酸与人类相似。结论灵长类动物可作为良好的动物感染模型,反刍动物(牛、羊)和猫也有可能是2019-nCoV的潜在感染动物。因此,应积极推进动物间2019-nCoV的病原学和血清学检测。

关于对电力调度运行管理系统的一点看法

该调度运行管理的应用，包括调度日常运行管理、调度命令票的下达、检修申请票生成、操作票生成等，实现调度无纸化办公，从运行到管理真正实现调度自动化，并逐步使电力生产实现管理信息化、生产现代化、运行科学化。

HIV新近感染的检测技术现状及其在艾滋病防控中的作用

目前,艾滋病监测主要通过哨点监测和艾滋病病例报告系统来计算人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染率、艾滋病新报告病例数和HIV相关死亡率,以及开展全国性研究调查HIV耐药毒株特征,但这些措施不能估算HIV新近感染率。HIV感染的病程隐蔽且具有长期潜伏感染的特性,急性期感染者难以被发现,常规监测手段难以确定感染者的感染时间,从而使得新近感染率的计算存在潜在偏倚,影响对疾病危险因素的深入探究以及评价干预措施的效果。近年来,使用HIV-1新近感染检测(test for recent infection,TRI)基于横断面样本估算HIV新近感染率已成为监测HIV传播、评估干预手段的重要方法之一,其可以将HIV-1感染者分为新近感染与长期感染,提高HIV新近感染率测量的准确性。TRI分为血清学检测与分子检测,其中血清学检测因其成本低、估算HIV新近感染率准确、发展历史较长而被广泛使用,近年来在准确度与简便性方面取得较大进展。本文通过对TRI的原理、准确度以及应用的介绍,系统综述TRI技术的最新研究进展及优缺点。

国境口岸应对重大传染病疫情的措施与思考

重大传染病疫情对世界经济、环境、人员及货物流动造成严重影响。为降低疫情传播风险,我国建立了国境口岸重大传染病联防联控机制,采取了关闭部分国境口岸、海关对所有通过国境口岸入境的人员采集生物样品进行检测、地方政府对所有入境人员进行集中隔离的疫情防控措施。随着全球重大传染病疫情形势的变化,我国调整防控策略,国境口岸逐步恢复通关通航。通过回顾重大传染病疫情期间国境口岸传染病执法、联防联控机制运行、口岸专业人员配备、技术储备等情况,发现其中的不足,提出完善法律、优化联防联控信息共享、加强卫生检疫人员培训、强化实验室技术储备、建立口岸重大传染病预警和风险评估系统、利用5G技术提升国境口岸防控传染病能力等措施,以便更好地应对我国国境口岸传染病防控工作面临的复杂局面。