马铃薯晚疫病研究

马铃薯晚疫病是由疫霉(Phytophthora spp.)引起的严重的真菌病.马铃薯晚疫菌因导致马铃薯茎叶死亡和块茎腐烂而成为马铃薯疫灾中危害最大的病原菌,目前关于马铃薯晚疫病的研究方兴未艾.通过对马铃薯晚疫病的描述和菌的分离,分析了马铃薯的抗病机制以及基因工程方面研究进展,并提出建议,以便在育种方面参考.

长双歧杆菌NCC2705葡萄糖与果糖代谢的比较蛋白质组学

为揭示长双歧杆菌NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)果糖代谢途径,建立其果糖发酵模型。以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,进行了果糖和葡萄糖生长的菌体比较蛋白质组学研究,利用MALDI-TOF和ESI-MS/MS鉴定差异蛋白,进一步通过半定量RT-PCR验证二者显著差异表达蛋白。果糖生长的菌体蛋白中鉴定到了所有葡萄糖降解途径中的酶和蛋白质,另外鉴定到3倍以上差异蛋白点9个,其对应的5个蛋白在果糖发酵中上调。半定量RT-PCR验证显著差异蛋白,显示在果糖发酵中具有高水平表达是ABC转运系统的果糖特异性-结合蛋白BL0033和ATP结合蛋白BL0034。果糖的发酵时间和浓度梯度试验显示诱导时间越长、浓度越高,BL0033的表达量越高。第一,比较蛋白谱证明果糖和葡萄糖以相同途径降解。第二,BL0033的表达是受果糖诱导的,果糖的吸收可能是通过一个特殊的转运系统,即ABC转运系统将果糖从胞外转运到胞内,其中BL0033和BL0034共同作为系统元件扮演了重要角色。

蓝细菌与功能食品开发

蓝细菌特别是螺旋藻被认为是最理想的功能食品,这与其分子组成、生长特征有密切关系。具体介绍了蓝细菌的生物学特征,功能食品的发展与分类以及蓝细菌功能食品的研究与开发现状。重点论述了对以蓝细菌在食品中的成分为依据分类的原料粗品和组分加工的功能因子以及特殊环境使用的空间食品。

海洋骨料混凝土材料与结构性能研究进展

针对陆地砂石资源日益匮乏的现状,远离陆地的深远海岛礁建设需要利用海水、海砂和珊瑚等海洋资源制备混凝土,以实现就地取材从而避免远途运输并降低工程造价。本文主要介绍了“海洋骨料混凝土”的概念以及国内外关于海洋骨料混凝土所做的研究工作,包括材料的工作、力学、抗氯离子渗透、抗冻融、抗收缩和断裂性能。结果表明,海洋骨料混凝土的力学以及耐久性能与普通混凝土相当。随后,介绍了海洋骨料混凝土与纤维增强复合材料的黏结性能以及结构构件的抗压和抗弯性能方面的研究进展,纤维增强复合材料可以制作成筋材、管材、片材以及编织网用于海洋骨料混凝土结构中,使得其抗压与抗弯性能明显提升,但海洋环境下混凝土的碱性对纤维增强复合材料的耐久性影响显著。

长双歧杆菌NCC2705葡萄糖与乳糖代谢的比较蛋白质组学

【目的】以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,研究长双歧杆菌发酵乳糖和葡萄糖的比较蛋白质组学。【方法】采用ImageMaster 2D Elite Platnum Version5.0比较分析3倍以上蛋白差异点;利用MALDI-TOF进行差异蛋白鉴定,每个蛋白质点的肽指纹图谱在长双歧杆菌NCC2705菌株的蛋白质数据库用Mascot进行检索;采用Pro-Q磷酸化试剂进行磷酸化蛋白的染色。【结果】鉴定到31个蛋白表达发生显著变化,在乳糖发酵中14个蛋白上调17个蛋白下调。这些蛋白为亲水性酸性蛋白,它们基因的CAI值均在0.5以上,主要包括糖代谢相关蛋白、应激蛋白、转录和翻译相关蛋白,还有一些未知功能的蛋白。此外,有两个蛋白:转醛缩酶(BL0715,transaldolase,tal)L3蛋白点和丙酮酸激酶(BL0988,pyruvate kinase,pyk)G9蛋白点发生了磷酸化作用。【结论】长双歧杆菌NCC2705在乳糖中生长快于葡萄糖,它们的降解途径是相同的;转醛缩酶和丙酮酸激酶发生了翻译后修饰作用,推测转醛缩酶在43T和47S发生了磷酸化,而丙酮酸激酶在65S发生了磷酸化。

小麦固氮作用研究进展

小麦是主要的粮食作物之一,研究小麦及其固氮菌的作用对提高小麦产量具有重要意义。本文对近年来小麦的自生固氮(菌)、联合固氮(菌)和共生固氮(菌)的研究进行了全面分析与评价,系统论述了固氮基因遗传表达机理、固氮酶调节作用、固氮酶体系及其电子传递顺序研究的新进展。小麦固氮需要高能耗,但接种固氮菌增产作用明显,遗传改进研究已取得显著进展,进一步深入研究可望降低化肥施用量,提高小麦产量与蛋白质品质,实现生态良性循环和绿色生产。

长双歧杆菌NCC2705高效转化系统的建立及GFP表达

目的:建立长双歧杆菌NCC2705高效稳定的电转化系统,并以其为宿主表达绿色荧光蛋白(GFP),构建一个稳定的带报告基因的表达载体。方法:从双歧杆菌克隆载体pDG7中切取其在双歧杆菌中复制所必需的pMB1复制子插入质粒pUC19的多克隆位点区,并将gfp基因在双歧杆菌中进行表达;设计双歧杆菌电击转化体系,研究在不同电击电压条件下的电转效率。结果:首先构建了大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭质粒pUB1和带有gfp基因的表达质粒pUB2,用电击法将之转化至双歧杆菌,当细菌生长到D600nm约为0.5时制备感受态细胞,在电容25μF、电阻200Ω、电压12.5 kV/cm的电击条件下进行完整质粒转化,可得到较高的转化率。结论:构建了以长双歧杆菌NCC2705为宿主的高效稳定的表达系统,为进一步研究益生菌的分子生物学和功能特性提供了基础。

群体感应与病原菌致病性研究进展

群体感应是细菌根据细胞密度变化进行基因表达调控的一种生理行为。当细菌密度达到临界阈值时能释放一些特定的自诱导信号分子,从而调节本种群或同环境中其他种群的群体行为。细菌群体感应参与包括人类、动植物、病原菌在内的多种生物的生物学功能调节,如生物膜的形成、毒力因子的产生、病原菌的耐药性等。深入研究病原菌群体感应系统的调控机制,将提高对病原菌发病机制的认识,有利于以群体感应作为防治疾病策略的研究。系统阐述了群体感应系统的组成类型、群体感应与病原菌致病性的关系,及其在抑制病原菌致病方面的应用。

蛋白质组学研究中的一种新方法——配体垂钓

基于表面等离子共振技术的配体垂钓技术能在蛋白质组水平上研究蛋白质的相互作用与功能,提供控制细胞功能的新靶标．其通过将受体固定在芯片表面,当被检测样品流过芯片表面时,配体与受体相结合, 实现俘获未知的相互作用的伙伴蛋白或复合体,并结合质谱技术鉴定出未知蛋白及其序列．

弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白的融合表达和纯化

目的:原核表达重组弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白,为其功能研究奠定基础。方法:用PCR方法从弗氏2a志贺氏菌2457T株染色体中扩增YciD蛋白编码序列,经过纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中,构建重组载体pET32a-yciD,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株获得工程菌株,对其表达和纯化条件进行优化;利用WesternBlot检测融合蛋白的表达。结果:构建了YciD蛋白的融合表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的YciD蛋白;WesternBlot表明,此蛋白可与His标签抗体反应,表明获得了目的蛋白。结论:在原核表达系统中表达、纯化弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白,为进一步对其进行功能研究奠定了基础。

IPGphor^(TM)等电聚焦加样方法的改进与电泳结果的预测

固相pH梯度干胶条等电聚焦电泳技术因其分辨率高而成为当今双向电泳分离蛋白质的首选技术,但其实验步骤多难度大,要求试剂配制精确,各项操作无误。通过改变蛋白质加样方法,测定固相pH梯度干胶条IEF电泳过程中的前期水化干胶条时初始电流与终电压的内在规律,发现在不同的样品和不同的设定电压条件下初始电流的变化与IEF电泳终电压结果存在着高度的相关性,水化干胶条时的初始电流与终电压亦存在着高度的相关性。将IEF电泳的水化初始电流值(1μA)作为蛋白质等电聚焦判断标准,指导实验。其方法实用简便,可提高工作效率。

一个GAP启动子的分析及点突变体构建

甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(GAP)作为常见的持家基因在微生物中普遍表达,因而其启动子(PGAP)被认为是一个强的组成型启动子;首先,预测并克隆了双叉双歧杆菌的GAP启动子,并利用葡萄糖醛酸苷酶基因为报告基因,分析了PGAP在大肠杆菌和双歧杆菌中驱动表达的强度;不同碳源的发酵实验表明:PGAP在葡萄糖培养基中强度最高,而3种底物类似物对PGAP强度的影响各不相同;对PGAP预测的-10区进行了系列点突变,具有更接近sigma 70启动子共有序列的突变体p MGAP3表现出更高的驱动强度;最后,通过对代表性双歧杆菌PGAP序列的比对,表明在一些核心区域,如可能的TATA盒、转录起始位点、核糖体结合位点高度保守。

高温后碱激发海砂混凝土无尺寸效应断裂参数的预测

海洋环境中服役的结构在受到高温侵蚀作用后产生的损伤是不可估量的.碱激发海砂混凝土抵抗裂缝展开的能力需要被评估后才可以将其应用于海洋环境中.然而混凝土内部通常是不均匀的以及不连续的,并且这种情况在高温作用后会更加明显.为了探究这个问题,本文研究了两种不同矿渣粉(GGBFS)/粉煤灰(FA)质量比海水、海砂拌制的碱激发海砂混凝土在加热制度为10℃/min、恒温时间为180 min的情况下加热到200℃、400℃、600℃以及800℃的目标温度后的残余力学性能、微观表现以及基于边界效应模型(BEM)通过标准三点弯梁试验对无尺寸效应断裂参数抗拉强度f_(t)和断裂韧度K_(IC)的预测.研究发现:随着高温温度升高,f_(t)和K_(IC)逐渐降低并且降低速度越来越大.在400℃以下,更高GGBFS/FA质量比的碱激发海砂混凝土预测得到的断裂参数值比低GGBFS/FA质量比的混凝土高;超过400℃后,前者强度损失更大并且其残余强度明显低于后者.

不同含气量对混凝土收缩性能的试验研究

通过试验研究了不同含气量对路面常用C35混凝土流动性、抗压强度、早期收缩、后期收缩的影响并通过图像处理的手段分析孔隙率和分级孔隙率对90 d收缩的影响.结果表明:混凝土的流动性随着含气量的升高先增大后减小,含气量为6.5%时坍落度达到最大值165 mm.抗压强度随含气量的升高而降低.混凝土的含气量越高对早期收缩变形的抑制越明显,当含气量为8.0%时72 h收缩率最小;7 d以前混凝土的收缩率随着混凝土含气量的升高而减小;14~90 d混凝土收缩率随着含气量的升高而增大.含气量为4.6%时混凝土的流动性、抗压强度和收缩性能得到较好的平衡.图像法分析可知孔隙率越大90 d混凝土收缩率越大,其中孔径为1000~2000μm的气孔对90 d收缩贡献最大而10~100μm的气孔对90 d收缩贡献最小.该方法简便快捷为今后工程应用提供了很好的理论依据.

粉煤灰对UHPC性能及微观结构的影响

研究了粉煤灰取代量对超高性能混凝土(UHPC)的流动度、抗压强度、抗折强度、微观结构以及钢纤维与基体黏结界面的影响。结果表明:粉煤灰取代量与混凝土流动度呈正相关;UHPC的抗压强度随粉煤灰取代量的增加呈先降低后升高的趋势;UHPC的抗折强度随粉煤灰取代量的增加呈先升高后降低的趋势;通过SEM结果发现,随粉煤灰取代量的增加,混凝土微观结构的密实度呈先减小后增大的趋势;UHPC基体与钢纤维的黏结性能呈先增大后减小的趋势。

浅谈小学数学教学中学具的运用

教学具的运用是数学教学的重要内容.从学生的角度来说,小学生年龄小,活泼好动,动手能力强,运用教学具可以发挥学生好动的天性,深受学生的喜爱,同时又可以让学生从直观的动手中来获取直接信息,这样更加利于学生对抽象知识的理解.而从学科的角度来说,数学学科本身具有很强的操作性与抽象性,教学具的运用,可以寓抽象深奥的知识点于直观的操作之中,更容易从中获取感性认知,从而为上升为理性认知打下基础.从这两个方面来看在数学教学中运用学具具有非常重要的意义.新课改非常重视教学具的运用,明确指出要充分运用学具来激发学生兴趣,强化学生理解,提出在做中学的教学理念.

常压热水锅炉在安装和运行中需要注意的几个问题

通过介绍常压热水锅炉安装、运行的特点。解决采暖运行中的实际问题。

从锅炉热平衡方程浅谈常压锅炉热效率

通过对锅炉热平衡方程的分析，在锅炉设计中着重解决热效率问题。

大曲产酯化酶芽孢菌的分离鉴定及其发酵条件优化研究

以宋河大曲为分离源,采用加热和稀释涂布法富集、分离芽孢菌,利用透明圈法和摇瓶发酵法筛选产酯化酶菌株,结合形态学、生理生化特征和16S r DNA序列分析,对高产酯化酶菌株进行初步鉴定,并对其发酵条件进行优化,共分离初筛出81株产酯化酶芽孢菌,复筛出一株高产菌株SPEO-28,初步鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).该菌株最优产酯化酶发酵条件为:以淀粉为碳源,NH4NO3为氮源,初始p H值为6. 0,在47℃条件下发酵3 d.在此条件下,菌株产酯化酶活力达到22. 83 U/mL,比优化前提高了82. 6%.

原位定量检测磷酸化蛋白质的Duolink PQ技术

很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个方面对其进行了介绍,并进而对现有磷酸化蛋白质检测的主要技术进行了简要评价。