树脂砂盖芯的设计与应用

本文阐述了树脂砂铸造用芯砂的配制以及盖芯芯头的设计、工艺参数的选择等。通过盖芯的应用实例 ,表明了盖芯的应用对消除铸造缺陷、提高铸件质量。

鱼用疫苗研究进展

我国水产养殖业发展迅速,而各种病原微生物如病毒,细菌,寄生虫等导致的病害严重影响水产养殖产量,同时给食品安全构成极大威胁。鱼用疫苗作为防止病害的重要途径,有许多优点,近年来极受重视。现已经投入使用的鱼用疫苗种类包括传统的减毒疫苗和灭活疫苗以及新型的DNA疫苗(又称核酸疫苗或基因疫苗)、亚单位疫苗、活载体疫苗等。此外,为了研制更为高效的鱼用疫苗,人们尝试使用新型的更为有效的疫苗载体、添加合适的佐剂、改进免疫方式以及采用更为准确的指标和评价技术综合评价疫苗效果等。本文就鱼用疫苗类型、疫苗载体及疫苗效果评价等方面作一综述。

列线图在肿瘤风险预测和预后评估中的应用

随着肿瘤精准化治疗时代的到来,越来越多的列线图用于指导临床决策。目前列线图不仅可用于肿瘤发生风险概率的预测,而且还可用于肿瘤的预后评估。列线图中变量的选择、医生诊断水平的差异都会影响其预测的准确性,因此正确认识列线图的局限性,并合理有效的利用其辅助临床决策对疾病的诊断和治疗具有重要的意义。本文对列线图在肿瘤研究领域的进展,分别从列线图的构建及其在肿瘤发生、预后评估及其局限性等方面进行阐述。

淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染的胶体金免疫检测技术建立

目的建立一种淡水鱼华支睾吸虫感染的胶体金免疫检测技术。方法用蛋白A(Protein A)纯化草鱼血清中IgM,将其免疫新西兰兔后,纯化获取兔抗草鱼IgM的IgG二抗;胶体金标记兔抗草鱼IgM的IgG作为金标诊断抗体,按间接法检测原理组装胶体金检测试纸条,用华支睾吸虫虫体总蛋白为抗原,检测阳性及阴性草鱼血清样品中特异抗体,观察检测结果,初步评价该技术的敏感性、特异性等。结果胶体金溶液的最大吸收值(Amax)为0.845,最大吸收峰(λmax)位于525 nm波长处。进一步用扫描电镜(TEM)分析制备的胶体金,结果显示其颗粒大小均一,形状规则,分布较均匀。建立的胶体金试纸条能在10 min左右完成对草鱼血清中特异抗体的检测,血清稀释到1∶500后依然能被检测出;9份阳性血清有7份被检测出特异抗体,5份阴性血清均无条带显示,试纸条特异性较好。结论建立的免疫检测试技术可望用于鱼体内华支睾吸虫感染的快速检测,值得进一步优化及转化应用,为华支睾吸虫病综合防治提供技术支撑。

血清AFP和AFP-L3及PIVKA-Ⅱ在肝细胞癌诊断中的应用价值

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)和异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)单独及联合检测在肝细胞癌(HCC)诊断中的应用价值。方法分析2020年6月-2020年10月在中山大学附属第三医院首次确诊的120例肝细胞癌患者、77例乙肝肝硬化患者和105例慢性乙型肝炎患者血清学指标,分析AFP不同水平人群中AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ单独及联合检测肝细胞癌的诊断效能。结果肝细胞癌组血清AFP、AFP-L3和PIVKA-Ⅱ水平高于乙肝肝硬化组和慢性乙型肝炎组,差异有统计学意义(P<0.001)。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示:在总人群中,AFP、AFP-L3和PIVKA-Ⅱ三者联合与PIVKA-Ⅱ单独检测在肝细胞癌的诊断效能高于AFP和AFP-L3单独检测诊断效能(AUC=0.867、0.869、0.690、0.701);在AFP阴性人群(AFP≤20 ng/mL)中,AFP、AFP-L3和PIVKA-Ⅱ三者联合在肝细胞癌的诊断效能低于PIVKA-Ⅱ单独检测诊断效能,但高于AFP和AFP-L3单独检测诊断效能(AUC=0.759、0.841、0.502、0.491)。结论血清PIVKA-Ⅱ指标对AFP阴性肝癌具有重要诊断价值,可与AFP互为补充提高肝细胞癌的早期诊断率。

华支睾吸虫severin蛋白对肝癌细胞SMMC-7402增殖、迁移及侵袭作用的初步研究

目的研究华支睾吸虫Severin蛋白对肝癌细胞株SMMC-7402增殖以及侵袭迁移能力的影响。方法构建Csseverin的慢病毒表达载体,并稳定转染肝癌SMMC-7402细胞。Western blot鉴定得到稳定过表达Csseverin的肝癌细胞系(PEZ-LV203-Csseverin 7402),并通过荧光显微镜观察其细胞内绿色荧光的表达;CCK-8实验检测过表达Csseverin后肝癌细胞SMMC-7402增殖能力的改变;用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测Csseverin对SMMC-7402细胞迁移侵袭能力的影响;RT-PCR检测PEZ-LV203-Csseverin 7402和对照细胞内侵袭相关指标基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的m RNA水平。结果肝癌细胞SMMC-7402稳定过表达Csseverin后,Western blot检测出PEZ-LV203-Csseverin 7402中的Csseverin蛋白明显增多,荧光显微镜观察细胞有明显的绿色荧光表达;CCK-8实验表明Csseverin能明显促进SMMC-7402细胞的增殖能力。细胞划痕实验显示与对照细胞相比,过表达Csseverin的SMMC-7402细胞的迁移能力明显增强。Transwell小室检测显示,过表达Csseverin后的SMMC-7402中穿膜细胞数高于对照细胞组。RT-PCR检测出PEZ-LV203-Csseverin-7402中的MMP-2和MMP-9 m RNA水平明显高于对照细胞组。结论 Csseverin可促进肝癌细胞SMMC-7402的增殖,可能通过上调MMP-2和MMP-9表达从而促进肝癌细胞SMMC-7402的侵袭迁移能力。

血脂水平与华支睾吸虫致病性的初步研究

目的比较高血脂小鼠和正常血脂小鼠感染华支睾吸虫后的肝脏病理变化及炎症因子水平,以研究血脂水平对华支睾吸虫致病性的影响。方法通过向BALB/c小鼠投食高脂饲料建立高血脂小鼠模型,用相同囊蚴数感染高血脂小鼠和正常血脂小鼠,比较感染1个月后小鼠相关病理指标。通过Masson染色(Masson′s trichrome staining)判断肝胆纤维化程度,使用免疫组化和实时荧光定量PCR(qPCR)检测肝脏α-平滑肌蛋白(α-SMA)定位情况和转录水平,用流式细胞术检测小鼠脾细胞在刀豆素(ConA)刺激48 h培养上清中细胞因子表达水平。结果与正常血脂感染组小鼠相比,高血脂感染组小鼠出现较显著的肝胆管扩张、肝实质及汇管区出现大量的胶原纤维增生、小胆管增生等病变。高血脂感染组α-SMA转录水平升高,并在肝脏组织汇管区及增生的纤维间隔内表达。高脂感染组脾细胞培养上清中白介素6(IL-6)和IL-10表达水平比正常血脂小鼠高(P<0.05),高脂感染组IFN-γ水平比高脂未感染组低(P<0.05)。结论高血脂可能使华支睾吸虫感染所致的肝脏胶原纤维增生、胆管扩张更明显,血脂水平高低还可影响华支睾吸虫感染后宿主的免疫应答。

华支睾吸虫合并HBV感染对肝星状细胞和巨噬细胞作用的体外研究

目的华支睾吸虫合并HBV感染对肝星状细胞和巨噬细胞的作用。方法以华支睾吸虫分泌排泄蛋白(CsESP)(10μg/mL)合并HepG2.2.15细胞(5×10~5个)共孵育人肝星状细胞(LX-2),同时设10μg/mL CsESP、5×10~5个HepG2.2.15单独处理组和PBS组。荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组肝纤维化相关指标α-平滑肌蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ的转录水平;利用CsESP(10μg/mL)合并乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)(5μg/mL)共同刺激巨噬细胞RAW264.7细胞,同时设10μg/mL CsESP、5μg/mL HBeAg单独处理组和PBS组,qRT-PCR法检测各组一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、NLRP3炎症小体、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达情况,同时使用流式细胞术检测其凋亡水平变化。结果 qRT-PCR法检测结果显示,CsESP合并HepG2.2.15处理组中LX-2细胞α-SMA和Collagen-Ⅰ的m RNA水平与CsESP或HepG2.2.15单独处理组相比显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),而Collagen-Ⅲ表达变化不明显。CsESP与HBeAg共处理诱导RAW264.7细胞中NLRP3、IL-1β、IL-6、TGF-β、TNF-α和iNOS的mRNA水平与CsESP或HBeAg单独刺激组相比显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。CsESP与HBeAg共处理组凋亡细胞比率为16.35%,明显高于CsESP、HBeAg单独处理组的6.03%和12.52%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论华支睾吸虫合并HBV感染体外可促进肝星状细胞的激活,并可促进巨噬细胞炎症因子的释放及细胞凋亡,可能促进肝脏炎症、肝纤维化的进展。

构建和验证基于铁死亡相关基因的骨肉瘤预后评估模型

目的 基于公共数据库数据,采用生物信息学方法构建基于铁死亡相关基因的骨肉瘤患者预后评估模型.方法 从公共数据库中获取骨肉瘤患者的基因表达数据和生存数据.筛选铁死亡相关关键预后因子并构建预后评估模型,验证模型预后评估效果.比较两组高、低风险组间预后因子的表达水平差异.结果 共筛选了9个关键预后因子用于模型构建,低风险组的预后均明显比高风险组好(P<0.05);模型在训练数据集中1年、3年、5年总体生存率的ROC曲线下面积AUC分别达0.928、0.964、0.947;在验证集中相应的AUC也达到0.937、0.855、0.896,说明该预后评估模型对骨肉瘤患者预后预测效果较好.此外,高风险组中CBS、HILPDA、VEGFA、MUC1的表达量显著高于低风险组(P<0.05),而SOCS1、PML、ARNTL、G6PD、MAP3K5在高风险组的表达量则显著降低(P<0.05).结论 该研究成功构建基于9个铁死亡相关基因的骨肉瘤预后评估模型能有效预测患者的预后,有望对骨肉瘤患者的个体化诊疗提供一定支撑.

华支睾吸虫severin蛋白体外对HBV复制的影响

目的探索华支睾吸虫severin(Cs severin)蛋白体外对乙肝患者外周血单核细胞(PBMC)乙肝病毒(HBV)复制水平的影响及对干扰素-α(IFN⁃α)清除HepG2.2.15细胞内HBV的影响。方法采用逆转录荧光定量PCR法(RT⁃qPCR)检测不同浓度(0、60、80、100μg/mL)Cs severin作用乙肝患者PBMC 48 h后HBV DNA拷贝数;采用RT⁃qPCR法检测不同浓度(0、60、80、100μg/mL)Cs severin作用HepG2.2.15细胞以及不同浓度(0、60、80、100μg/mL)Cs severin与IFN⁃α同时作用下的HBV DNA拷贝数;RT⁃qPCR检测HepG2.2.15细胞中STAT1 mRNA水平。结果Cs severin单独作用时不影响PBMC的HBV DNA拷贝,组间差异无统计学意义(P>0.05)。在HepG2.2.15细胞中,Cs severin的存在增强了IFN⁃α清除HBV的作用,且在60~100μg/mL范围内,随着Cs severin浓度的升高,HBV DNA拷贝数下降(P<0.05)。STAT1 mRNA水平在Cs severin存在的情况下高于对照组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。且随着Cs severin浓度的提高,STAT1 mRNA水平也随之上升。结论Cs severin不能直接影响HBV复制水平,但可能通过影响STAT1基因的表达而提高IFN⁃α清除HBV的能力。

改良全自动粪便分析仪检测华支睾吸虫虫卵效果评价

目的评价KU-F20全自动粪便分析仪进行粪便华支睾吸虫虫卵检测的临床应用价值。方法收集临床送检的疑似华支睾吸虫感染病人粪便标本137份,分别用加藤法和改良全自动粪便分析仪检测参数后的仪器法对粪便中华支睾吸虫虫卵进行检测。分析改良KU-F20全自动粪便分析仪的灵敏度、特异度、两种方法一致性。结果加藤法华支睾吸虫虫卵检出率为50.36%,改良仪器法检测率53.28%,两种方法检测结果的符合率达83.9%,结果一致性较好(Kappa=0.68)。结论改变KU-F20全自动粪便分析仪仪器的检测参数能提高粪便华支睾吸虫的检测灵敏度特异度,且操作简单,生物安全性高,值得临床进一步推广应用。