大果木姜子油调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的机制研究

目的:探讨大果木姜子油通过调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的可能机制。方法:慢病毒转染构建miR-328过表达H9c2细胞株,再运用生物机能实验系统构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、大果木姜子油组、miR-328过表达组和miR-328过表达+大果木姜子油组。根据分组条件培养结束后,qPCR检测H9c2细胞中miR-328相对表达量;ELISA检测炎性因子IL-1β、IL-6、TGF-β含量;比色法检测SOD活性和MDA浓度;DCFH荧光探针检测ROS水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测H9c2细胞L型钙通道相关蛋白表达。结果:成功构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。与正常对照组比较,模型组和miR-328过表达组细胞TGF-β、SOD活性及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、miR-328及CaV1.2蛋白表达和IL-1β、IL-6、MDA、ROS水平显著升高(P<0.01)。经大果木姜子油干预后,心律失常模型细胞形态改善,上述指标均被显著逆转(P<0.01)。结论:大果木姜子油可改善心律失常H9c2细胞,其作用机制可能与调控miR-328基因降低炎症因子水平、调节氧化应激、抑制细胞凋亡及调节L型钙通道相关蛋白表达有关。

苗药大蝎子草药材与标准汤剂指纹图谱对比及药材化学模式识别分析

目的建立苗药大蝎子草药材和标准汤剂的HPLC指纹图谱,并对15批大蝎子草药材进行化学模式识别分析。方法根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》建立黔产苗药大蝎子草15批药材及标准汤剂的指纹图谱并对两者中的对羟基肉桂酸进行含量测定;采用SPSS26.0统计学软件进行聚类分析、主成分分析;采用SIMCA 14.1统计软件进行偏最小二乘判别分析。结果15批大蝎子草药材指纹图谱确立了11个共有峰,标准汤剂确认了8个共有峰,指认出峰9为对羟基肉桂酸。聚类分析结果显示,15批大蝎子草药材可聚为两类。主成分分析结果显示,前3个主成分的累计方差贡献率为83.385%。偏最小二乘判别分析筛选出造成不同产地差异的6个色谱峰。结论大蝎子草药材和标准汤剂指纹图谱、主要成分基本一致,该方法可用于大蝎子草药材质量控制的研究。

续断盐炙前后指纹图谱及成分含量差异研究

目的:建立续断盐炙前后指纹图谱,同时测定其中6个成分的含量,并结合化学计量学全面评价续断盐炙前后的质量。方法:采用HPLC法建立续断、盐续断指纹图谱,通过对照品比对进行共有峰指认,测定其含量,并对指纹图谱数据进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)。结果:续断、盐续断指纹图谱分别标定了26、27个共有峰,相似度分别为0.988~1.000、0.987~1.000,指认了其中6个成分,分别为马钱苷酸、绿原酸、马钱苷、异绿原酸A、异绿原酸C、川续断皂苷Ⅵ。通过PCA和OPLS-DA筛选出续断盐炙前后9个差异成分;上述6个已指认的成分在各自的浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.64%~100.74%,RSD为1.04%~2.01%;含量测定结果表明续断、盐续断中上述6个成分的含量分别为1.65%~2.39%、0.70%~0.89%、0.88%~1.10%、0.93%~1.16%、0.37%~0.46%、4.30%~6.39%,2.06%~2.45%、0.66%~0.85%、0.99%~1.23%、0.77%~1.11%、0.37%~0.53%、3.80%~5.36%。结论:该研究建立了续断盐炙前后的指纹图谱及6个成分的含量测定方法,可为续断的炮制及质量控制提供参考。

苗药追风伞药材质量标准提升研究

目的 为追风伞药材质量标准的制订提供参考。方法 观察追风伞药材的性状及显微特征,并进行薄层鉴别,同时测定水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物;采用高效液相色谱(HPLC)法测定药材中金丝桃苷的含量。结果 追风伞药材须根呈棕褐色,茎丛生,茎表面褐色,质脆,易折断,中空,节膨大,呈棕褐色;茎顶叶轮生,披针形至线状披针形。该品粉末呈棕褐色,镜下可见花粉粒、纤维束、螺纹导管、表皮细胞、气孔、腺毛、花粉粒等。薄层鉴别结果清晰,专属性强。15批追风伞药材的水分为5.86%~9.90%、总灰分为7.34%~10.56%、酸不溶性灰分为0.38%~3.96%、醇溶性浸出物为11.59%~22.69%。金丝桃苷质量浓度在0.005~0.119 mg/mL(R^(2)=0.999 9)的范围内具有良好的线性关系;精密度、稳定性、重复性试验的相对标准偏差(RSD)值均小于2.0%;平均加样回收率为100.80%,RSD为1.89%;15批追风伞药材中金丝桃苷的含量为0.003%~0.052%。结论 研究对追风伞药材做了性状及显微鉴别,测定了水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物含量,建立了薄层鉴别方法,可为追风伞药材质量标准的制订提供一定参考。

续断盐炙工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:筛选续断盐炙最佳工艺,分析续断主产区四川省不同产地的续断盐炙前后抗氧化活性。方法:以川续断皂苷Ⅵ含量为评价指标,炒制温度、加盐量、炒制时间、闷润时间为考察因素,采用Box-Behnken响应面法优化续断盐炙工艺;通过DPPH自由基清除试验分析不同产地续断抗氧化活性。结果:最佳续断盐炙工艺为:炒制温度170℃、加盐量2.55%、炒制时间7.5 min、闷润时间60 min;盐炙后,盐边、沐川和盐源续断对DPPH自由基清除能力升高。结论:优化后续断盐炙工艺稳定可行,可为实际生产提供参考;不同产地续断抗氧化活性存在一定差异,盐炙对其抗氧化活性产生影响。

大果木姜子化学成分、药理作用与产业化研究进展

大果木姜子是贵州省十大苗药之一,为苗族、布依族民间常用药材,主要用于治疗心律失常、心血管疾病等。近年来,大果木姜子化学成分和药理作用文献报道较少,也未有新产品问世。本文对国内外大果木姜子化学成分、药理作用和相关产业的研究进行梳理,旨在为其今后的研究和新产品的开发提供参考。

黔产太子参中多糖含量测定

目的:建立太子参药材中多糖含量的测定方法。方法:采用水提醇沉法和苯酚-硫酸显色法,以D-无水葡萄糖为对照品,在488 nm处用紫外—可见分光光度仪测定太子参多糖的含量。结果:15批太子参中多糖含量在16.96%~27.40%,平均含量为20.43%。结论:此方法提取时间短、操作简单、重复性好,适用于太子参中多糖的含量测定,可为太子参质量标准的完善提供参考。

响应面法优化黔产大蝎子草水溶性多糖提取工艺研究

目的:本次试验是针对黔产大蝎子草的水溶性多糖提取工艺进行优化。方法:以浸泡时间、料液比和提取时间为考察因素,以黔产大蝎子草总多糖含量为指标,进行单因素试验并设计Box-Behnken响应面试验。结果:大蝎子草水溶性多糖的最优提取工艺为:浸泡时间53 min、料液比1:15 g/mL、提取时间90 min,在该条件下测出总多糖含量为10.60 mg/g。结论:本次通过响应面法对大蝎子草水溶性多糖提取优化结果表明,该优化方法稳定、重复性好、操作便捷、简单易行,也为大蝎子草质量标准的完善提供了参考。

响应面法优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺及其水提液抗氧化活性分析

目的:优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺,并对其水提液抗氧化活性进行分析。方法:以浸泡时间、料液比和提取时间为影响因素,大蝎子草水溶性总黄酮含量为评定指标,设计响应面实验。通过DPPH和ABTS自由基清除实验,对大蝎子草水提液的抗氧化活性进行分析。结果:大蝎子草水溶性总黄酮的最佳提取工艺为浸泡时间65 min、料液比1∶19、提取时间70 min,水溶性总黄酮含量为6.42±0.026 mg/g。大蝎子草水提液和VC溶液对DPPH自由基的最大清除率分别为73.38%和97.34%,IC_(50)值分别为59.616μg/mL和0.018μg/mL,大蝎子草水提液和VC溶液对ABTS自由基的最大清除率分别为99.38%和99.47%,IC_(50)值分别为12.086μg/mL和13μg/mL。结论:该方法简便、稳定、可行,可用于大蝎子草水溶性总黄酮的提取,且其水提液具有一定的抗氧化作用。

补骨脂生品及其盐制品饮片质量标准研究

目的:通过对15批次不同产地的生品补骨脂及盐补骨脂进行研究,建立其质量标准。方法:采用薄层色谱法鉴别,对水分、灰分、醇浸出物含量等指标进行测定,采用HPLC测定补骨脂素及异补骨脂素含量,并进行结果分析。结果:15批补骨脂及盐补骨脂薄层色谱鉴别显示供试品及对照品斑点清晰、一致。生品补骨脂与盐补骨脂水分分别不过7%、6%。总灰分均不过8%,酸不溶性灰分均不得过2%,醇溶性浸出物分别不少于20%、40%,补骨脂素和异补骨脂素总含量不少于0.7%。结论:建立补骨脂及盐补骨脂饮片质量评价标准,并对其炮制过程中水分、灰分、浸出物等指标含量变化变化进一步分析,补骨脂素与异补骨脂素之间转化机制亟待进一步研究。

Box-Behnken响应面法优选盐炙补骨脂炮制工艺

目的:优化补骨脂盐炙工艺,制定含量测定方法并考查最佳盐炙方法的炮制工艺参数。方法:以补骨脂素、异补骨脂素含量为评价指标,选取加盐量、炮制温度、炮制时间为考查因素,采用Box-Behnken响应面法优化补骨脂的盐炙工艺并进行验证。结果:最佳盐炙工艺条件为炮制温度为加盐量2.6%,炮制时间15 min,炮制温度164℃。结论:优化工艺后的盐炙补骨脂质量稳定可控,制备简单可行,为实际生产提供了理论依据。