PinX1基因真核表达载体的构建及其在Hek293细胞中的表达

目的确定PinX1在转染该基因的真核细胞Hek293内的表达定位。方法采用RT-PCR技术从HepG2中扩增PinX1,克隆入真核表达载体pcDNA3-vsv,重组质粒转染Hek293细胞,免疫细胞化学法检测蛋白质的表达。结果从HepG2细胞中获得PinX1基因,成功构建真核表达载体pcDNA3-PinX1-vsv,将其转染Hek293细胞后,免疫细胞化学法检测结果表明PinX1在细胞核内表达。结论成功获得PinX1基因,转染后在Hek293细胞核内表达,为探索PinX1在端粒、端粒酶调控中的作用机制奠定基础。

UF-100型尿沉渣分析仪用于尿中红细胞检测的评价

目的 评价UF-100型尿沉渣分析仪对尿中红细胞检测的效能。方法 随机留取尿液标本204份,UF-100型和相差显微镜及普通显微镜镜检及结果判断均采用双盲方式判断,并比较镜检和UF-100仪检测结果的一致性。结果 尿沉渣细胞计数以显微镜检查为标准,UF-100分析仪检测标本的假阳性率为16.5％,假阴性率为14％,敏感度为86％,特异性为83.5％;沉渣分析,以相差显微镜,镜检形态为标准,UF-100分析仪检测标本假阳性率为12.5％,假阴性率17.3％,敏感度为82.7％,特异性为87.5％。经配对资料X2检验,UF-100分析仪与普通及相差显微镜检查结果有很好的相关性。结论 尿液中有形成份复杂,红细胞检测易受干扰,UF-100仪不能完全代替镜检,但可作为一种过筛和治疗监控的手段,有很高的临床应用价值。

血浆D二聚体检测在结肠癌诊断中的应用

目的探讨血浆D二聚体在结肠癌诊断中的临床意义。方法以48例结肠癌患者为观察组,35例结肠息肉为疾病对照组,体检中心体检的健康人48例为健康对照组,比较三组受检者D二聚体水平,ROC曲线分析D二聚体对结肠癌的诊断效能。结果观察组、疾病对照组、健康对照组血浆D二聚体含量分别为(0.929±0.433)、(0.140±0.064)、(0.136±0.063)mg/L,观察组与疾病对照组、健康对照组比较,P均<0.05。血浆D二聚体诊断结肠癌的ROC曲线下面积为0.983。血浆D二聚体取截断值为0.24 mg/L时,诊断结肠癌的敏感度为93.75%、特异度为98.8%。结论血浆D二聚体可作为结肠癌的辅助诊断指标。

导数光度法直接测定血清中痕量锌的研究及应用

建立了一种以锌与meso-四-(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉显色反应为基础的二阶导数光度法测定血清中锌的方法.在10ml溶液中,0～2μgZn^(2+)符合比耳定律.血清中共存元素不干扰锌的测定,其二阶导数光度法的检出限为1.86ng·ml^(-1),已用于血清中锌的直接测定.结果满意.

STA-Compact型全自动血凝仪的性能评价

目的了解SAT-Compact全自动血凝仪使用3年后的基本性能。方法选择凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、纤维蛋白原(Fbg)等几种指标,对该仪器性能进行初步评价。结果各指标线性试验相关系数均在0.97以上,CV小于5％,携带污染率PT为-1.2％,aPTT为0.32％。结论STA-Compact全自动血凝仪仍具有较高的精密度,准确度,及较强的抗生物性干扰物质的功能,能够应用于临床常规工作。

UF-100型全自动尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪在尿常规检验的应用

目的 评估UF-100型全自动尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪在尿常规检验中联合应用的价值。方法 收集305份尿液样本,分别进行UF-100仪、尿干化学分析仪与显微镜镜检检测的比较。同时,观测它们一致性。结果 与镜检相比,联合应用的阴性结果有很好的符合率,但有4.3％假阳性率。结论UF-100尿液分析仪和尿干化学分析仪的联合应用不能完全替代镜检,但可起筛选作用,且减轻劳动强度,提高了精确度。

BECKMAN COULTER STKS全自动血细胞分析仪国产试剂应用的评估

目的评估国产试剂在进口血细胞分析仪上的应用。方法以美国产BECKMAN COULTER STKS全自动血细胞分析仪为测定仪器,对同一批病人标本分别用进口与国产试剂进行测定,用统计学方法进行数据处理。结果国产试剂RBC、WBC、Hb、PLT本底值均低于进口试剂;各分析参数如RBC、WBC、Hb、PLT、NE、MO、LY、EO与进口试剂差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产试剂可替代进口试剂,以得到更多的社会和经济效益。

端粒和端粒酶相互作用蛋白在真核细胞中的表达

目的从人肝癌细胞系HepG2中获得PinX1基因,构建真核表达载体,转染Hek293细胞。方法采用RT-PCR技术从HepG2中扩增PinX1,克隆入真核表达载体pcDNA3,重组质粒转染Hek293细胞,免疫组化法检测蛋白的表达。结果RT-PCR方法扩增获得PinX1基因,构建真核表达载体pcDNA3-PinXl-vsv重组质粒转染Hek293细胞,免疫组化检测结果表明在细胞核内有PinX1表达。结论成功获得PinX1基因,构建的重组载体可在Hek293细胞内表达,为探索PinX1在端粒、端粒酶调控中的作用机制奠定基础。

稳定表达Prohibitin 2蛋白SW620细胞株的建立

目的构建prohibitin 2(Phb2)蛋白基因的真核表达载体,并建立稳定表达Phb2蛋白的细胞株。方法扩增Phb2基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pcDNA3中,将重组表达质粒pcDNA3-FLAG-Phb2转染至SW620细胞,用G418筛选阳性克隆,Western blot检测Phb2蛋白的表达。结果经测序鉴定,成功构建了Phb2基因的真核表达载体。转染SW620细胞后能够稳定有效的表达Phb2蛋白。结论成功构建了稳定表达Phb2蛋白的细胞株。