HIF-1α蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段的表达及意义

目的:本研究通过观察HIF-1α正常乳腺组织及乳腺癌组织中的蛋白表达,探讨HIF-1α在乳腺癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组织化学SP法检测正常乳腺组织(20例)、乳腺囊性增生组织(20例)、乳腺不典型增生组织(20例)及乳腺癌组织(60例)中HIF-1α蛋白的表达,并分析其和乳腺癌临床病理特征的关系.结果:HIF-1α蛋白在正常乳腺组织无阳性表达,在乳腺囊性增生组织、乳腺不典型增生组织及乳腺癌组织中的阳性率分别为5%,30%,61.67%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);低分化组癌组织中HIF-1α蛋白的表达率高于高、中分化组,差异有统计学意义(P<0.05);并且随着分期越高,其阳性表达率越高,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移组中的HIF-1α表达明显高于无转移(P<0.05);HIF-1α蛋白表与患者5a生存率有关(P<0.05).结论:HIF-1α蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段的表达呈进行性上升的趋势,过度表达提示预后不良.

大肠组织中PTEN表达在大肠癌诊断与预后中的临床意义

目的:探讨PTEN的表达在大肠癌发生、发展中的作用及其在预后判断中的临床意义. 方法:采用免疫组化S-P方法对12例正常大肠组织,45例大肠癌组织进行PTEN蛋白表达的研究. 结果:大肠癌组织中PTEN蛋白阳性表达率(42.22%),明显低于正常大肠组织(91.67%),两组比较有显著性差异(P<0.05).PTEN蛋白表达与大肠癌肿瘤大小、患者年龄、组织分级、临床分期无关.PTEN蛋白的表达与大肠癌淋巴结转移、远处脏器转移及预后有关. 结论:PTEN蛋白的异常表达参与了大肠癌的癌变过程, PTEN可以作为判断大肠癌浸润和转移的分子学指标,并对大肠癌预后有一定的参考价值.

KAI1/CD82的表达与乳腺癌转移、预后的关系

目的探讨KAI1/CD82在乳腺癌进展中的作用及其在预后判断中的价值。方法采用免疫组化方法对60例有临床和随访资料的乳腺癌组织进行KAI1/CD82蛋白表达的研究。以15例良性乳腺瘤,15例正常乳腺组织作对照,分析与临床病理指标的关系。结果在乳腺癌原发灶中KAI1/CD82阳性表达41．66%,较正常乳腺组织(80%)、良性乳腺瘤(73．33%)明显减少(P＜0．01、P＜0．05)。KAI1/CD82在有淋巴结转移、周围组织侵润、远处脏器转移肿瘤中表达显著降低(P＜0．01、P＜0．05、P＜0．05),生存5年以上者的KAI1/CD82蛋白阳性表达率59．38%,明显高于生存时间不超过5年者21．43%(P＜0．01)。患者的术后复发情况与KAI1/CD82表达无关。结论KAI1/CD82的异常表达可能参与了乳腺癌的恶性进展。检测KAI1/CD82的表达对判断肿瘤的侵袭、转移及乳腺癌患者预后有一定的参考价值。

罗格列酮抑制卵巢癌生长的体内外实验研究

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞生长的抑制作用。方法:应用噻唑蓝法(MTT)检测RGZ对卵巢癌细胞增殖的影响;应用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染色观察细胞凋亡形态学变化;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RGZ对SKOV3细胞PPARγ、Bcl-2及Caspase-3 mRNA表达的影响;建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,分为RGZ治疗组及对照组,观察RGZ对移植瘤体积和重量变化的影响。结果:①MTT法检测不同浓度RGZ组(1、10、50、100、200μmol/L)细胞生长抑制率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),并呈浓度依赖性抑制;②DAPI荧光染色发现,RGZ作用24小时后,细胞核浓缩,着色较深呈亮蓝色,部分细胞核破裂呈碎片状或多边形;③RT-PCR检测发现,不同浓度RGZ(10、50、100μmol/L)作用于SKOV3细胞24小时后PPARγ、Caspase-3 mRNA表达水平上调,而Bcl-2 mRNA表达水平下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);④细胞接种26天后,RGZ各用药组(4、12、60、120mg/kg)裸鼠移植瘤体积增长缓慢,其抑瘤率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RGZ可明显抑制SKOV3细胞的生长,诱导其凋亡,并呈浓度依耐性,通过激活PPARγ-Bcl-2-Caspase-3细胞凋亡信号通路而实现抑制肿瘤细胞生长的作用。

乳腺癌组织中Glut1的表达及其与临床病理因素和血管生成的关系

采用免疫组织化学方法检测Glutl的表达和MVD值在60例乳腺癌组织及20例正常乳腺组织中的差异,分析它们之间的关系。结果示Glutl在乳腺癌组织中的阳性表达率为53.33%,在正常乳腺组织中无表达,两者差异有显著性(P<0.05)。中、低分化组癌组织中Glutl的表达率高于高分化组(P<0.05);淋巴结转移组中的Glutl表达明显高于无转移组(P<0.05)。乳腺癌临床分期高者,其Glutl表达率高于临床分期较低者(P<0.05)。Glutl表达与肿瘤直径、ER和PR表达无关,而与MVD值有关(P<0.05)。提示Glutl蛋白的过表达参与了乳腺癌的发生、发展,并与乳腺癌血管生成密切相关。

一氧化氮合酶抑制剂对大肠癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用

目的:观察一氧化氮合酶抑制剂N-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对大肠癌细胞的抑制作用,以及对移植瘤内血管生成的影响.方法:建立大肠癌裸鼠移植瘤模型再随机分为生理盐水对照组(n=6,0.2 mL)、L-NAME组(n=6,1.5 mg/kg)、5-FU组(n=6,5 mg/ kg)、L-NAME+5-FU联合组(n=6,L-NAME 1.5 mg/kg,5-FU 5 mg/kg),皆以灌胃方式给药,3次/wk,共2 wk.测量各组肿瘤体积,观察L-NAME的体内抗瘤作用.采用免疫组化方法观察移植瘤的微血管密度(MVD),用Western blot方法检测肿瘤组织VEGF蛋白的表达.结果:L-NAME,5-FU,L-NAME+5-FU组抑瘤率分别为34.1%、46.0%、74.1%,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01),联合治疗组与L-NAME,5-FU组比较,差异也有显著性(P<0.01);MVD值对照组为28.9±2.7,L-NAME组为16.2±3.1,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05);L-NAME组移植瘤VEGF蛋白的表达(113.14±2.34),与对照组(98.56±1.76)相比,明显减弱(P<0.05).结论:L-NAME具有抑制肿瘤新生血管生成的作用,可抑制大肠癌裸鼠移植瘤的生长;和5-FU联合具有协同抗肿瘤作用.

乏氧条件下雷帕霉素对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨乏氧条件下雷帕霉素（RPM）对乳腺癌细胞的影响及其机制。方法M啊法检测乏氧条件下RPM对乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖的抑制作用，采用定量RT—PCR和Westernblot检测缺氧诱导因子（HIF-1α）、VEGF基因mRNA和蛋白表达。结果缺氧条件下，RPM对MCF-7细胞生长有抑制作用；HIF-1理蛋白水平随着RPM浓度提高而降低（P〈0．01），而HIF-1α mRNA表达水平无明显变化；VEGF的转录和蛋白表达均随着RPM浓度升高抑制率增加（P〈0．01），呈剂量依赖性。结论RPM能抑制乳腺癌的肿瘤缺氧反应，从而抑制肿瘤的生长和血管的生成。

KAI1/CD82、Integrin α5在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨KAI1/CD82和Integrin α5在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:用免疫组织化学SP法检测64例乳腺癌组织KAI1/CD82和Integrin α5的表达。结果:乳腺癌组织中KAI1/CD82和Integrin α5阳性表达与正常乳腺组织比较有显著差异(P<0.05);两种基因蛋白表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移密切相关,差异有统计学意义(P<0.05);二者在乳腺癌组织中呈正相关(P<0.01)。结论:KAI1/CD82和Inte-grin α5蛋白的表达与乳腺癌的演进和转移密切相关,检测其表达异常对判断临床进展以及推测预后有一定的参考价值。

缺氧诱导因子1、葡萄糖转运因子1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1(HIF-1α)、葡萄糖转运因子1(Glut1)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化法检测20例正常乳腺组织、20例不典型增生乳腺组织、60例乳腺癌组织中HIF-1α、Glutl的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果HIF-1α、Glutl在乳腺癌和不典型增生乳腺组织中的阳性率明显高于正常乳腺组织(P<0.05)。在乳腺癌组织中HIF-1α、Glutl蛋白阳性表达率与组织病理学分级、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),但与肿瘤大小无关;HIF-1α、Glutl蛋白表达在乳腺癌组织中呈正相关(P<0.05)。结论HIF-1α和Glutl蛋白的过表达共同参与了乳腺癌的发生、发展。

多药耐药基因在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺癌血多药耐药基因(mdr1)表达与临床的关系。方法 本实验采用逆转录—多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测62例乳癌患者外周血淋巴细胞mdr1 mRNA的表达。结果 (1)34例未化疗组中,mdr1表达阳性率为23.53％(8/34),28例化疗组中,mdr1表达阳性率为57.14％(16/28),两组间有极显著差异。(2)乳腺癌血mdr1表达与临床分期无明显相关性。(3)乳癌患者中有治疗指征者共36人,mdr1阳性表达者中治疗有效率为16.67％(4/15),mdr1阴性表达者中有效率为61.9％,两组间有显著差异。结论 通过检测乳腺癌患者外周血淋巴细胞ndr1表达,预测其化疗疗效,为制定合理的个体化方案提供依据。

细胞周期素D1在卵巢上皮性肿瘤中表达及临床意义

目的 探讨CyclinD1在卵巢上皮性肿瘤发生、发展中的作用及临床意义。方法 采用Sp免疫组化方法对10例正常卵巢组织、10例良性卵巢瘤、41例卵巢上皮性癌进行CyclinD1蛋白表达的检测。结果 CyclinD1在正常卵巢组织及良性卵巢瘤中均无表达。41例卵巢上皮性癌组织中,CyclinD1阳性表达13例,CyclinD1在卵巢上皮性癌的表达与良性卵巢及正常卵巢组织有显著差异(P<0.05)。CyclinD1在卵巢癌早、晚期表达无显著差异(P>0.05)。CyclinD1表达随病理分级增加而增加,高分化组和中、低分化组CyclinD1表达有显著差异(P<0.05)。CyclinD1的阳性表达与预后无关。结论 CyclinD1在卵巢上皮性肿瘤的发生、发展中起作用,CyclinD1是一常见的分子异常并且可以用来判断肿瘤的恶性程度。

白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:60例初治或复发AL中有44例患者高表达WT1基因,阳性率73.3%。在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)阳性率分别为70.8%和83.3%,两组无显著性差异。随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势,CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高。结论:用NestRT-PCR测定WT1基因的表达可用作检测白血病微小残留病(MRD)的一项指标。

熊果酸联合顺铂抑制卵巢癌生长的实验研究

目的:探讨熊果酸(UA)对卵巢癌细胞株SKOV3及卵巢癌皮下移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测UA对SKOV3细胞的增殖抑制效应;建立卵巢癌皮下移植瘤模型,观察UA对移植瘤的生长抑制作用;用免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:UA对体外培养的SKOV3细胞生长具有抑制作用,与DDP联合应用使SKOV3细胞生长进一步受到抑制。体内实验表明:各治疗组肿瘤的生长明显受到抑制,而联合治疗组抗瘤作用进一步增强。UA能下调肿瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达,同时明显提高肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论:UA可明显抑制卵巢癌细胞生长,并诱导细胞凋亡,其主要机制与调节Bcl-2和Bax的蛋白表达有关。

miRNA-34a在宫颈HPV持续感染患者脱落细胞中的表达及意义

目的:研究miRNA-34a在宫颈高危型人乳头瘤病毒(human paplilloma virus,HPV)持续感染患者脱落细胞中的表达及临床意义。方法:收集2012年3月-2014年3月妇科门诊60例HPV感染患者的宫颈脱落细胞学组织标本,运用Poly(A)加尾法的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测miRNA-34a在宫颈脱落细胞中的表达,分析其与HPV持续感染的关系。结果:miRNA-34a在HPV持续感染标本中表达较转归组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA-34a与HPV持续感染密切相关,可能成为HPV持续感染在宫颈癌早期筛查、诊断及临床诊治中的新指标。

恶性肿瘤的区域性联合生物治疗的疗效观察

目的 探索恶性肿瘤的联合生物治疗的疗效。方法 将接受区域性联合生物治疗的肿瘤患者为治疗组,传统的接受含CTX、ADM等单纯化疗的病人为对照组。结果 治疗组CR7例、PR17例,有效率为75％,对照组CR1例、PR5例,有效率为42.9％,P<0.05。结论 此疗法优于传统化疗,联合使用LAK/IL-2和CTX、ADM具有显著的抗肿瘤作用,并克服了全身生物疗法的经费高、副作用大的不足,增加了中晚期患者的治疗有效率。

参芪扶正注射液配合化疗治疗肺癌的临床观察

目的探讨参芪扶正注射液配合化疗治疗肺癌的增效减毒,改善肺癌化疗副反应的作用。方法将100例肺癌患者随机分为治疗组和对照组。治疗组化疗前3天用参芪扶正注射液250ml静脉滴入,每天1次,10天为一个周期。对照组为单纯化疗。结果治疗组总有效率为52%,对照组总有效率为32%,血液毒性白细胞降低Ⅱ度以上发生率治疗组为40%,对照组为62%,血小板分别为22%及44%,两组间有显著性差异(P<0.05)。同时体重及生活质量治疗组均较对照组提高,差异有显著性(P<0.05)。胃肠道反应治疗组较对照组明显减轻。结论参芪扶正注射液联合化疗有明显协同作用,能减轻化疗的副反应,保护造血系统,改善恶心、呕吐反应,使体重增加,提高患者的生活质量。

沉默Id1基因表达对卵巢癌细胞生长影响的实验研究

目的:通过构建人卵巢癌SKOV3 Id1特异性siRNA慢病毒载体及其裸鼠移植瘤模型,观察沉默分化抑制因子(inhibitor of differentiation-1,Id1)表达对卵巢癌SKOV3生长的影响。方法:根据Id1基因序列设计并合成的siRNA片段转染SKOV3细胞,将转染细胞分为四组:cell+lv-shRNA-Id1(实验组)、cell+lv-shRNA-NC(质粒对照组)、cell+lv-control(空病毒对照组)、cell(空白对照组),筛选出稳定转染的SKOV3细胞克隆,48小时后检测细胞生长活性。将40只裸鼠随机分为四组,分别接种上述转染成功的细胞,30天后称取瘤体重量,计算抑瘤率;然后通过Western blotting法检测移植瘤中Id1蛋白的表达。结果:在体外试验中,实验组的细胞生长活性显著低于空白对照组,具有统计学意义(P<0.05),三对照组间无明显差异(P>0.05);体内实验显示,实验组平均瘤重均低于其他三对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),三对照组间瘤重差异无统计学意义(P>0.05);实验组、质粒对照组、空病毒组抑瘤率分别为45.98%、4.84%、4.50%;Western blotting结果显示,实验组中Id1表达较对照组明显下调(P<0.05)。结论:沉默Id1基因能抑制卵巢癌细胞的生长,有望成为卵巢癌治疗新靶点。