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PRRSV CH-1R疫苗株N蛋白的克隆及原核表达
1
作者
孙斯娴
陈奥运
+2 位作者
李晓白
陆相嵩
任晓明
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第5期177-180,共4页
为了区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原是来自疫苗株还是野毒株,试验采用RTPCR和PCR方法从PRRSV CH-1R株中扩增出ORF7基因,通过T4连接酶将ORF7基因与p ET-28a(+)载体连接,导入E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,并以20%IPTG进行诱导表...
为了区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原是来自疫苗株还是野毒株,试验采用RTPCR和PCR方法从PRRSV CH-1R株中扩增出ORF7基因,通过T4连接酶将ORF7基因与p ET-28a(+)载体连接,导入E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,并以20%IPTG进行诱导表达。结果表明:重组菌可表达分子质量为16.0 ku的融合蛋白,且20%IPTG诱导3 h的表达效果最好;表达产物纯化后可得到纯度较高的目的蛋白,经Western-bolt分析可确认该蛋白为PRRSV CH-1R株N蛋白。说明在原核表达系统中可表达出PRRSV CH-1R株N蛋白,并且能够使其携带上多聚组氨酸(6×His-tag)标签,形成N-His融合蛋白,使该蛋白与其他PRRSV经典株的N蛋白形成差异化。
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关键词
PRRSV
CH-1R株
N蛋白
His标签
N-His融合蛋白
克隆
原核表达
原文传递
题名
PRRSV CH-1R疫苗株N蛋白的克隆及原核表达
1
作者
孙斯娴
陈奥运
李晓白
陆相嵩
任晓明
机构
北京农学院动物科学技术学院
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第5期177-180,共4页
基金
现代农业产业技术体系建设项目(PXM2015 014207000054
PMX2015_014207_000055)
文摘
为了区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原是来自疫苗株还是野毒株,试验采用RTPCR和PCR方法从PRRSV CH-1R株中扩增出ORF7基因,通过T4连接酶将ORF7基因与p ET-28a(+)载体连接,导入E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,并以20%IPTG进行诱导表达。结果表明:重组菌可表达分子质量为16.0 ku的融合蛋白,且20%IPTG诱导3 h的表达效果最好;表达产物纯化后可得到纯度较高的目的蛋白,经Western-bolt分析可确认该蛋白为PRRSV CH-1R株N蛋白。说明在原核表达系统中可表达出PRRSV CH-1R株N蛋白,并且能够使其携带上多聚组氨酸(6×His-tag)标签,形成N-His融合蛋白,使该蛋白与其他PRRSV经典株的N蛋白形成差异化。
关键词
PRRSV
CH-1R株
N蛋白
His标签
N-His融合蛋白
克隆
原核表达
Keywords
PRRSV CH -1 R strain
N protein
His tag
N -His fusion protein
cloning
prokaryotic expression
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
Q785 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PRRSV CH-1R疫苗株N蛋白的克隆及原核表达
孙斯娴
陈奥运
李晓白
陆相嵩
任晓明
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016
0
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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