脱细胞异种骨基质植入后受体外周血T淋巴细胞亚型的变化

目的 观察异种脱细胞去抗原骨基质植入后受体细胞免疫状态的变化。 方法 新西兰大耳白兔2 0只,随机分为4组,每组5只,制成股后肌袋模型,分别植入自体骨、异种脱细胞猪肋骨基质和酒精浸泡猪肋骨,设立假手术组作为对照。术后1、2、4和6周采集外周血,流式细胞仪检测外周血CD4 + 、CD8+ 和CD2 5 + T淋巴细胞的变化;分别于植入后2周和6周,将植入骨块连同周围组织取出,行组织学观察。 结果 同一时间点,外周血中CD4 +、CD8+ T淋巴细胞在酒精浸泡组显著增高,与其余组差异有统计学意义(P<0 .0 5 ) ,其余各组间差异无统计学意义(P>0 .0 5 ) ;CD2 5 + T淋巴细胞在酒精浸泡猪肋骨组2周后显著高于其它组,差异有统计学意义(P<0 .0 5 )。2周时局部组织中见炎性细胞浸润,以粒细胞为主;6周时自体骨及异种脱细胞骨基质组炎性细胞明显减少,代之以大量成纤维细胞及少量淋巴细胞,可见软骨岛形成。 结论 经脱细胞处理的异种骨基质植入后,近期对受体细胞免疫无明显影响。

缺血再灌注损伤对再植肢体关节滑膜的早期影响

目的 探讨氧自由基在滑膜缺血再灌注 (IR)过程中的变化规律及对血管内皮细胞、滑膜细胞的损伤。方法 65只健康新西兰大白兔随机分为正常对照组 (5只 ) ,缺血组 (2 0只 )和IR组 (4 0只 ) ;分别于缺血 4、6、8、1 0h及再灌注后 1、3、6、1 2、2 4、72、1 68、3 3 6h取滑膜组织进行光境观察 ,用硫代巴比妥法检测组织匀浆液中丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)的动态变化。结果IR组滑膜MDA显著高于对照组及缺血组 (P <0 .0 1 ) ,MDA呈双峰变化 ,第一个峰值与血管内皮细胞的损伤时间一致 ,第二个峰值与滑膜组织内粒细胞的聚集密切相关 ;缺血组与对照组MDA无显著性差异 (P >0 .0 5)。SOD在缺血阶段即明显降低 ,IR早期持续在低水平。结论 滑膜组织IR损伤初期以血管内皮细胞的原发性再灌注损伤为主 ,1 2h后的继发过氧化损伤与滑膜组织中大量的炎细胞浸润所产生的自由基及组织对自由基的清除能力降低密切相关。

不同处理异种骨植入后受体T淋巴细胞亚型变化

目的:观察异种脱细胞骨基质植入受体后体内细胞免疫变化从而判断其免疫原性。方法:新西兰大耳白兔20只,随机分为4组:自体骨组;异种脱细胞猪肋骨组、乙醇浸泡猪肋骨组及假手术组;将上述骨基质植入兔股后肌群,于植入后1,2,4,6周用流式细胞仪检测外周血CD4+,CD8+T淋巴细胞的变化;植入后6周,将植入骨基质连同周围组织取出,作组织学观察、免疫组化染色记数上述CD4+,CD8+T细胞变化。结果:在同一时间点,外周血中T淋巴细胞除乙醇处理组显著增高外,其他各组间无统计学差别;而局部组织中T淋巴细胞变化为:乙醇处理组>脱细胞骨基质组、自体骨>假手术组(P<0.01);脱细胞骨基质组与自体骨组间差别不显著(P>0.05)。结论:经脱细胞处理后异种骨基质具有免疫原性低,对受体全身及局部细胞免疫无明显影响。局部组织结合外周血淋巴细胞变化更能够准确反映骨基质移植后的免疫状况。

脱细胞骨基质对骨髓间充质干细胞成骨及示踪的观察

目的观察脱细胞骨基质材料(ACBM)与骨髓基质干细胞(MSCs)复合,并种植到动物体内后细胞的成骨及定位情况。方法分离培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠MSCs,体外扩增后种植到脱细胞骨基质材料并观察材料对细胞粘附的影响;复合物植入裸鼠骶部肌袋作为实验侧,并以单纯ACBM材料植入作为对照侧,4周后进行大体观察、组织学检查x线及荧光检测。结果细胞材料共培养后6小时观察见材料表面粘附细胞伸展、之后细胞间出现连接、活性表达;体内植入后4周,X线及组织学观察实验侧植人物为中心成骨明显,荧光显微镜下见新生骨组织中BCD阳性细胞较多。对照侧材料逐渐吸收。结论 ACBM作为支架材料有助于MSCs的粘附、生长和成骨活性的表达。

组织工程骨神经化构建的组织学研究

[目的]通过观察不同神经束植入组织工程骨后组织学的变化,探讨组织工程骨神经化构建的效果。[方法]将新西兰大白兔的骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)进行诱导分化为成骨细胞,与β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)复合制作组织工程骨,分别将不同类型神经束植入组织工程骨,进行以下分组:A组,组织工程骨组;B组,感觉神经束植入组;C组,运动神经束植入组;D组,血管束(含有自主神经)植入组;E组,感觉、运动神经束联合植入组。分别用于修复兔股骨1.5cm大段骨缺损;各组分别在12周进行组织学的Masson染色,降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的免疫组织化学检测,并进行统计学分析,以比较骨缺损修复情况。[结果]在观察期内,有感觉神经植入的组别和血管束植入的组别在组织学上具有明显骨化作用,而运动神经束植入却没有明显的促进作用。[结论]感觉神经束和血管束具有明显的促组织工程骨成骨作用,可以作为组织工程骨神经化构建的一种方法。

不同类型皮瓣修复足踝部软组织缺损的临床效果

目的探讨不同类型皮瓣修复足踝部软组织缺损的临床效果。方法对30例足踝部软组织缺损患者进行皮瓣修复,其中足底内侧皮瓣修复足跟部软组织缺损7例,股前外侧皮瓣修复足背、足内侧软组织缺损12例,腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝部软组织缺损11例。结果患者均获得随访,时间1-5年。29例皮瓣完全成活,仅1例股前外侧皮瓣发生坏死,二次手术给予植皮。13例患者因皮瓣臃肿,二期行皮瓣修整术;2例患者因术后长期从事体力劳动足跟部发生溃疡;其余患者皮瓣质地柔软,踝关节功能恢复满意。供区均未出现并发症。足底内侧皮瓣修复患者皮瓣感觉功能完全恢复,股前外侧皮瓣修复患者感觉均部分恢复,5例吻合神经腓肠神经营养血管皮瓣患者于术后3-5个月感觉功能完全恢复,剩余患者感觉功能部分恢复。结论足底内侧皮瓣、股前外侧皮瓣、腓肠神经营养血管皮瓣各有优缺点,应根据足踝部软组织缺损面积、部位的不同选择合适的皮瓣,以提高皮瓣成活率,重建肢体功能。

以前路为基础的下颈椎骨折脱位的治疗策略

目的回顾分析以前路复位固定为基础的下颈椎骨折脱位的适应症和治疗策略。方法对179例下颈椎骨折脱位进行手术治疗，114例行前路手术，42例行前-后路手术，23例行前-后-前入路手术，定期X线复查观察植骨融合情况及颈椎稳定性，以Frankel分级作为脊髓功能恢复的判断标准。结果随访6～48个月，平均29．3个月，所有病例均完全复位，恢复了颈椎的正常序列及生理弧度，植骨全部融合，无内固定松动、断裂，无骨不连、假关节形成。脊髓功能得到不同程度的恢复。结论对于下颈椎骨折脱位患者，多数病例可以前路作为手术复位内固定的基础，部分病例根据骨折脱位的复位情况，辅以后路或前-后-前入路进行复位和固定。

肝素抗凝材料联合血管束植入修复骨缺损的血管化

背景:前期研究显示肝素-壳聚糖脱细胞骨基质材料植入骨缺损受区后,材料内部血液供应明显改善,将血管束植入大体积抗凝材料能否促进骨缺损处血液灌注和血管化进程?目的:观察局部抗凝的肝素-壳聚糖脱细胞骨基质材料联合血管束植入对骨缺损修复早期血液灌注及血管化的影响。方法:取25只健康新西兰大白兔制作双侧桡骨中段20mm长骨缺损模型,右侧植入局部抗凝的肝素-壳聚糖脱细胞骨基质材料联合自体血管束(实验组),左侧植入脱细胞骨基质材料联合自体血管束(对照组),术后1,3,7,14,28d行CT灌注成像及组织学观察。结果与结论:术后1d开始,实验组血容量、血流量显著高于对照组(P<0.05),且实验组材料中心部位有明显血液灌注,对照组植入物周围有血液渗透,此种趋势持续到术后28d。术后1d,实验组复合材料中有大量红细胞和有核细胞,对照组以渗透液体为主,偶见细胞;术后3-7d,实验组复合材料网孔中有血管形成,之后逐渐增多,对照组见植入血管血栓形成、管腔闭塞,周围组织纤维化包裹,实验组各时间点材料内部血管数高于对照组(P<0.05)。提示局部抗凝的肝素-壳聚糖脱细胞骨基质材料可促进血管束植入后材料内部的血液灌注和早期血管化进程。

外固定支架分期治疗胫腓骨Gustilo Ⅲ型骨折的临床疗效观察

目的探讨应用不同类型外固定支架分期治疗胫腓骨伴有骨缺损GustiloⅢ型骨折的临床疗效观察。方法选择2012年1月至2015年1月我院收治的伴有骨缺损的胫腓骨GustiloⅢ型骨折22例,所有患者创面进行彻底清创,骨折一期给予半环形外固定支架固定,部分患者残留创面给予皮瓣、植皮处理,待局部软组织好转后,二期给予更换Ilizarov环形外固定支架固定骨折断端,进行截骨延长术治疗骨缺损。结果本组22例患者均获得随访,随访时间16~36个月(平均20个月),17例患者二期截骨延长术后一期愈合,5例患者延长断端发生偏移,拆除外固定支架再次植骨钢板内固定,术后骨折愈合。术后功能根据Johner-Wruhs评分标准,优18例,良3例,差1例,优良率为95.5%。结论不同类型外固定支架分期治疗胫腓骨伴有骨缺损GustiloⅢ型骨折,前期可有效的保护断端软组织血运,减少二次损伤,符合损伤控制理论,后期可促进肢体恢复及功能重建,是治疗GustiloⅢ型骨折理想的方法。

肢体缺血再灌注后MMP-3在关节软骨中的表达

目的:了解肢体缺血再灌注后关节软骨内基质金属蛋白酶3(matrixmetalloproteinase- 3,MMP- 3)的表达情况。方法:35只成年健康新西兰大白兔,体重为(3. 0±0 . 5 )kg ,随机分为7组,行左侧后肢缺血8h(右侧为对照) ,于再灌注后1、3d及1、2、4、8和12周取膝关节胫骨平台软骨组织,石蜡切片,免疫组化SP法检测关节软骨内MMP -3的表达。结果:肢体缺血再灌注早期,MMP -3在关节软骨出现强阳性表达,肢体缺血再灌注后3d组阳性细胞较对照侧明显增多,至2周组达峰值(P <0 . 0 1) ,之后逐渐回落,12周组仍高于对照侧(P <0 . 0 5 )。结论:肢体缺血再灌注后,关节软骨内合成并分泌了MMP 3,在软骨基质的降解中发挥重要作用。

牵引架结合顶棒双钢板微创治疗Schatzker Ⅴ、Ⅵ型胫骨平台骨折

目的探讨牵引架结合顶棒双钢板微创治疗SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折的临床疗效。方法将40例胫骨平台SchatzkerⅤ、Ⅵ骨折患者随机分为牵引架结合顶棒双钢板微创治疗组(观察组)和传统切开复位髂骨植骨内固定组(对照组),每组20例。对比两组患者手术时间、术中出血量、住院时间、完全负重所需时间、术后6个月膝关节功能Rasmussen评分以及术后并发症。结果患者均获得随访,时间12~36个月。观察组手术时间、术中出血量、住院时间、完全负重所需时间均少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。住院时间两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月观察组膝关节功能Rasmussen评分优良率高于对照组,并发症发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论牵引架结合顶棒双钢板微创治疗胫骨平台骨折,膝关节可获得良好的功能恢复,并可减少术后并发症,临床效果优于传统切开复位髂骨植骨内固定。

SandersⅡ、Ⅲ型跟骨关节内骨折术中不植骨的安全性及疗效研究

目的探讨Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨关节内骨折术中骨缺损不植骨的安全性及疗效。方法选取笔者医院2011年1月~2014年1月手术治疗的Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨关节内骨折患者68例76足,根据是否植骨均分成对照组和观察组两组,每组各34例38足。不植骨患者为观察组,植骨患者为对照组,探究其治疗的安全性及疗效。结果随访12~36个月,平均18.6个月,观察组平均手术时间(55.6±5.4)min、平均出血量(52.9±18.2)mL,均明显短于对照组(71.7±7.2)min、(83.1±13.5)mL,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后Bohler’s角、Gissane’s角分别为(32.8±6.4)°、(136.1±7.3)°,与对照组(30.9±5.7)°、(134.5±6.8)°无统计学差异(P>0.05)。结论 Sanders Ⅱ、Ⅲ型跟骨关节内骨折术中骨缺损不植骨治疗具有较高的安全性,可取得较好的临床效果。

肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡的规律

目的:观察肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡情况,探讨其机制及凋亡对关节软骨退行性变的影响。方法:35只成年健康新西兰大白兔随机分为7组(每组5只),行左侧后肢缺血8h(右侧为对照),于再灌注后1,3d,1,2,4,8和12周取膝关节胫骨平台软骨组织,行透射电镜观察,原位末端标记(insituterminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测关节软骨细胞凋亡情况。结果:肢体缺血再灌注后1d,实验侧的TUNEL阳性细胞均数犤(19.8±2.1)个/高倍视野)犦明显多于对照侧(P<0.01),3d组最多,达到对照侧的360%,之后逐渐回落。透射电镜下发现缺血再灌注早期大量细胞坏死。结论:肢体缺血再灌注可引起关节软骨细胞损伤,软骨细胞凋亡,导致关节软骨蜕变。

手腕掌部毁损伤的显微外科修复

目的 总结近年来严重毁损伤修复的经验,采用带血管的髂骨移植再造掌腕骨及复合组织移植修复严重手腕掌毁损伤。方法 通过吻合血管保留残指,再造腕掌骨及复合组织修复使残指原位再植。结果 本组5例残指及复合组织全部成活,“再造手”外观良好,痛触觉恢复,能完成抓握及部分对掌功能。结论 对腕掌部毁损伤通过再造掌骨不但改善外观,功能恢复亦良好。

接合神经的甲皮瓣修复拇指皮肤软组织缺损

目的：探讨采用接合神经的甲皮瓣修复拇指甲床及皮肤软组织缺损的临床疗效。方法2006年1月-2014年1月，急诊应用甲皮瓣移植修复伴有甲床缺损的拇指皮肤软组织损伤32例，均将趾底神经-指固有神经接合，腓神经皮支与桡神经浅支接合，供区直接缝合。结果术后32例甲皮瓣全部成活，随访12~36个月，拇指外观良好，指甲生长良好，皮瓣颜色与周围皮肤近似；均有良好的感觉和运动功能，指腹两点辨别觉为4~8 mm。参照中华医学会手外科分会拇、手指再造功能评定试用标准评定，优25例，良6例，可1例，无差的病例，优良率96.9%。结论采用接合趾底神经-指固有神经、腓神经皮支与桡神经浅支的方法，急诊游离甲皮瓣移植修复合并甲床缺损的拇指损伤，术后拇指外形及功能比较满意，神经功能恢复良好。

不同浓度TGF-β1对人髓核细胞外基质成分基因表达的调控作用比较

目的研究在体外培养条件下,不同浓度转化生长因子-β1(TGF-β1)对人髓核细胞聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原及SOX-9基因表达的调控作用。方法以传2代人髓核细胞为研究对象,分别以0.1μg/L、1.0μg/L、10μg/L、100μg/L四种浓度的TGF-β1为培养液,设不含生长因子培养液为对照组,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Aggrecan、Ⅱ型胶原和SOX-9 m RNA表达情况。结果 0.1μg/L TGF-β1组与对照组相比,无显著性差异。1μg/L、10μg/L和100μg/L TGF-β1组在促进Aggrecan、Ⅱ型胶原和SOX-9基因表达方面作用显著,差异均具统计学意义。其中,10μg/L组促进细胞m RNA表达作用最明显。结论 TGF-β1能够促进髓核细胞Aggrecan、Ⅱ型胶原和SOX-9基因的表达,提示TGF-β1有可能在椎间盘退行性疾患的预防和治疗中发挥重要作用。

富血小板血浆联合玉红生肌膏在骨外露创面中换药及其护理

富血小板血浆（platelet—richplasma，PRP）是通过离心自体全血得到的血小板（PLT）浓缩物，对骨与软组织缺损具有很强修复作用，广泛应用于口腔外科、颌面外科、整形外科以及骨科，

髌骨环内固定系统治疗髌骨骨折的临床疗效观察

目的 探讨应用髌骨环内固定系统治疗髌骨骨折的临床疗效。方法 2009年1月—2014年3月笔者所在科利用髌骨环内固定系统选择性治疗髌骨骨折28例,均为闭合性髌骨骨折患者,其中横行骨折16例,粉碎性骨折12例,男23例,女5例;年龄27~63岁。结果 经6~24个月随访28例骨折均愈合,无固定钩松动、断裂,无皮肤刺激等并发症。根据Bostman髌骨骨折疗效评分标准：优24例,良4例,优良率100%。结论 髌骨环内固定系统对髌骨骨折固定牢固可靠,术后并发症低,有利于早期功能锻炼,是治疗髌骨骨折的一种可靠方法。

后侧入路内固定治疗胫骨平台后柱骨折临床分析

胫骨平台骨折患者人数约占全身骨折患者总数的1％，胫骨平台后柱骨折是一种特殊类型的关节内骨折，主要伴有后柱关节面压缩和移位。在临床较为少见。但近年来，随着机动车辆和交通事故的增多，胫骨平台后柱骨折患者的人数不断增加，发病率呈逐年递增趋势。胫骨平台后柱骨折的危害性极大，易伴发胭动脉和胫后神经等重要组织的损伤，如果治疗不当，还易导致膝关节创伤性关节炎等，会对患者的生活质量造成严重影响。

战士髓核细胞的形态学和生长活性研究

目的：对战士突出椎间盘髓核细胞进行体外培养，并研究髓核细胞的形态学和生长活性。方法从战士髓核组织分离培养髓核细胞并传代，取传1～7代细胞作为研究对象，光镜和电镜下观察细胞形态，并对细胞进行生长计数测定。结果战士髓核细胞可在体外培养传代，前3代细胞形态良好，增殖力强。结论战士突出椎间盘髓核细胞体外培养成功，前3代细胞可用于细胞学和组织工程学研究。