皮肤致敏测试整合策略的现状与展望

近年来,化妆品接触性皮炎、化妆品痤疮等化妆品皮肤病发病率呈明显上升趋势,日益严峻的化妆品的安全问题引起了社会的广泛关注。因此,国家陆续出台了一系列法律法规进一步规范化妆品的安全性问题,企业也必须对化妆品原料及成品进行充分的安全性评价和风险物质评估。皮肤致敏性检测是化妆品安全评价的毒理学终点之一。由于欧盟已全面禁止化妆品成分动物实验和禁止销售经过动物实验的化妆品原料及成品,因此,传统的动物实验尽管能满足皮肤致敏性测试要求,但不符合3R原则,所以替代实验逐渐取代动物实验成为化妆品安全性评价的重要工具。目前,通过OECD认证的单一致敏替代实验主要包括直接肽链反应检测实验、KeratinoSensTM实验、人细胞系活化实验等等。但单一的致敏替代实验通常不足以准确判断化合物的致敏性。因此,常将不同的单一实验结果根据AOP通路组合成整合策略,综合判定化合物的皮肤致敏性,从而提高预测准确性。目前,现有的整合策略主要由巴斯夫、欧莱雅、资生堂等几大日化企业自主开发,包括3选2原则、stacking-meta模型、ANN-EC3模型等。由于中国对动物替代实验方法引入较晚,国内日化企业及机构尚未开发自有的整合模型,但我们正在努力开发新型的皮肤致敏替代技术,例如在基因实时表达报告细胞构建、新QSAR计算机系统开发及THP-1/KC共培养系统构建等方向均已取得了较好成果。文章就日化相关企业目前使用的皮肤致敏测试的整合策略方法进行概括与阐述,并总结了中国自主开发的皮肤致敏替代方法的发展现状。

新型黄酮类化合物的抗肿瘤作用

目的黄酮类化合物是一类在植物中广泛分布并具有多种生物活性的天然产物,现已发现多种黄酮类化合物具有良好的抗肿瘤活性.近年来,关于槲皮素（Quercetin）及其衍生物的抗肿瘤作用的研究日趋深入,TL-2-8是一种结构独特的黄酮类新化合物,本研究探究其抗肿瘤功能及作用机制.方法实验分两部分即细胞水平实验和整体动物实验.细胞实验通过体外培养人乳腺癌细（MDA-MB-231,MDA-MB-468）,人胰腺癌细胞（BXPC3）,人结肠癌细胞（HCT116）,初步探讨TL-2-8体外抗肿瘤作用及相关机制.整体动物实验：皮下荷瘤小鼠随机分组分为阳性对照组（Quercetin,100mg·kg^-1）、空白对照组、TL-2-8低（25mg·kg^-1）、中（50mg·kg^-1）、高药物剂量组（100mg·kg^-1）,观察TL-2-8体内抗肿瘤作用.结论（1）抑制不同种类肿瘤细胞的增殖：TL-2-8对MDA-MB-231、MDA-MB-468、BXPC3、HCT116细胞的增殖具有不同程度的抑制作用,对应的半抑制率（IC50）分别为7.74、8.07、8.02和9.81μmol·L^-1.（2）影响细胞周期：在TL-2-8作用下,明显下调细胞周期蛋白CyclinD1、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1及CDK4的表达,阻止肿瘤细胞由G1～G0转入S期,抑制肿瘤细胞增殖.（3）抑制热休克蛋白90（HSP90）的功能：明显降低HSP90的ATP酶激活因子AHA-1的表达,影响HSP90与其分子伴侣蛋白以及辅伴侣分子蛋白的相互作用,从而抑制HSP90的生物活性,但并不诱导分子伴侣蛋白HSP70、HSP40及HSP27等的表达.（4）促进乳腺肿瘤细胞坏死：在TL-2-8药物12μmol·L^-1处理条件下,MDA-MB-231、MDA-MB-468的细胞坏死率分别为95.8%,89.8%.（5）体内抗肿瘤作用：TL-2-8能明显抑制荷MDA-MB-231乳腺癌小鼠肿瘤的生长,并呈现一定的量效关系,同等剂量下TL-2-8的抗乳腺癌效果比阳性对照Quercetin强很多,而且没有明显的毒性.

一种用于化妆品原料筛选的人原代角质细胞炎症模型的建立和应用

通过系统性地研究脂多糖(LPS)对人原代角质细胞的细胞活性、IL-1α、IL-8及ROS等与皮肤炎症密切相关指标的影响,开发了一种基于人原代角质细胞的皮肤炎症模型。结果显示,0.01~100µg/mL LPS对人原代角质细胞活性没有较大影响,100µg/mL LPS能同时诱导人原代角质细胞产生大量IL-1α和IL-8,0.01µg/mL LPS能诱导产生大量ROS。因此,建立了对不同炎症指标使用LPS进行差异化诱导的人原代角质细胞皮肤炎症模型,同时用此模型对样品OSM2021041301进行检测,发现样品OSM2021041301能显著抑制LPS诱导升高的IL-1α、IL-8水平,而对LPS诱导升高的ROS水平有较弱的抑制作用,说明此样品对LPS及其类似物诱导的IL-1α、IL-8及ROS升高而引起的炎症具有一定的抗炎作用。