鲤上皮瘤细胞两种转染试剂的条件优化及应用

鲤上皮瘤细胞是常用的鱼类细胞系,广泛使用在各种病毒学和基因功能研究中。利用细胞转染技术在鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究时,转染试剂和DNA的剂量以及取样时间没有统一的数据支持。为解决该问题,选取两种常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD,分别对荧光蛋白标记的多种质粒进行多配组转染试验,多温度、多时间节点追踪记录转染效率。28℃,以35 mm培养皿铺板,16μL Lipofectamine®2000和4μg DNA在转染后48 h达到最高转染效率(5.92±0.52)%;12μL FuGENE®HD和4μg DNA在转染72 h后转染效率达到(9.81±0.33)%。为验证该条件,构建一个鲤高不饱和脂肪酸合成相关转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体蛋白α(PPARα)的EGFP标签载体,该载体利用两种转染试剂分别获得了约4%和约8%的转染效率。以实时荧光定量PCR检测该转录因子对下游脂肪酸去饱和酶2(fads2)基因的转录调控效应,虽然两种转染试剂本身可导致下游基因的上调,但与空载质粒组相比,两种转染试剂高表达转录因子均对下游靶基因产生了转录激活效应。本试验获得了常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD在鲤上皮瘤细胞细胞转染时的最适转染试剂和DNA剂量和最优取样时间,并在一转录调控实例中进行了验证,试验结果为后续充分利用鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究提供了数据支持,有助于更好地服务于渔业种质资源育种创新。

2个鲤群体(Cyprinus carpio L.)表型生长性状的AI测量与手工测量的相关性分析

鱼类形态是人工育种、功能基因定位以及水产养殖和生态学研究的重要种群资源。鲤(Cyprinus carpio L.)是中国重要的养殖淡水鱼类之一,鲤的自然和人工选择导致不同品种间的表型极具多样性。近年来,随着成像技术、计算能力和硬件设备的飞速发展,基于机器视觉的无损测量方法逐渐成为一种高效、可重复批量检测鱼体的方法。本研究旨在检验AI测量对鱼类表型性状测量的准确性。本文选择了表型指数差异显著的元江鲤(Cyprinus carpio yuankiang)和金背鲤(Cyprinus carpio var.Jinbei)2个群体,共计204尾鱼进行研究。针对全长、体长、体高、体厚、头长、尾柄长、尾柄高、吻长、眼径和眼间距共10种线性、圆形和空间性状进行手工测量和AI测量,并进行了比较分析。其结果显示:(1)元江鲤和金背鲤2个群体中,针对10种表型性状的测量,相较于手工测量,AI测量结果整体偏大;在表型指数中,体宽指数(体厚/体长),头长指数(头长/体长)和尾鳍指数(尾柄长/体长)2种测量方法均无显著差异,而2种方法在体深指数(体高/体长)结果中,呈现显著差异。(2)元江鲤和金背鲤群体中,对2种测量方法进行相关性和一致性分析,发现针对全长、体长、体高、体厚、头长和眼间距共6种性状,2种方法呈现高度一致性(r>0.85);(3)2种测量方法重复性测量的一致性分析中,发现手工测量和AI测量均呈现较好的一致性(r>0.85),但手工测量的一致性要略高于AI测量。综上所述,AI测量准确度的提升能够加快全长等线性表型性状测量的工作效率和选择育种速度,但对于圆形和空间等表型性状测量的准确度,还需进一步提升。

居家环境下围产期抑郁早期预警的概念分析

本文采用Walker和Avant概念分析法系统分析居家环境下围产期抑郁早期预警的应用、定义属性、模型案例、前因、后果和测评指标,厘清了居家环境下围产期抑郁早期预警的概念内涵。结合国内围产期管理现状,归纳其定义属性,即本质上是对围产期妇女发生抑郁风险的预测与警报;目的是预防或降低抑郁的发生及其产生的危害;过程是基于围产期妇女的家庭成员支持、对围产期不同阶段的相关资料的全面收集、整理和分析;时间贯穿妇女怀孕后第一次接触产科保健服务至产后一年。目前,居家环境下围产期抑郁早期预警的相关研究还不够全面、深入,今后应进一步对该领域进行深层次、多方位探究。

协同理论在我国医疗服务领域应用的研究进展

协同理论作为一个研究复杂开放系统从无序到有序演化规律的综合性理论,近年来在医疗服务领域逐渐得到关注。本文从医疗服务质量管理、医联体发展、突发公共卫生事件应急管理、医疗保险、预防保健、养老服务6个方面对协同理论在我国医疗服务领域应用的研究进展进行概括和总结,以期为深化医疗服务协同体系、促进卫生事业高质量发展、切实满足人民健康需求提供理论参考。

宋代绘画与杭式极简生活美学的关联性研究

通过调查研究发现,宋代绘画艺术与杭式生活美学存在着对简约、平衡、自然以及情感表达等方面的共同追求。可以说,宋代绘画艺术不仅为杭式生活美学提供了审美范本,也为其提供了艺术表现的手段和精神内涵,是杭式诗意生活的体现和真实记录。从宋代绘画艺术中的价值内涵和美学表达展开,探析其与杭式极简生活美学的关联性,从中得到助益现代审美发展的启示。

个体化护理应用在胆结石手术护理中的效果评价

探讨在治疗胆结石病例期间使用手术方式以及术前护理、术中护理、术后护理等个体化护理干预所发挥的作用。方法 此次实验中,纳入了对象90例,确诊胆结石,所有患者实施手术治疗,在患者治疗完成后,分组进行护理,对照组45例开展常规护理,研究组45例开展的护理办法是个体化护理。结果:术后发生并发症的情况对比是研究组少于对照组,手术及康复时间体现为研究组短于对照组,术后疼痛分值对比是研究组低于对照组,生活质量对比是研究组高于对照组,不良情绪对比是研究组低于对照组,术前1d以及术后3d的BG明显更低,而CRP明显更高,护理质量对比是研究组高于对照组,P<0.05;对比两组入院时BG、CRP得出P>0.05。结论:在治疗胆结石病例期间使用手术方式以及术前护理、术中护理、术后护理等个体化护理干预所发挥的作用理想,值得临床推广。

探讨综合性护理在减轻肛瘘患者术后疼痛及尿潴留中的应用效果

目的探讨在肛瘘患者术后疼痛及尿潴留中应用综合性护理的减轻作用。方法选取我院80例肛瘘手术患者作为研究对象,将入选患者随机分成2组,观察组40例,对照组40例。对照组常规护理,观察组综合性护理。结果术后24 h、48 h、72 h,观察组VAS评分均低于对照组(P<0.05);观察组首次排尿、尿路刺激征、尿潴留、导尿情况均优于对照组(P<0.05);观察组排便异常1例,占2.5%;对照组排便异常7例,占17.5%;观察组排便异常率低于对照组(P<0.05)。结论在肛瘘患者术后疼痛及尿潴留中应用综合性护理的减轻作用显著,有效降低尿潴留、尿路刺激征、导尿及排便异常等情况的发生。

舒适护理在腹腔镜下小儿疝气手术中的应用效果

目的：对舒适护理在腹腔镜下小儿疝气手术中的应用效果进行分析和探讨。方法选取我院2015年2月～2016年3月收治的80例接受腹腔镜下疝气手术治疗的患儿，按照抽签法将患儿平均分为观察组和对照组，观察组患儿接受舒适护理，对照组患儿接受常规护理，比较两组患儿护理效果。结果观察组患儿并发症发生率为5.0%，低于对照组患儿的27.5%，患儿及患儿家属护理总满意率为95.0%，高于对照组患儿及患儿家属的75.0%，以上组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论舒适护理在腹腔镜下小儿疝气手术中的应用效果突出，可有效提高患儿护理满意度、降低并发症发生率。

基于直播效果的双渠道供应链定价决策研究

随着直播行业的兴起,直播带货逐渐受到供应商的广泛关注,这也导致直播渠道与传统线上渠道形成了竞争关系。为了缓和两种渠道冲突,研究考虑供应商同时具有传统线上渠道与直播渠道的双渠道供应链,引入主播的直播效果与佣金比例,建立供应商统一定价与不统一定价两种博弈模型,探讨不同定价方式下供应商的需求和收益的变化。研究得出以下结论 :1)不统一定价往往会更加提高主播的直播效果,并且供应商的需求和收益增长速度更快;2)供应商定价、需求和收益与直播渠道转换系数成正比,即在两种定价方式下,都会促进供应商的发展;3)直播渠道的定价并不会比传统线上渠道的定价更低,反而会高于传统线上渠道。

2015年华北地区上甸子大气本底站PM_(2.5)化学组分特征及来源分析

根据2015年上甸子区域大气本底站PM_(2.5)样品采集数据,分析PM_(2.5)质量浓度及其化学组分变化特征,应用质量闭合、后向轨迹、潜在源等方法分析其来源。结果表明:2015年上甸子站PM_(2.5)质量浓度年平均值为44.9μg·m^(-3),春季、夏季、秋季、冬季均值分别为58.1、30.9、39.7、51.3μg·m^(-3),与2009—2010年相比分别降低了33%、56%、46%、9%。SO_(4)^(2-)、NO-3和NH+4质量浓度年平均值分别为8.5±9.2、6.4±8.3、3.9±4.7μg·m^(-3),有机碳、元素碳浓度年平均值分别为8.9±6.3μg·m^(-3)、1.6±1.2μg·m^(-3)。NO_(3)^(-)与SO_(4)^(2-)浓度日均值的比值为0.82,大于2004年、2012年和2013年的观测结果。PM_(2.5)的主要组分为土壤、有机物、硫酸盐、硝酸盐,占比分别为34%、23%、22%、15%。与2004年相比,上甸子站PM_(2.5)中硫酸盐占比有所下降,土壤组分占比提高。上甸子站PM_(2.5)主要源自站点南部及西北部、北部等,河北省、山东省等地的区域传输对上甸子站高浓度PM_(2.5)存在较大影响。

食用菌菌糠饲料化及其他资源利用化研究进展

我国是食用菌生产大国,食用菌年产量超过1亿t。菌糠是食用菌收获后剩下的栽培基质,其中含有丰富的蛋白质、氨基酸、矿物质元素、维生素、纤维素及有机酸、微量元素等活性物质,如果不及时处理,将会造成严重的资源浪费和环境污染。因此,菌糠资源化利用是我国食用菌行业急需解决的问题。本文探讨菌糠饲料化及其他资源利用化的现状,以期为未来的研究提供有益的参考。

凡纳滨对虾Hox基因及其在早期发育中表达模式的研究

Hox基因是决定动物形态多样性的关键基因,同一类型Hox基因的同源异型结构域(Homeodomain)序列及其功能在进化上高度保守。甲壳动物是仅次于昆虫的第二大类节肢动物,但有关其Hox基因研究在深度和广度上都远远不如昆虫。本研究首先通过RNA-Seq测序技术和生物信息学方法分析发现在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中存在13种Hox基因,分别为Lvlab、Lvpb、Lvhox3、Lvdfd、Lvscr、Lvftz、Lvantp、Lvubx、LvabdA、LvabdB、Lvmsx、Lvmnx和Lvdll;然后根据RNA-Seq数据,克隆获得了这13条基因的开放阅读框(ORF)的cDNA序列,并对其序列结构、早期发育表达模式及同源关系进行了初步分析。序列分析显示这些Hox基因的结构非常保守,同源比对显示同一类型的Hox基因的氨基酸序列在不同物种之间具有较高的保守性;表达模式分析结果发现,不同Hox基因在早期发育过程中的表达模式不同,从囊胚期开始,按时序表达的先后顺序基本为Lvmsx、Lvlab、Lvpb、Lvhox3、Lvdfd、Lvscr、Lvftz、Lvmnx、Lvdll、Lvantp、Lvubx、LvabdA、LvabdB。根据各Hox基因表达时期对应的对虾胚胎和幼体发育情况,初步推测了这些基因在凡纳滨对虾的发育过程中可能的功能。

不同配比粉煤灰/聚丙烯复合材料的性能

采用熔融共混法制备了不同配比粉煤灰(FA)/聚丙烯(PP)复合材料,并对其抗静电性、热稳定性、结晶性能进行了分析。结果表明:FA能提高复合材料的抗静电性、热稳定性;加入少量FA对结晶有促进作用;当FA质量分数为15%时,复合材料具有最佳的综合性能,其表面电阻率、体积电阻率、热变形温度分别为2.04×1011Ω,1.46×1011Ω·cm,66.1℃。

围产期抑郁非药物干预方法的研究进展

围产期抑郁是一个重大的公共卫生问题,目前全球发病率仍呈上升趋势。围产期抑郁不仅严重危害围产期妇女自身的身心健康,还会通过代际效应危害其后代,进而对整个家庭、社会产生严重的远期影响。鉴于人群的特殊性,围产期抑郁的干预是临床医务人员面临的重大挑战,相对药物干预而言,诸多非药物干预方法突出了优越性。本研究从健康教育、心理干预、物理疗法、针灸及运动干预五个方面综述了围产期抑郁的非药物干预方法,旨在为临床医务人员选择适当的干预手段提供参考。

不同添加剂对和杂一代牛生产性能和肉品质的影响

试验研究不同添加剂对育肥和杂一代公牛(日本和牛×中国西门塔尔牛太行类群)生产性能和肉品质的影响。选择60头体质量(350±20)kg相似且健康的和杂一代牛,随机分成3组,每组20头。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别于基础日粮中添加Ⅰ号和Ⅱ号添加剂,进行为期90 d的育肥试验后屠宰测定。结果表明:试验组和对照组第一个月的平均日增质量无显著差异(P>0.05);育肥第三个月,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组日增质量达1.16和1.20 kg,比对照组提高12.62%和16.50%,差异显著(P<0.05)。从各试验组的屠宰性能各项指标可看出,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组屠宰率达58.62%和60.32%,比对照组分别提高14.42%和17.74%,差异显著(P<0.05);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组胴体产肉率及肉骨比都高于对照组,差异显著(P<0.05),试验Ⅰ组与试验Ⅱ组间差异不显著(P>0.05);从肉质指标可看出,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组眼肌面积、剪切力及大理石纹等级都优于对照组,差异显著(P<0.05),且试验Ⅰ组的剪切力和大理石纹等级均优于试验Ⅱ组,说明试验Ⅰ组在改善肉质方面比试验Ⅱ组更有效,因此,2种添加剂对肉牛的生产性能和肉品质都具有一定的调控作用,对促进育肥牛肌间脂肪的沉积有明显的效果,能改善肉品质,可应用于肉牛育肥生产。

聚丙烯抗静电改性的研究进展

综述了近年来国内外提高PP抗静电性能方法的研究进展,包括抗静电剂涂敷法、抗静电剂内加法、导电材料添加法、抗静电剂复合法。最后展望了PP抗静电改性的发展趋势。

上市公司发行可转债影响因素的实证研究

可转债、配股和增发已经成为上市公司再融资的三大方式,公司选择发行可转债受众多因素的影响,本文根据以前研究成果选择了资产负债率、公司规模、发行规模、第一大股东持股比例等因素运用logistic分析对可转债的发行进行实证研究,并根据研究结果给出相应的建议和对策。

背板式风冷机柜冷却能力分析

机柜级背板冷却在机柜内部解决散热问题,可以减少冷量浪费,极大提高制冷效率。为研究背板式风冷机柜在不同工况下的冷却能力,本文通过CFD模拟软件建立机柜模型,对机柜内的热环境进行模拟。结果表明:机柜内部气流组织良好,基本没有发生冷热气流掺混的现象。服务器温度随机柜循环风量的增大而减小,且降幅随着风量的增加而减小。随着进风温度的升高,服务器温度呈直线上升。当进风温度为18、20、22、24、26℃时,总循环风量在2400~3200 m^(3)/h范围内变化,42U机柜最高负载功率范围依次为11.7~15.0、11.2~14.5、10.8~14.0、10.3~13.4、9.8~12.7 kW。

临床教员队伍建设中存在的主要问题和解决对策

当前临床教员队伍建设中存在的主要问题有 :奉献精神不够、业务能力参差不齐、组织管理能力不强、在编教员不足、职称比例不合理等。作者从医院实际出发 ,提出要牢牢抓住政治思想建设不松手、积极优化队伍结构、进一步完善竞争激励机制、努力提高业务素质、实行“双师制”职称评定制度。

DNMT3B对人脐带间质干细胞成骨分化能力的影响

目的研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用。方法利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs)。在使用qPCR和免疫组织化学法确定DNMT3B表达缺失后,对hUMSCs进行骨生成定向诱导分化。并利用免疫组织化学法和茜素红染色评价突变型和野生型hUMSCs成骨能力差异。结果由RNA干扰获得的两株突变型hUMSCs中两株突变型中DNMT3B表达量分别下降至野生型hUMSCs的12.67±0.45%和35.60±0.76%(P<0.05)。而在DNMT3B突变型hUMSCs中间质干细胞标记物CD73和CD90基因mRNA的表达水平也分别下降(P<0.05)。CD73水平分别是野生型细胞的15.83±0.44%和16.60±0.37%(P<0.05);CD90的水平分别是野生型细胞的35.23±0.30%和58.64±0.71%(P<0.05)。在骨生成过程中,免疫组化染色后镜下比较显示DNMT3B突变型的细胞表达Osteocalcin较正常细胞低,qPCR结果表明RUNX2,IBSP和ALPL基因的mRNA表达量水平较正常细胞均明显下降(P<0.01),其中shD3B-1和shD3B-2的RUNX2基因表达水平分别为正常细胞的55.09±0.53%和53.77±0.47%(P<0.01);IBSP基因表达水平分别为正常细胞的53.21±0.81%和41.75±0.44%(P<0.01);ALPL基因表达水平分别为正常细胞的15.55±0.10%和17.86±24%(P<0.01)。同时茜素红染色检测也显示其成骨后细胞成骨功能减弱。结论 DNMT3B突变或缺失会导致hUMSCs骨生成能力下降。