抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎脑电图动态演变分析

目的探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体脑炎不同临床时期的脑电图(electroencephalographic,EEG)特征。方法纳入30例抗NMDA受体脑炎患者临床资料回顾性分析,共收集58份EEG资料,按临床病程分为早期(4份),高峰期(23份),好转期(16份),恢复期(15份);疾病高峰期按病情轻重分为轻症组(10例)、重症组(13例),分析病程不同时期、不同病情的EEG特点。结果病程早期及恢复期EEG枕区背景节律保留率为100%(19/19),高峰期为39.1%(9/23),好转期为81.2%(13/16)。全面性节律性δ活动(generalized rhythmic delta activity,GRDA)仅出现在疾病高峰期(34.8%,8/23)和好转期(12.5%,2/16)。疾病高峰期,轻症组EEG多数为弥漫性混合慢波(90%,9/10),重症组GRDA及极度δ刷(extreme delta brush,EDB)图形出现率高于轻症组(P<0.05)。疾病高峰期监测到局灶性癫痫发作3例,其中1例为癫痫持续状态。高峰期、好转期、恢复期均可监测到局灶性癫痫样放电。结论抗NMDA受体脑炎EEG枕区背景节律及GRDA图形随病程演变并逐渐恢复,疾病高峰期重症患者常出现GRAD和EDB图形,病程各期均可检出癫痫样放电,多为局灶性。

脑脊液寡克隆区带对多发性硬化的意义

目的探讨脑脊液寡克隆区带(oligoclonal bands,OCB)在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)中的意义。方法收集神经系统疾病患者895例,其中MS患者151例,视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)患者92例,其他神经系统脱髓鞘疾病(other demyelinating diseases,ODD)患者122例,其他神经系统炎性疾病(other inflammatory neurological diseases,IND)患者99例,神经系统非炎性疾病(noninflammatory neurologicaldiseases group,NIND)患者431例。检测所有患者的OCB、IgG指数及24hIgG合成率,比较各组OCB阳性、IgG指数及24hIgG合成率升高情况,并比较OCB阳性和阴性MS患者的主要临床特点。结果 OCB阳性率MS组为32.45%,NMO组为20.65%,ODD组为18.03%,IND组为16.16%,NIND组为2.09%;IgG指数升高比例MS组为29.8%,NMO组为17.39%,ODD组为16.39%,IND组为15.15%,NIND组为1.62%;24hIgG合成率升高比例MS组为30.46%,NMO组为18.48%,ODD组为18.85%,IND组为19.19%,NIND组为1.39%。OCB阳性率、IgG指数和24hIgG合成率升高比例MS组均高于其他各组(均P<0.05);NMO组与ODD组、IND组的OCB阳性率、IgG指数和24hIgG合成率升高比例无统计学差异(均P>0.05);MS组、NMO组、ODD组及IND组OCB阳性率均高于NIND组(均P=0.000)。OCB阳性MS患者的女性比例、EDSS评分、IgG指数和24hIgG合成率〔分别为女∶男2.5∶1、(4.10±1.49)、(0.81±0.31)、(4.98±3.35)〕均高于OCB阴性患者〔分别为女∶男1.17∶1、(3.47±1.39)、(0.51±0.17)、(3.37±3.20)〕(均P<0.05)。结论与其他中枢神经系统疾病相比,MS患者的OCB阳性率更高。OCB阳性MS患者的女性比例、EDSS评分、IgG指数和24hIgG合成率均高于OCB阴性患者。

首次检测水通道蛋白-4抗体阴性视神经脊髓炎谱系疾病的临床转归

目的分析水通道蛋白-4抗体(aquaporin-4 immunoglobulin G antibodies,AQP4-IgG)阴性的视神经脊髓炎谱系疾病(neuro myelitis optica spectrum disorder,NMOSD)患者临床特征、抗体演变以及转归。方法纳入中山大学附属第三医院神经科首次检测AQP4-IgG阴性的NMOSD患者15例,定期门诊随访,收集临床及实验室检查资料,分析其临床转归。结果15例AQP4-IgG阴性患者平均随诊67个月,以视神经炎(optic neuritis,ON)症状起病最多见(8例)。动态复查血清AQP4-IgG,其中4例(27%)由阴性转为阳性,2例血清不稀释处理时显示极低滴度(滴度为1:1)阳性,9例持续阴性。随访中,1例患者最终修正诊断为多发性硬化,4例诊断为AQP4-IgG阳性NMOSD。AQP4-IgG从阴性转变为阳性的时间节点临床可无复发(1例),但持续阴性患者也出现临床复发(3例)。结论AQP4-IgG阴性NMOSD患者最常累及视神经;临床随访中AQP4-IgG可能发生血清学转变,患者诊断及转归不同。

17β-雌二醇抑制星形胶质细胞趋化Th17细胞的机制

【目的】本研究旨在明确17β-E2能否通过阻断星形胶质细胞表达抗原提呈相关分子(MHCⅡ、CD80和CD86)和抑制细胞因子分泌,从而抑制其对Th17细胞的趋化作用。【方法】原代培养的小鼠星型胶质细胞分为5组:未处理组、IFN-γ(20 ng/mL)处理组、IFN-γ(20 ng/mL)+17β-E2(0.28 ng/mL)处理组、IFN-γ(20 ng/mL)+17β-E2(2.75 ng/mL)处理组和IFN-γ(20 ng/mL)+17β-E2(27.50 ng/mL)处理组。Western blotting检测未处理组和IFN-γ(20 ng/mL)处理组星形胶质细胞ERα和ERβ表达。免疫荧光检测各处理组星形胶质细胞MHCⅡ表达。流式细胞术检测各处理组星形胶质细胞MHCⅡ及协同刺激分子表达。ELISA检测各组星形胶质细胞分泌IL-17和TGF-β情况。趋化实验检测各处理组星形胶质细胞条件培养基体外趋化Th17细胞的能力。【结果】IFN-γ诱导星形胶质细胞ERα表达上调,对ERβ表达无明显影响。不同浓度17β-E2处理均明显降低星形胶质细胞MHCⅡ及协同刺激分子的表达。27.50 ng/mL浓度的17β-E2可抑制IFN-γ活化星形胶质细胞产生IL-17,而对TGF-β无明显影响。2.75 ng/mL浓度的17β-E2可抑制IFN-γ活化星形胶质细胞趋化Th17细胞。【结论】本研究的结果表明17β-E2可能部分通过抑制炎症活化的星形胶质细胞表达MHCⅡ、CD80、CD86及分泌炎性因子抑制对Th17细胞的趋化作用。

小鼠脑实质注射水通道蛋白4抗体所致的病理损伤

【目的】探讨小鼠脑实质注射视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者来源水通道蛋白4(AQP4)抗体(AQP4-IgG)造成的病理损伤,以及全身免疫状态对局部病灶的影响。【方法】于C57BL/6小鼠诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE),在发病高峰期脑实质局部注射AQP4-IgG阳性患者血清来源的IgG和健康人补体(hC)(EAE+AQP4-IgG+hC组,n=5),以单纯脑实质注射IgG和hC(AQP4-IgG+hC组,n=5)与EAE小鼠脑实质注射生理盐水(NS;EAE+NS组,n=5)为对照组。通过免疫荧光方法,比较3组病灶中AQP4、星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞髓鞘碱性蛋白(MBP),以及炎性细胞(T淋巴细胞、中性粒细胞和巨噬细胞)浸润等指标的异常。【结果】AQP4-IgG联合hC注射可以造成小鼠局灶性脑实质病理损伤,包括星形胶质细胞损伤,脱髓鞘以及炎性细胞浸润。与单纯AQP4-IgG+hC组相比,EAE+AQP4-IgG+hC组脑实质AQP4缺失面积(P=0.008)及GFAP缺失面积(P=0.016)显著增大,MBP缺失面积呈增大趋势;CD3+T细胞浸润的血管套数量、中性粒细胞浸润的血管套数量以及巨噬细胞浸润面积改变未达统计学差异。EAE+NS组亦可见注射周边星形胶质细胞增生,但无AQP4、GFAP与MBP缺失,炎性细胞主要分布在注射针道周围。【结论】小鼠脑实质注射AQP4-IgG联合hC可致显著局灶性病理损伤,而诱导EAE造成的全身免疫激活状态可加重该损伤;EAE联合AQP4-IgG局部注射能更好模拟NMOSD临床发病机制。

水通道蛋白4和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体阳性患者临床分析

目的分析中枢神经系统自身免疫相关性疾病患者中血清水通道蛋白4抗体(aquporin 4 antibody,AQP4-Ig G)和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(myelin oligodendrocytes glycoprotein antibody,MOG-Ig G)阳性患者比例;研究两组患者流行病学、临床表现及诊断、实验室检查和MRI影像,为临床诊断及鉴别诊断提供指导。方法纳入中山大学附属第三医院神经科及广州地区多个医疗中心收集的2068例患者。通过细胞间接免疫荧光法对患者血清AQP4-Ig G和MOG-Ig G检测,同时收集并分析比较两组抗体阳性患者临床资料。结果共检出AQP4-Ig G阳性患者681例,男女比例1:9.5,平均发病年龄为(41.7±14.9)岁;MOG-Ig G阳性患者110例,男女比例1:1.08,平均发病年龄为(27.0±17.7)岁,两组间性别分布及发病年龄差异有统计学意义。AQP4-Ig G阳性患者首发症状中视神经炎占38.4%;MOG-Ig G阳性患者中,视神经炎占53.5%。两组间临床表现差异有统计学意义。AQP4-Ig G阳性患者最终诊断为视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)占42.14%;MOG-Ig G阳性患者最终诊断NMO占13.64%,两组间差异存在统计学意义。脑脊液实验室检查显示,两组之间存在差异但差异均无统计学意义。MRI影像学显示,AQP4-Ig G阳性患者多以颈胸髓病灶多见,而MOG-Ig G阳性患者多累及胸腰髓。两组患者可合并其他自身免疫抗体阳性。结论本项研究发现AQP4-Ig G阳性与MOG-Ig G阳性患者在流行病学、临床表现及诊断、实验室检查和MRI影像存在差异,提示AQP4-Ig G阳性和MOG-Ig G两种自身免疫性抗体的检测对于诊断及鉴别诊断有重要意义。

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎与髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病并存的临床特征

【目的】探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎与髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体相关疾病并存患者的临床特征。【方法】回顾性分析2015年2月至2019年8月广东省中山大学附属第三医院神经内科和广州市妇女儿童医疗中心神经内科共同收治的36例抗NMDAR脑炎患者,其中17例为与MOG抗体相关疾病共存的并存组,19例为单纯抗NMDAR脑炎的对照组。分析总结两组患者的首发症状、影像学特征、实验室检查、治疗及预后情况。【结果】与对照组比较,并存组患者在发病性别方面男性多于女性,少合并卵巢畸胎瘤,部分患者首发症状表现为抗NMDAR脑炎不常见的脱髓鞘症状,脑脊液抗NMDAR抗体滴度波动在(1∶1~1∶100),血清MOG抗体滴度波动在(1∶25~1∶1280),病灶影像学不仅表现为累及皮质及皮质下,还表现为皮质下白质病灶或累及脊髓。从治疗及预后分析,两组患者经免疫治疗后症状均有改善,经3~50个月随访,并存组3例有复发,对照组1例有复发,均再次对免疫治疗反应良好。【结论】临床上抗NMDAR脑炎与MOG抗体相关疾病并存的患者在发病性别上以男性居多,成人多于儿童,合并肿瘤的情况少见,对免疫治疗反应良好,推测此类患者在免疫致病机制上具有相对的特异性。

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞病临床特征分析

目的探讨自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)星形胶质细胞病的临床特征。方法纳入多中心脑脊液检测GFAP-IgG证实为自身免疫性GFAP星型胶质细胞病患者15例,收集其临床及实验室检查资料,分析总结其临床特征和诊治。结果自身免疫性GFAP星形胶质细胞病首次发病年龄平均为39.73岁(4~65岁),性别无显著差异;临床表现中全脑症状如精神行为异常、意识障碍、痫性发作(50%以上),脑膜炎(66.7%),脊髓炎(53.3%),肢体震颤(53.3%),视力下降(33.3%),全身症状如发热(100.0%)和乏力(86.7%),其中46.7%的患者最初诊断考虑为结核性脑膜脑炎,予诊断性抗结核治疗。46.7%的患者MRI表现为典型的垂直于脑室的脑白质内血管周围线性放射性线样征。结论自身免疫性GFAP星形胶质细胞病常为急性或亚急性起病,临床表现多样,可表现为脑炎、脑膜炎、脊髓炎、视神经炎等,临床早期识别较困难,易误诊为结核性脑膜脑炎,诊断依赖于脑脊液抗GFAP抗体,且早期即可出现进展性意识障碍,危及生命。

MOG-IgG在补体参与下介导脱髓鞘损伤体外模型的建立及应用

目的通过建立髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病(MOGAD)体外脱髓鞘模型探讨MOGAD的发病机制并筛选疾病治疗药物。方法采用基于转染细胞的亲和层析方法纯化患者来源的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白自身抗体(MOG-IgG)。基于大鼠小脑切片和神经元-少突胶质细胞共培养的髓鞘模型,通过MOG-IgG和补体共同作用建立MOGAD体外脱髓鞘模型,将髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达量及与神经微丝蛋白(NF)共定位情况作为评估髓鞘形成和损伤的指标。分析多发性硬化促髓鞘再生药物在该模型中的髓鞘修复作用。结果应用转染细胞的亲和层析方法可获得高特异MOG-IgG。经抗体补体作用后,MOG-IgG组MBP表达水平降低(P=0.003),MBP-NF共定位程度降低(P<0.001)。经药物作用后,氯马斯汀组和多潘立酮组MBP表达水平上升(P=0.030,P=0.001),MBP-NF共定位程度增加(P均<0.001)。结论应用该法获得患者来源的高特异MOG-IgG在补体的参与下直接介导髓鞘损伤。氯马斯汀和多潘立酮在MOGAD体外脱髓鞘模型中能促进髓鞘再生。

急性脑梗死患者血浆同型半胱氨酸的水平及其临床意义

目的:观察急性脑梗死患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)的水平,探讨其与脑梗死OCSP分型间的关系及临床意义。方法:病例组选择本院神经内科住院的急性期脑梗死的病人130例,按照OCSP分型法将脑梗死组分为完全前循环梗死组(TACI组)、前循环梗死组(PACI组)、后循环梗死组(POCI组)、腔隙性梗死组(LACI组)。随机抽取同期我院正常体检者31例作对照组。测定所有人血浆Hcy的浓度进行统计。结果:脑梗死组患者血浆Hcy的水平明显高于对照组(P<0.05)。OCSP分型的各组Hcy水平在TACI有升高,其他各组间无明显差异。结论:急性脑梗死患者血浆Hcy的水平较对照组明显升高,其只在完全前循环梗死组有升高,在OCSP分型其余各组没有明显变化,说明Hcy可能遇梗死严重程度有关,与梗死位置无关。

AQP4基因多态性与NMO临床表型的相关性分析及功能研究

目的 探讨水通道蛋白4（AQP4）基因多态性与国人视神经脊髓炎（NMO）发病的遗传相关性及分子机制.方法 收集2010年1月至2014年1月在中山大学附属第三医院神经科就诊的血清AQP4抗体（NMO-IgG）阳性的NMO患者111例及NMO谱系疾病（NMOSD）患者97例和健康对照204名作为研究对象.首先,选择AQP4基因调控区的8个单核苷酸多态性位点（SNP）进行基因分型;之后,通过关联分析SNP基因基因型与NMO临床表型的相关性;最后,利用双荧光素酶检测技术验证3＇-非翻译区（3＇-UTR）SNP位点的碱基改变对小分子RNA （miRNA）调控作用的影响.结果 AQP4基因3 ＇-UTR区rs1058424的A/T基因型（50.61％比70.45％,OR=0.430,95％ CI 0.210～0.880）和rs3763043的C/T基因型（50.00％比68.18％,OR=0.467,95％ CI 0.231 ～0.994）与长节段脊髓炎,3＇-UTR区rs1058424的A/T基因型（46.72％比66.28％,OR=0.525,95％ CI0.276～0.999）、rs335929的A/C基因型（45.08％比58.14％,OR=0.527,95％ CI0.281 ～0.987）和启动子0区rs151244的C/T基因型（50.82％比69.77％,OR=0.450,95％ CI 0.230 ～0.881）与视神经炎,3＇-UTR区rs6508459及内含子区rs3763040基因型与合并系统性自身免疫性疾病存在相关性（P分别为0.012和0.023）;miRNA 323-3p对AQP4基因表达有调控作用,但3＇-UTR区rs1058424碱基改变并不影响miRNA 323-3p对AQP4基因的调控.结论 AQP4基因3＇-UTR区的SNP与国人NMO临床表型具有相关性.miRNA 323-3p可能通过与AQP4基因3＇-UTR区某一特定SNP位点结合起调节作用,从而参与NMO发病.

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病磁共振特征分析

目的探讨髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病(MOGAD)患者头颅和脊髓磁共振(MRI)病灶特征。方法回顾性分析2013年9月至2017年12月就诊于中山大学附属第三医院神经内科的49例MOG-IgG阳性患者头颅和脊髓MRI结果,并与同期58例水通道蛋白4(AQP4-IgG)阳性患者进行比较分析。结果两组患者头颅MRI检查出现异常病灶的比例差异无统计学意义(69.4%比65.5%,P=0.177),而AQP4-IgG组出现脊髓病灶的比例显著高于MOG-IgG组(84.5%比36.7%,P=0.001);MOG-IgG组出现皮质下白质病灶和大面积病灶的比例显著高于AQP4-IgG阳性组(48.9%比13.8%,P=0.003;46.9%比12.1%,P=0.000);AQP4-IgG组出现长节段横贯性脊髓病灶比例显著高于MOG-IgG组(70.7%比24.5%,P=0.002)。儿童组患者中,MOG-IgG头颅出现大面积病灶的比例明显高于AQP4-IgG组(76.9%比20.0%,P=0.047)。结论MOGAD患者头及脊髓MRI病灶广泛,与AQP4-IgG阳性患者有差异。

抗AQP4抗体对脑干临床孤立综合征转归的影响

目的研究抗水通道蛋白4（AQP4）抗体对以脑干损伤为首发表现的临床孤立综合征（CIS）患者疾病转归的影响。方法回顾性分析中山大学附属第三医院多发性硬化中心资料库自2006年7月至2010年12月登记的31例脑干临床孤立综合征（BCIS）患者的病例资料。根据血清抗AQP4抗体情况，将入组患者分为2组：抗AQP4抗体（＋）BCIS组（n=14）及抗AQP4抗体（-）BCIS组（n=17）。比较抗AQP4抗体（＋）BCIS组与抗AQP4抗体（-）BCIS组患者在临床症状、影像学、脑脊液等方面的异同点，分析2组患者临床转归的差异。结果31例入组患者平均随访（36.10±18.94）月，9例（64.29%）抗AQP4抗体（＋）BCIS组患者转化为视神经脊髓炎（NMO），而仅2例（11.76%）抗AQP4抗体（-）BCIS组患者转化为NMO，转化率差异有统计学意义（P〈0.05）。抗AQP4抗体（＋）BCIS组患者消化系统相关性脑干症状发生率（71.43% vs 23.53%）、脑脊液IgG指数（0.68±0.43 vs 0.47±0.19）、末次随访时的扩展残疾状况评分量表（EDSS）评分（4.64±0.92 vs 2.71±0.81）较抗AQP4抗体（-）BCIS组显著增高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。影像学方面：抗AQP4抗体（＋）BCIS组患者延髓病灶（78.57% vs 35.29%）及脑干背侧病灶（78.57% vs 41.17%）较抗AQP4抗体（-）BCIS组明显增多，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论血清抗AQP4抗体检测对预测BCIS的临床转归有一定价值。

视神经脊髓炎谱系疾病合并肾脏损害二例分析

视神经脊髓炎谱系疾病（neuromyelitisopiticaspectrumdisorder，NMOSD）是一种由B淋巴细胞介导、补体参与的中枢神经系统免疫相关性脱髓鞘疾病。以水通道蛋白4（aquapofin4，AQP4）-IgG抗体阳性为特征。NMOSD的主要临床表现为视神经、脊髓及延髓最后区受累。

脑脊液免疫球蛋白G寡克隆区带的实验室检测标准流程建立和一致性验证

目的旨在建立脑脊液寡克隆区带(OCB)检测标准流程(SOP),并验证不同实验室采用该SOP检测脑脊液OCB的一致性。方法通过启动脑脊液免疫球蛋白G寡克隆区带多中心临床研究("CNS-OCB")形成的多中心的SOP,选择国内具有代表性的三家研究型医院神经免疫实验室,采用商业化检测自动化操作系统与OCB试剂盒,采用美国病理学会(CAP)提供的质控品及Sebia医疗诊断器械(上海)有限公司提供的质控品进行各自的室内质控及相互比对。采用单中心重复实验获得可靠的检测稀释倍数参考范围。对17份血清和脑脊液配对样本进行检测。采用验视方法和Kappa检验或KendallW检验进行各中心室间一致性评价。结果单中心重复实验结果提示,2倍和4倍稀释度OCB检测结果均为阳性;64倍和128倍OCB检测结果均为阴性;8、16和32倍稀释度出现阳性/阴性不一致结果;增加重复次数后结果显示,16倍和32倍均为阴性结果;8倍为阴性(重复40次出现2次阳性,符合率为95%)。此外,多中心室间质评结果验视表明,三家中心检测一致率均为100%(Kappa值=1)。结论采用CNS-OCB研究形成的多中心的SOP来检测脑脊液OCB,具有良好的重复性和稳定性,可为国内医疗检测机构建立脑脊液OCB检测方法提供参考。