细菌表面展示纳米级白蛋白的实验研究

目的建立细菌表面展示纳米级白蛋白的体系。方法将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因sllB的3’端截短后与人血清白蛋白（human serum albumin，HSA）编码基因融合，5’端与链霉抗生物素蛋白（Strep—tagI）的编码基因连接，置于大肠杆菌中表达。用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS·PAGE）和蛋白质印迹法验证蛋白表达结果，并在透射电镜下测量表达产物的粒径。结果将合成的Strep—tagl／sllB1-2706bp／Gly4Ser／HSA融合基因片段测序验证后插入原核表达质粒pET28a（＋）。转化宿主菌E．coliB121诱导表达后，全蛋白和不溶性蛋白样品经SDS-PAGE鉴定，在相对分子质量约166000处出现特异性条带，蛋白质印迹法表明重组蛋白可与抗His—Tag单克隆抗体结合。透射电镜下可见B121表面有大量晶格结构，平均粒径142．3nm。结论将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因与HSA编码基因融合后进行原核表达获得了纳米级白蛋白，为采用基因工程方法生产纳米药物和疫苗提供了一条新途径。