苹果砧木矮化性评价指标的研究

研究了苹果砧木矮化性的评价指标,为苹果矮化砧木预选提供有效的筛选参数。利用石蜡切片法分析叶片的解剖结构,分光光度计法测定多酚氧化酶(PPO)活性、过氧化物酶(POD)活性和总酚含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定苹果砧木的内源激素水平,采用欧式聚类法综合评价与砧木矮化相关的各项指标。结果表明:生长势不同的苹果砧木在新梢生长量、叶片栅海比、POD酶活性、PPO酶活性、总酚含量和内源IAA和ABA激素水平在P<0.05差异显著。矮化砧木的新梢年均生长量((19.51±2.03)cm)、春季叶片总酚含量((9.23±0.29)mg/g)及韧皮部PPO酶活性、秋梢韧皮部的IAA含量((22.72±7.62)mg/g)和IAA/ABA的比值(0.18±0.05)均显著低于半矮化砧木和乔化砧木,随砧木矮化性增强而减小;而叶片栅/海比(1.15±0.12)、春季叶片POD酶活性、秋梢韧皮部ABA含量((118.21±13.85)mg/g)均显著高于半矮化砧木和乔化砧木,随砧木矮化性增强而升高。对各指标聚类分析表明:任何单一指标均不能有效地评价砧木的矮化性;苹果矮化砧木预选过程中,以"叶片的栅/海比>1"和"秋梢韧皮部的IAA/ABA值<1"双参数可以有效筛选矮化性强的砧木,再辅以"新梢生长量"和"叶片POD酶活性"指标,可以提高预选的准确性。

苹果品种和砧木组培苗对热处理脱毒的反应

通过不同的热处理方式并结合茎尖培养 ,比较了苹果品种和砧木组培苗对热处理脱毒的反应。实验结果表明 :不同苹果品种和砧木组培苗的耐热性不同 ,其中“富士”耐热性最强 ,小金海棠次之 ,“新红星”耐热性最差 ;变温热处理有利于延长苗木在处理期间的寿命 ,在 3种热处理时间下其死亡率均为 0 %。当茎尖在一定长度范围内 (约 1mm)时 ,茎尖成活率与试材、热处理方式、处理时间等无明显关系 ,而与培养温度等外界条件的关系密切。在相同处理条件下 ,不同试材其苹果潜隐病毒脱除率不同 ,小金海棠的脱毒率最高 ,“富士”次之 ,“新红星”第三 ;同时 ,不同病毒的被脱除率也不同 ,苹果褪绿叶斑病毒比苹果茎沟病毒更容易脱除。综合考虑苗木死亡率和脱毒率 ,对脱除小金海棠苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒 ,可采取 38℃恒温热处理 2 0d或 38 2 2℃变温处理 30d;对于“富士”,可采取 38℃恒温热处理 30d或 38 2 2℃变温处理30d以上 ;针对“新红星”耐热性差的特点 ,宜采用 38 2 2℃变温处理

检测禽白血病病毒抗原的琼扩试验与酶联免疫吸附试验的比较

以检测羽髓中禽白血病病毒抗原的琼扩试验(AD)与检测卵清和泄殖腔棉拭中禽白血病病毒抗原的酶联免疫吸附试验(ELISSA)对两群鸡进行对比试验表明,AD 阳性率为63%和35.5%,ELISA 阳性率为10%和6.5%,ELISA 从卵清和泄殖腔棉拭中各检出阳性鸡7只,两者都为阳性的仅1只鸡,各右6只为单阳性,而 AD 法可检出 ELISA 的全部阳性鸡。从 ELISA净化的无白血病鸡群中,用 AD 法检出5.6%和15%的阳性鸡。跟踪试验表现,AD 阳性鸡,在 ELISA 多次检查中逐渐显示阳性。用 AD 法和 ELISA 同时检查羽髓,阳性率分别为55.2%和74.8%。

珠美海棠MzWRKY基因家族盐胁迫应答模式研究

对苹果属植物现有的58个WRKY的EST序列进行分析,得到了37条uniESTs。珠美海棠(Malus zumi Mats)是耐盐的优良苹果砧木,能在土壤全盐含量为0.6%的盐碱地上存活。根据已知的37条uniESTs序列,通过半定量RT-PCR研究了珠美海棠中MzWRKY基因家族的盐应答模式。28个MzWRKY基因能检测到RT-PCR的产物,其中21个基因受盐诱导,1个受盐抑制。根据MzWRKY基因盐应答模式可将这些基因分为两组,基因表达模式的差异说明MzWRKY在珠美海棠的盐应答中角色的多样性。

蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27在葡萄胚性和非胚性愈伤组织中的差异表达

本研究通过对霞多丽葡萄花前约10d的花丝进行组培诱导,获得胚性和非胚性两种愈伤组织,分别进行继代、组织结构观察和体细胞胚的诱导验证。为研究两种愈伤组织对培养基中主要碳源蔗糖的利用特点,根据GenBank中的定位于细胞质膜的葡萄蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27的序列,设计了这两种蔗糖转运蛋白的PCR引物。以RNAplant试剂法,提取胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的RNA,进行半定量RT-PCR。研究表明,31个循环半定量RT-PCR结果中VvSUC12在胚性愈伤和非胚性愈伤中均有表达,且在非胚性愈伤组织中的表达水平稍高于胚性愈伤组织,表达差异未达到显著水平,VvSUC27的表达水平明显低于VvSUC12,且只在胚性愈伤组织中表达。提高至35个循环的半定量RT-PCR结果显示VvSUC27基因在非胚性愈伤组织中微弱表达,而在胚性愈伤组织中的表达强度较31个循环有所增加,且高于非胚性愈伤。