分子佐剂小鼠补体C3d基因的克隆与序列分析

目的 构建 C3d的真核表达质粒 ,以期将其作为分子佐剂 ,提高核酸疫苗的免疫效能。方法 采用PCR技术扩增小鼠补体 C3d基因 (897bp) ,并将其克隆至 p GEM- T载体上 ;经鉴定其 DNA序列正确 ;再将其亚克隆至真核表达载体 p VAX1上。结果 经 DNA测序证实了该克隆片段为小鼠补体 C3d基因 ,可进一步用于基因表达和基因治疗的研究。结论 构建了 C3d真核表达质粒 。

不同肾上腺素能受体阻滞剂对超压力负荷大鼠左室重构的影响

目的比较卡维地洛(CAR)、美托洛尔(MET)和特拉唑嗪(TER)对超压力负荷下心肌组织钙调神经磷酸酶(calc ineurin,CaN)通路的影响,并探讨CAR改善心肌重构的机制。方法以腹主动脉缩窄法建立大鼠超压力负荷模型。大鼠分为5组,每组10只,即手术组、CAR干预组、MET干预组、TER干预组及假手术组。采用免疫沉淀法检测左心室心肌组织中CaN、活化的T细胞核因子(NFAT3)、锌指转录因子(GATA4)的磷酸化及其蛋白的表达以及c-myc蛋白的表达。结果与假手术组相比,术后14 d,左室心肌明显肥厚,CaN、GATA4磷酸化增强、c-myc蛋白表达增加(P<0.01),NFAT3磷酸化减弱;CAR明显改善左室肥厚,MET次之,而TER的作用不明显。CAR干预组大鼠左室心肌中CaN、GATA4的磷酸化较手术组减弱,c-myc蛋白的表达较手术组减弱(P<0.01),MET次之(P<0.01),而TER作用不明显。结论CAR与MET均能明显改善左心室的肥厚,其作用机制可能与通过抑制了CaN信号通路进而抑制心肌肥厚的相关基因c-myc的表达有关。

美托洛尔对心力衰竭β受体相关信号通路及心功能的影响

目的探讨β1受体阻断药美托洛尔对慢性心力衰竭病人β受体相关信号通路及心功能的干预机制。方法选择慢性心功能不全病人95例,分为常规治疗组45例和美托洛尔治疗组50例,美托洛尔逐渐递增至最大剂量100mg,每日2次或最大耐受剂量,治疗6个月,复查彩色多普勒心动图,测定左心室舒张末内径、左心房内径、左心室射血分数和心胸比例,反转录聚合酶链反应检测血淋巴细胞β1受体、β2受体、β3受体mRNA表达,复查血浆环磷腺苷、环磷鸟苷、一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮含量。结果美托洛尔治疗组及常规治疗组治疗6个月,病人心功能明显改善,左心室射血分数升高。美托洛尔组心胸比例、左心室舒张末内径的和左心房内径明显减少,血浆环磷腺苷、环磷鸟苷、一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮含量明显降低。结论美托洛尔通过调节β受体相关信号通路,改善慢性心功能不全病人的心功能。

体检人群的癌胚抗原水平及其异常时间与肿瘤发病的相关性

目的探讨癌胚抗原(CEA)与肿瘤检出率之间的关系。方法回顾性分析连续4年的体检资料,统计CEA每年的变化情况及肿瘤确诊人数,并做相关的统计分析。结果在老年人群中,许多慢性良性疾病都可引起CEA水平异常升高,CEA阳性持续时间与肿瘤检出率呈正相关(r=0.918,P<0.05),CEA异常升高程度(浓度)与肿瘤检出率呈正相关(r=0.879,P<0.05)。结论受检者CEA持续性、进行性升高,其罹患肿瘤的概率会增高,有必要将CEA作为体检的常规检查项目,以提高早期肿瘤的检出率。

老年前列腺增生症与代谢综合征相关性分析

目的探讨老年良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia,BPH)与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的关系。方法回顾我院1601例军队离退休干部体检资料,均为男性,根据有无BPH分为BPH组1 230例和对照Ⅰ组371例;又根据有无MS分为MS组51 6例和对照Ⅱ组1085例,分别对2组进行比较。结果与对照Ⅰ组比较,BPH组体重指数、空腹血糖、舒张压明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析,体重指数、空腹血糖、舒张压升高是BPH的独立危险因素。与对照Ⅱ组比较,MS组体重指数、前列腺体积、下尿路症状评分明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论体重指数、高血糖和高血压是BPH的危险因素,MS是加重BPH患者下尿路症状的原因之一。

左氧氟沙星联合阿奇霉素治疗高龄难治性呼吸道感染的临床研究

目的评价左氧氟沙星联合阿奇霉素治疗高龄人群难治性呼吸道感染的疗效与安全性。方法对68例难治性细菌性呼吸道感染的高龄患者随机分为治疗组和对照组,治疗组34例给予左氧氟沙星联合阿奇霉素治疗;对照组34例给予左氧氟沙星治疗,两组总疗程皆为15 d。结果治疗组与对照组的有效率分别为64.71%和32.35%,呼吸道细菌清除率分别为76.19%和36.36%,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率皆低。结论左氧氟沙星联合阿奇霉素治疗高龄人群难治性呼吸道感染临床疗效优于单用可乐必妥,疗效确切而且安全。

丙泊酚与氯胺酮在小型猪血管介入手术麻醉中的应用

目的探讨小型猪在血管介入手术中的理想麻醉方法。方法将经皮肾交感神经射频消融术的贵州小型猪16只随机分为丙泊酚麻醉组和氯胺酮麻醉组,每组8只,在麻醉过程中记录诱导时间、麻醉维持时间和苏醒时间,并对动物的心率、血压、呼吸、体温进行监测。结果丙泊酚麻醉组诱导时间(2.83±0.59)min,麻醉维持时间(89.13±6.20)min,苏醒时间(29.88±4.82)min;氯胺酮麻醉组诱导时间(4.84±0.72)min,麻醉维持时间(76.50±6.12)min,苏醒时间(43.38±4.21)min。丙泊酚麻醉组对小型猪各项生理指标的影响小于氯胺酮麻醉组(均P<0.05)。结论丙泊酚和氯胺酮均可在小型猪血管介入手术中达到满意的麻醉效果,而丙泊酚略优于氯胺酮。

钙调神经磷酸酶信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制

目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制。方法:选择慢性风湿性二尖瓣病变接受二尖瓣置换术的充血性心力衰竭患者39例,分为心功能Ⅱ级组12例,心功能Ⅲ级组15例,心功能Ⅳ级组12例;正常对照组38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者,30例为健康体检者)。苏木素-依红染色检查心肌组织病理变化,免疫沉淀法测心肌组织CaN、活化T细胞核因子(NFAL)、锌指转录因子(GATA4)磷酸化及蛋白表达以及α-骨骼肌蛋白(α-skeletal-actin)表达,RT-PCR检测肌球蛋白重链信使核糖核酸(β-MHC mRNA)表达。结果:充血性心力衰竭患者心肌呈典型的重塑心肌的病理改变。充血性心力衰竭患者心肌组织CaN磷酸化、GATA4磷酸化、α-skeletal-actin蛋白表达及β-MHC tuRNA表达明显高于正常对照组,随心功能恶化,其表达逐渐增加(P <0．05或0．01);NFAT3磷酸化随心功能恶化而减弱(P<0．05或0．01)。结论:CaN信号通路在充血性心力衰竭患者心肌重塑机制中可能起着重要的作用。

别嘌呤醇对老年糖尿病肾病早期合并高尿酸血症患者肾功能的影响

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病严重的微血管并发症之一,约有35%的糖尿病患者发展成为DN,目前DN已经成为糖尿病患者致残致死的重要原因。许多流行病学调查和动物研究显示糖尿病患者合并有高尿酸血症（hyperuricemia,HU）,尿酸可直接使肾小球入球小动脉发生微血管病变,导致慢性肾脏疾病[1]。

三维适形放疗联合胸腺五肽治疗老年晚期非小细胞肺癌

目的：观察三维适形放疗(3 DCRT)联合胸腺肽治疗老年非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应。方法：将42例老年NSCLC患者随机分为治疗组和对照组。对照组21例,予3 DCRT,剂量2 Gy/次,5次/周,共35次,总剂量70Gy。治疗组21例,在3 DCRT治疗基础上加用胸腺肽治疗。按WHO实体瘤近期疗效评价标准分为CR、PR、NC和PD。观察两组疗效及不良反应。结果：两组有效率(CR+PR)经统计学处理差异无显著性(P＞0．05)。治疗组患者的临床症状改善率明显高于对照组(P＜0．05)。治疗组放射性肺炎、放射性食管炎发生率明显低于对照组(P＜0．05)。结论：3 DCRT联合胸腺肽治疗老年NSCLC临床疗效好,不良反应小,有临床应用价值。

替吉奥联合香菇多糖治疗老年胃癌临床观察

目的观察替吉奥联合香菇多糖治疗老年胃癌的疗效。方法选择＆gt;70岁的老年进展期胃癌患者27例,给予S-1（替吉奥）40～60 mg/m2口服,服药7 d后休息7 d,28 d为一个周期;香菇多糖2 mg静滴,2次/w;共用6个周期。结果全组患者均可评价疗效,部分缓解（PR）3例（11.11%）,病变稳定（SD）17例（63.96%）,进展（PD）7例（25.93%）,临床受益率（DCR）为75%;无进展生存时间（PFS）5.8个月（95%可信区间3.7～7.9）,总生存时间（OS）为11.8个月（95%可信区间6.1～17.5）。主要不良反应有贫血11例、白细胞减低8例、食欲下降13例和乏力6例,未影响治疗。结论替吉奥联合香菇多糖治疗老年胃癌疗效确切,耐受性良好,值得推广和进一步研究。

11,12-表氧化二十碳三烯酸对COPD大鼠气道平滑肌细胞钙激活性钾通道的作用

目的观察COPD大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)的钙激活性钾通道(KCa)的活性变化,以及11,12表-氧化二十碳三烯酸(11,12-EETs)对气道平滑肌细胞KCa的作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和COPD组,每组20只。在相对密闭舱内吸入纸烟建立COPD动物模型,采用急性酶分离法分离大鼠ASMCs,应用膜片钳技术,分离出KCa电流,测定KCa开放概率(Po)、平均开放时间(To)和平均关闭时间(Tc)。比较COPD组和正常对照组KCa上述活性指标的变化,以及应用3μmol/L的11,12-EETs对COPD组ASMCs细胞进行灌流后KCa活性的变化。结果与正常对照组比较,COPD组ASMCs的KCa通道Po明显降低(0.084±0.028比0.198±0.029,P<0.01),To显著缩短[(0.732±0.058)m s比(1.648±0.152)m s,P<0.01],Tc显著延长[(12.259±2.612)m s比(6.753±1.237)m s,P<0.01]。而用11,12-EETs灌流ASMCs细胞后可明显激活KCa活性,Po增加(0.227±0.059比0.084±0.028,P<0.01),To延长[(2.068±0.064)m s比(0.732±0.058)m s,P<0.01],Tc缩短[(4.273±0.978)m s比(12.259±2.612)m s,P<0.01]。结论COPD大鼠ASMCs细胞KCa通道活性降低可能在COPD发病机制中起着一定作用,11,12-EETs可以直接激活COPD大鼠ASMCs细胞KCa活性,提高膜电位稳定性,从而松弛COPD大鼠气道平滑肌。

成都地区1597例军队男性中老年干部体检心电图分析

目的评估成都地区军队男性中老年干部心电图异常发生情况。方法在安静状态下,使用12导联心电图记录仪,采集1597例男性中老年干部心电图结果。结果正常心电图777例,异常心电图例820,其中ST-T改变149例(9.32%),Ⅰ度房室传导阻滞82例(5.13%),窦性心动过缓198例(12.39%),束支传导阻滞270例(16.91%),房性早搏40例(2.50%),室性早搏56例(3.50%),心房纤颤35例(2.19%),心房扑动3例(0.18%),陈旧性心肌梗死17例(1.06%),左室高电压11例(0.68%),电轴左偏34例(2.12%),安置心脏起搏器44例(2.75%)。结论成都地区军队男性中老年干部人群中,异常心电图的发生率较高,有必要加强心血管疾病的预防。

钙蛋白酶调节致心肌细胞肥大的信号转导

目的:探讨钙敏感的calpain对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的致心肌细胞肥大的钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路的调节。方法:原代培养的乳鼠心肌细胞为模型,AngⅡ刺激细胞Ca2+内流和(或)内贮细胞Ca2+释放,[3H]-Leu掺入法反映心肌细胞蛋白合成速率,Fura-2/AM比率荧光成像分析细胞内钙信号变化,免疫印迹检测心肌细胞μ-calpain、m-calpain、CaN磷酸化及蛋白表达。结果:AngⅡ呈浓度依赖性(10-8-10-5mol.L-1)促心肌细胞[Ca2+]i增加,各刺激组[Ca2+]i与对照组差异显著(P<0.01或P<0.05)。AngⅡ(10-7mol.L-1)剌激心肌细胞15min后,μ-calpain的磷酸化明显增加,但其蛋白表达量无显著改变(P>0.05),m-calpain蛋白表达及磷酸化量显著差异,CaN的蛋白表达量无显著改变,但其磷酸化增强,环孢素A(CsA)抑制CaN的磷酸化。AngⅡ可使无血清培养新生大鼠心肌细胞[3H]-Leu掺入率随时间增加而增加,与对照组差异显著(P<0.01或P<0.05),且在10-8-10-5mol.L-1范围内呈量效依赖关系。结论:AngⅡ剌激细胞外Ca2+跨膜内流和(或)内贮Ca2+的释放导致μ-calpain的激活,进一步激活钙敏感的CaN信号通路,在心肌肥厚的病理过程中起重要作用。

二氯醋酸钠对模拟高原肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5亚型的作用研究

目的研究电压门控性钾通道亚型(Kv1.5)在高原低压低氧性肺动脉高压中的作用,观察二氯醋酸钠(DCA)对高原低压低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉平滑肌细胞(PASMCs)电压门控性钾通道Kv1.5亚型基因表达的影响和肺动脉高压的降压作用。方法24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组,8只)、高原低压低氧组(HA组,8只)及DCA干预组(DCA组,8只)。N组置于平原处室内喂养,HA组和DCA组均同时置于模拟的海拔5000m高原环境,DCA组大鼠予以DCA70mg·kg-1·d-1灌胃。21d后测量三组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、肺小动脉平滑肌和心脏壁厚度,用荧光定量PCR法检测三组大鼠PASMCs Kv1.5 mRNA,免疫组织化学和免疫印迹法观察大鼠PASMCsKv1.5蛋白的表达。结果模拟高原5000m21d后,HA组大鼠mPAP明显高于N组(P<0.01),其肺小动脉管壁增厚,管腔狭窄,表现为管壁厚度占外径的百分比(WT%)、管壁面积占总面积的百分比(WA%)和右心室与左心室加室间隔之比(RV/LV+S)较N组明显升高(P均<0.01)。与HA组相比,DCA组mPAP则明显降低(P<0.01),表现血管重构减弱,WT%和WA%明显下降(P<0.01),RV/LV+S下降(P<0.01)。HA组Kv1.5 mRNA明显低于N组(P<0.01),DCA组Kv1.5 mRNA则明显恢复表达(P<0.01)。HA组肺小动脉壁Kv1.5平均光密度低于N组(P<0.01),DCA组则明显高于HA组(P<0.01)。蛋白表达呈现相似结果。结论高原低压低氧性大鼠PASMCs Kv1.5表达明显受到抑制,DCA具有恢复Kv1.5表达、阻止肺小动脉重塑及降低肺动脉压的作用。

衰老相关基因Klotho在小鼠心脏表达的增龄性变化

目的通过观察昆明小鼠心脏发育过程中Klotho基因的定位及其表达。方法新生1、180、540 d昆明小鼠各5只,断颈处死,分别取出肾脏和心脏,并将心脏的右心房部分剪下;1、2、4、7、15、30、60、120、180、270、360 d和540 d昆明小鼠各10只,断颈处死后取出心脏组织;以上均提取总RNA,应用荧光定量RT-PCR技术检测Klotho mRNA的表达。结果切除右心房的心脏组织,未能检测到Klotho mRNA的表达,肾脏和右心房存在表达;昆明小鼠出生后即可在心脏检测到Klotho mRNA的表达,1、2、4、7、15、30、60、120 d小鼠相对表达量基本呈上升趋势;270、360、540 d小鼠相对表达量基本呈下降趋势。结论 Klotho基因在昆明小鼠的心脏组织中可能仅在右心房表达;120 d之内,Klotho基因在心脏组织的表达量有随增龄而增加的趋势;270 d之后,Klotho基因在心脏组织的表达量有随增龄而减弱的趋势。

汶川地震后军队住院高龄老干部创伤后应激障碍调查

目的调查汶川地震后军队高龄老干部创伤后应激障碍(PTSD)发生情况及特点。方法采用PTSD诊断工具、症状自评量表(SCL-90),在震后第30天对170名亲历地震的军队住院老干部进行评估。结果根据DSM-Ⅳ诊断标准,震后第30天有20.59%的老干部发生PTSD;PTSD患者年龄与非PTSD组患者年龄相比,明显较大(P<0.05);PTSD组患者的躯体化、焦虑、抑郁因子分均显著高于非PTSD组(P<0.01)。结论地震后1个月,军队老干部PTSD的发生率是20.59%,PTSD组老干部平均年龄比非PTSD组明显更大。有必要主动对受灾老干部进行精神心理干预。

金纳多注射液治疗冠心病心绞痛的临床观察

目的:观察金纳多注射液治疗心绞痛的临床疗效。方法:选择心绞痛患者126例,随机分为金纳多注射液(治疗组)64例和复方丹参注射液(对照组)62例进行临床观察。结果:治疗组总有效率93．75％,对照组总有效率75．80％,两组总有效率差异有显著性(P<0．05)。结论:金纳多注射液治疗冠心病心绞痛的疗效明显优于复方丹参注射液。

μ-和δ-阿片受体对神经元树突棘可塑性调节的动态观察

目的探讨μ阿片（MOR）和δ阿片受体（DOR）在海马神经元树突棘可塑性调节中的功能角色。方法用磷酸钙共沉淀法将编码绿色荧光蛋白EGFP的质粒转染到5-9D IV原代培养海马神经元,EGFP标记的神经元发育到2周时,随机挑选形态健康的神经元作为观察目标,使用倒置荧光显微镜对同一视野活细胞定时定位观察MOR受体促进剂吗啡和DOR受体促进剂DPDPE给药前及给药后3 h、24 h、72h树突棘形态大小及密度变化。结果1.吗啡组和吗啡＋DPDPE组,从形态学观察,部分树突棘在给药后24-72h内逐渐变小,甚至消失;2.吗啡组加药后3 h树突棘的密度无明显变化（P〉0.05）,24 h后降低了28%,72 h后降低了37%（P〈0.01）;吗啡＋DPDPE组加药后3 h树突棘的密度无明显变化（P〉0.05）,24h后降低了27%（P〈0.05）,72 h后降低了38%（P〈0.01）;DPDPE组和对照组在给药后3-72 h树突棘的密度无明显变化（P〉0.05）;而DPDPE单独给药组和对照组神经元树突棘形态大小、密度在各时间点均无明显变化。结论本实验表明阿片MOR受体参与了神经元树突棘可塑性的调节,动摇了树突棘的稳定性,而DOR受体无显著作用,同时MOR和DOR受体在对神经元可塑性调节方面也无协同作用。