毛细管电泳指纹图谱及毛细管电泳-质谱联用在中药质量控制中的作用

以作者多年从事毛细管电泳、毛细管电泳-质谱联用及其指纹图谱对中药的研究成果为基础,介绍了毛细管电泳实验条件的优化方法、毛细管电泳指纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药质量控制中的作用。

鸦胆子抗肿瘤的研究(第四报)——脱酯鸦胆子油的气相色谱—质谱分析

将鸦胆子油中的三油酸甘油酯用柱层析法除去,剩余部分称为脱酯鸦胆子油。脱酯鸦胆子油甲酯化后所得甲酯化物经用气-质联用仪定性分析和气相色谱法定量分析;油中含有软脂酸(palmitic acid)、硬脂酸(stearic acid)、亚油酸(linoleic acid)、十七碳烷酸(heptadecoicacid)及花生酸(arachidic acid)。还可能含有豆蔻酸、廿碳烯酸(n-eicosenoic acid),但尚需进一步证明。

用流动注射法测定肾上腺素盐类注射液的含量

《中国药典1985年版》用旋光法测定肾上腺素盐类注射液的含量,样品前处理繁杂,检测灵敏度低,是其缺点。流动注射分析法是利用肾上腺素的酚羟基与FeCl_3的不稳定显色反应,用均匀设计法确定分析条件。以720nm为检测波长,用0.2%FeCl_3为载流,用单流路分光光度流动注射分析装置,测定酒石酸肾上腺素的含量。样品含量与峰高有很好的相关性(回归方程式的相关系数r=0.9998);精密度RSD<1%(n=10);回收率为99.2%;采样速度为240个/h.实验证明本法简便(样品只需稀释,勿需其它前处理),快速,精密度及准确度均合乎要求。本法比旋光法可提高分析速度数十倍。

苦参生物成碱的二维核磁共振谱(2D—NMR)研究——Ⅰ.中国东北产苦参中的N-甲基金雀儿碱与氧化槐根碱的2D—NMR研究(英文)

由我国东北产的苦参中分离出七种生物碱。由MS、IR及2D-NMR鉴定为:(+)-苦参碱、(+)-氧化苦参碱、5α-羟基苦参碱、N-甲基金雀儿碱、9α-羟基苦参碱及氧化槐根碱。另一个生物碱(6)的化学结构尚在鉴定之中。本课题采用了二种2D-NMR技术,H-H相关谱(300、400及500MHz)及C-H相关谱(H:300MHz;C:75MHz)。先发表其中两个生物碱的2D-NMR,其它将陆续发表。

双定性双定量相似度法评价银杏达莫注射液的高效液相色谱指纹图谱

建立了色谱指纹图谱的双定性双定量相似度评价法,并应用于银杏达莫注射液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的评价。采用反相HPLC,以芦丁为参照物峰,确定了41个共有峰,建立了银杏达莫注射液的对照指纹图谱。以双定性相似度S和S′、双定量相似度C和P评价银杏达莫注射液的HPLC指纹图谱,分别考察在大峰缺失和小峰缺失两种情况下,4个相似度指标的变化特征。S能反映化学成分的分布比例,受大峰影响严重,无法反映小峰的丢失;S′对所有指纹峰等权,反映小峰缺失灵敏,二者构成双定性相似度。C能反映样品共有峰的总体含量,但受大峰影响严重,无法反映小峰的缺失;P对所有峰积分值等权,能较好地反映小峰的变动,二者构成双定量相似度。因此,由S与S′、C与P构成的双定性双定量相似度法能同时监测大峰和小峰的变动与缺失,能准确地解决色谱指纹图谱的宏观定性和定量评价问题。同时还提出了方向余弦作为对照指纹图谱的特征指纹的概念和分解相似度的概念,以此考察了各指纹峰对相似度贡献的大小及其在不同程度缺失时4种相似度的变化情况。所建立的HPLC对照指纹图谱可用于银杏达莫注射液的质量控制。

色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度的比较研究

以药材栀子为例,对中药色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度的宏观评价方法进行比较研究。用栀子对照药材和不同产地的栀子药材的HPLC指纹图谱实验结果,分别从化学成分分布相似性和含量相似性两个方面评价各产地药材与对照指纹图谱的相似性。以对照药材供试液不同进样量时获得的数据比较定性和定量相似度差异。提出了指纹图谱比率定性相似度SF′,投影含量相似度C%、定量相似度P%和平均质量百分数M%等一系列概念。结果显示,表征化学成分分布相似性的定性相似度不能揭示含量性质,只有在定性相似度合格基础上,定量相似度合格的药材才能满足生产和实际需要。可见,定性相似度和定量相似度的密切结合是用指纹图谱宏观控制药材质量的最佳方法。

中药色谱指纹图谱潜信息特征判据研究

目的对中药色谱指纹图谱潜信息特征进行判据研究,用F和I等37个指标揭示色谱指纹图谱的潜信息特征。方法用银杏叶提取物(GBE)、银杏达莫注射液(GLED I)和苦碟子(ISH)与苦碟子注射液(ISH I)的HPLC指纹图谱进行比较研究。结果从积分信号强度、信号均化程度、分离度、指纹信息量等多方面综合评价出GBE指纹图谱好于GLED I,ISH指纹图谱好于ISH I,GBE与ISH指纹图谱基本相当。结论F和I等37个指标可客观、真实、全面地揭示中药指纹图谱的潜信息特征。

大青叶的毛细管电泳指纹图谱研究

采用高效毛细管电泳法,紫外检测波长228nm,电压12.5kV,以硼酸(100mmol/L)硼砂(50mmol/L)=11∶10(调pH11)为背景电解质进行指纹图谱研究。建立了大青叶药材的电泳指纹图谱(CEFP)。以胞苷峰为参照物峰,确定了18个共有峰,测定了10个产地大青叶的CEFP与共有模式间具有良好的相似性,用色谱指纹图谱指数对其进行评价。所建立的CEFP具有较好的重现性,可用于大青叶药材的质量控制。

金银花的毛细管电泳指纹图谱研究

采用毛细管区带电泳法，以50mmol／L硼砂（含20mmol／L β-环糊精（CD），用磷酸调pH8．0）为背景电解质，运行电压12kV，紫外检测波长254nm，重力进样15 s（高度8．5cm），建市了金银花药材水提取液的毛细管电泳指纹图谱（CEFP）。将13个不同产地的金银花药材供试液的CEFP进行比较，以电泳峰出现率100％计，确定金银花的共有指纹峰为18个。该CEFP具有较好的精密度和重现性，分离效能高且成本低廉。提出了指纹图谱宏观含量相似度R、投影含量相似度C和定量相似度P的概念，可从总体上评价药材化学组分的整体含量情况。从两个方面评价各产地药材与对照CEFP间的总体相似性，合格药材应具备以下两个条件：（1）代表化学成分分布相似性的定性相似度（S）≥0．90；（2）描述药材整体化学成分含量的定量相似度（R，C，P，Q）应在80％～120％。以此二类相似度指标控制金银花的质量，建立了指纹图谱评价的又一新方法。

色谱指纹图谱指数F和相对指数Fr的研究

目的 提出色谱指纹图谱指数 (F)和相对指数 (Fr)概念 ,用F和Fr揭示中药色谱指纹图谱信息的丰富程度和分离情况 ,反映指纹信号强度的大小和均化程度。方法 用HPLC和HPCE指纹图谱实验结果进行应用研究。结果 评价了射干抗病毒注射液及其各单味药材的指纹图谱结果 ,并对文献中丹参HPLC指纹图谱进行了评价。当评价中药毛细管电泳指纹图谱时 ,其F无显著差别 ,但Fr是HPLC法的 10 0 0倍之上。结论 F与Fr可客观、全面、简便地用于评价色谱指纹图谱。

连翘的毛细管电泳指纹图谱研究

采用毛细管区带电泳法，以75mmol／L硼砂溶液（用0．1mmol／L氢氧化钠溶液调pH9．7）为背景电解质，运行电压14kV，检测波长228nm，重力进样15s（高度9cm），建立了连翘药材的毛细管电泳指纹图谱（CEFP）。将10个不同产地的连翘药材进行比较，按各电泳峰共有率fi≥70％作为选择电泳指纹峰的依据，确定连翘的毛细管电泳指纹峰为29个。在方法的精密度和重复性试验中，各指纹峰的相对迁移时间的相对标准偏差（RSD）不大于5％，相对峰面积的RSD约为2％～15％。10个产地的连翘药材的CEFP与其对照CEFP的相似度均不低于0．94。同时，采用指纹图谱信息量指数I和相对信息量指数Ir评价了10个产地连翘药材的质量差异。

射干的毛细管电泳指纹图谱研究

采用毛细管区带电泳法,以80mmol/L硼酸 15mmol/L硼砂缓冲液(用氢氧化钾溶液调pH9 7)为背景电解质,运行电压12 1kV,检测波长228nm,重力进样10s(高度7cm),建立了射干药材的毛细管电泳指纹图谱(CEFP)。标定CE指纹峰为21个,方法的精密度和重现性较好,相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)不大于3 5%,相对峰面积的RSD约为5 0%,10个产地样品的CEFP与标准CEFP的相似度为0 913～0 993。同时,对指纹图谱中各指纹峰确立的方法和各组分含量情况的评价方法进行了初步探讨。

苦碟子注射液毛细管电泳指纹图谱

目的建立苦碟子注射液的毛细管电泳指纹图谱(CEFP),为苦碟子注射液的质量控制提供新方法。方法采用高效毛细管电泳法,紫外检测波长242 nm,电压为12.5 kV,以硼砂(75 mmol.L-1,调pH值为9.52)为背景电解质进行指纹图谱研究。结果建立了苦碟子注射液CEFP,以腺苷峰为参照物峰,确定了24个共有峰,测定11批苦碟子注射液CEFP与共有模式间具有良好的相似性,以相似度和色谱指纹图谱信息量指数对其进行评价。结论所建立的CEFP具有较好的精密度和重现性,对苦碟子注射液的质量控制提供了新方法。

常见毒品的毛细管电泳分析

系统地研究了毛细管电泳分析中各种因素对常见毒品混合物分析的影响，用均匀设计确定了适用几类毒品分离分析的最佳电泳条件。并采用固相提取技术、毛细管区带电泳检测方法对血和尿生物检材中的冰毒、吗啡、单乙酰吗啡、可待因、海洛因等毒品进行了测定。通过对各种提取剂回收率的测定，认为ＧＤＸ３０１和反相Ｃ１８提取效果较好；并考察了几种毒品的线性关系、最小检测量等。

毛细管区带电泳法测定板蓝根注射液中四种核苷的含量

采用毛细管区带电泳法测定了板蓝根注射液中胞苷、腺苷、鸟苷和尿苷的含量。电泳条件:采用未涂层石英毛细管(32 5cm×50μmi d ,有效长度23 5cm),以60mmol/L硼砂溶液 10%(体积分数)异丙醇 20%(体积分数)乙腈为运行缓冲液,在25℃下以20kV恒压电泳分离,压力进样(1kPa×10s),检测波长254nm。对电泳条件各因素进行了讨论,如缓冲液的种类、浓度和pH值,有机改性剂的种类和浓度,分离电压和毛细管温度等。样品经0 45μm微孔滤膜过滤后直接进样;采用外标法峰面积定量。上述4种核苷回归曲线的相关系数均在0 9991以上,线性范围12 5～250mg/L,检出限分别为6 2(胞苷)、4 6(腺苷)、6 7(鸟苷)、9 0(尿苷)mg/L。4种核苷的三水平加样回收率为95 1%～102 3%,相对标准偏差(RSD)为0 3%～4 9%。方法简便快速,重现性和准确度令人满意,可作为控制板蓝根注射液中核苷类成分含量的有效方法。

RP-HPLC法测定板蓝根药材中核苷类成分的含量

目的:建立了中药材板蓝根中尿苷、腺苷和鸟苷的反相高效液相色谱含量测定方法。方法:采用 Agilent ZORBAX SB-C_(18)分析柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为10mmoL·L^(-1)磷酸二氢钠(1%磷酸调 pH 2.9)-甲醇(3:97);柱温25℃;流速0.8mL·min^(-1);检测波长254nm。结果:尿苷、腺苷和鸟苷的线性范围分别为10.7～107.0,10.1～101.1,10.6～106.0μg·mL^(-1);相关系数分别为0.9996,0.9996,0.9995。平均回收率(n=3)分别为97.2%,101.6%,97.3%;RSD 分别为1.1%,3.3%,1.2%。结论:采用反相高效液相色谱法同时测定板蓝根中尿苷、腺苷和鸟苷3种成分的含量,方法简便、快速、准确,结果可靠。

毛细管区带电泳法测定复方甘草片中的甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠

在紫外检测波长为 2 2 8nm、电压为 14kV、背景电解质为 5 0mmol/L硼砂溶液、内标为氢氯噻嗪的条件下 ,用毛细管区带电泳法对复方甘草片中的甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠进行了定量分析。结果甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠的相对峰面积 (组分与内标的峰面积之比 )与各自的质量浓度之间呈良好的线性关系 ,上述 4种组分的平均回收率分别为 98 2 % ,97 3% ,97 1%和 97 5 %。方法简便、快速、准确。

板蓝根化学成分、药理及质量控制研究进展

目的对板蓝根各方面研究进展进行综述。方法按照化学成分、药理作用、质量控制方法、制剂工艺将文献分类综述。结果与结论板蓝根具有抗菌、抗病毒、促进免疫的作用 。