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题名抑制HBV核心启动子转录活性的化合物筛选与鉴定
被引量:1
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作者
孙瑜雪
魏霞飞
李杰
崔静
王瑜伟
胡接力
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机构
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
重庆市中医院检验科
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第13期1192-1203,共12页
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基金
国家自然科学基金面上项目(81871635)
重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0764)
成都中医药大学杏林学者研究基金(YYZX2019067)。
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文摘
目的构建靶向核心启动子转录的稳定细胞系,筛选影响乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的药物。方法利用HepG2细胞,以重组慢病毒的方式构建由HBV核心启动子驱动的Gaussia荧光素酶稳定表达细胞系(HepG2-Pcore-Gluc)。通过检测荧光素酶活性来反映核心启动子的活性变化情况。在HBV复制细胞模型中,通过Southern blot、荧光定量PCR等进一步评估经多轮筛选得到的化合物对HBV RNA、HBV DNA的影响。结果利用HepG2-Pcore-Gluc细胞模型筛选1450种小分子化合物,第1轮筛选到41种化合物,能影响荧光素酶活性2倍以上。将这41种化合物进行第2轮剂量依赖性测试,得到2种化合物:逆转素(Reversine)、SCH58261。进一步验证发现:Reversine在瞬时转染HBV1.3倍体的HepG2和HepG2.2.15细胞中,能够有效降低HBV RNA、HBV DNA以及HBeAg、HBsAg的水平。结论建立了一种新型、高效的抗乙肝药物筛选细胞模型(HepG2-Pcore-Gluc),利用该模型筛选到一种新型分子Reversine,该分子可以通过抑制HBV核心启动子的转录活性来抑制HBV RNA的转录。
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关键词
逆转素
乙型肝炎病毒
核心启动子
细胞模型
药物筛选
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Keywords
Reversine
hepititis B virus
core promoter
cell model
compounds screening
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分类号
R373.21
[医药卫生—病原生物学]
K965.1
[历史地理—人文地理学]
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