ACTN4通过靶向NDUFV1对食管鳞状细胞癌的细胞增殖的影响

目的探究α-辅肌动蛋白-4(ACTN4)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达情况及其对ESCC细胞增殖的影响。方法采用免疫组化实验检测ESCC组织及配对正常组织中ACTN4的表达,统计学方法分析ACTN4与临床病理特征的相关性;构建ACTN4 shRNA慢病毒表达载体,利用慢病毒包装技术建立ACTN4稳定低表达的ESCC细胞株,Western blot检测敲低效果,克隆形成实验检测ACTN4敲低对细胞增殖的影响;基于前期黑色素瘤A375细胞中ACTN4敲低的蛋白质组学分析结果,选取候选下游靶蛋白并在ESCC细胞中进行验证。结果免疫组化实验结果显示,ESCC组织中的ACTN4表达量高于正常组织(P<0.0001);成功构建ACTN4 shRNA慢病毒质粒并获得稳定低表达ACTN4的ECA109细胞株;克隆形成实验结果表明,ACTN4敲低抑制ECA109细胞的增殖;ESCC细胞中ACTN4的敲低下调NADH∶泛素氧化还原酶核心亚基V1(NDUFV1)蛋白的表达。结论ESCC细胞中,高表达的ACTN4能够促进细胞增殖,并上调NDUFV1的蛋白表达。