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编码器换向误码输出原因探讨及鉴相电路改进 被引量:13
1
作者 孙祥明 齐明侠 沈蓉 《石油大学学报(自然科学版)》 EI CSCD 北大核心 2005年第4期91-94,共4页
从编码器的结构特点出发,探讨了编码器频繁换向时输出信号中存在误码脉冲的原因。根据编码器输出信号不能同时跳变的特点,设计了一种更简单有效的双向触发鉴相电路。该电路通过标记两相输出信号跳变时刻的状态,经过一定的逻辑与运算,有... 从编码器的结构特点出发,探讨了编码器频繁换向时输出信号中存在误码脉冲的原因。根据编码器输出信号不能同时跳变的特点,设计了一种更简单有效的双向触发鉴相电路。该电路通过标记两相输出信号跳变时刻的状态,经过一定的逻辑与运算,有效地滤除了输出信号中存在的误码脉冲。经实验室应用证明,该电路具有较好的误码滤除效果,为编码器内部电路的改进及其输出信号的数字处理提供了一种新思路。 展开更多
关键词 光电编码器 误码滤除 换向 鉴相电路 改进
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重组CHO细胞培养过程中氨对细胞代谢的影响 被引量:10
2
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期304-309,共6页
研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批... 研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批培养过程相比 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数分别下降了 78%和 74% ,细胞对其它氨基酸的得率系数也分别下降了 5 0 %~ 70 %。氨浓度的增加明显地改变了细胞的代谢途径 ,葡萄糖代谢更倾向于厌氧的乳酸生成。在谷氨酰胺的代谢过程中 ,谷氨酸经谷氨酸脱氢酶进一步生成α 酮戊二酸的过程受到了氨的抑制 ,而氨对谷氨酸经谷氨酸转氨酶反应生成α 酮戊二酸的过程有促进作用 ,但总体上谷氨酸进一步脱氨生成α 展开更多
关键词 动物细胞培养 细胞代谢 CHO细胞 葡萄糖 谷氨酰胺
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接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响 被引量:3
3
作者 孙祥明 谭文松 +2 位作者 张元兴 华平 周亚竞 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期367-370,共4页
研究了接种密度对Vero细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于1.0×105cels/mgMC时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进... 研究了接种密度对Vero细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于1.0×105cels/mgMC时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Vero细胞培养过程,适宜的表面接种密度为3×104~7×104cels/mgMC,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。实验结果还表明Vero细胞在CT-3微载体表面呈单层生长且不受表面限制,所达到的最高密度约为5.2×105cels/mgMC。 展开更多
关键词 VERO细胞 细胞培养 接种密度 微载体表面生长
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乳酸对重组CHO细胞生长代谢及EPO表达的影响 被引量:9
4
作者 孙祥明 张元兴 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1034-1039,共6页
利用脉冲实验方法研究了乳酸和渗透压对重组CHO细胞生长代谢和EPO表达的影响 ,证明乳酸分子本身对重组CHO细胞的生长代谢和产物表达没有明显的影响 .乳酸浓度从 0增加到 6 9mmol·L-1对应于渗透压从 30 0增加到 4 2 0mOsm ,细胞的... 利用脉冲实验方法研究了乳酸和渗透压对重组CHO细胞生长代谢和EPO表达的影响 ,证明乳酸分子本身对重组CHO细胞的生长代谢和产物表达没有明显的影响 .乳酸浓度从 0增加到 6 9mmol·L-1对应于渗透压从 30 0增加到 4 2 0mOsm ,细胞的比生长速率下降了 33% ,葡萄糖和谷氨酰胺的比消耗速率均增加了 2 3% ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数分别下降了 4 5 %和 4 7% ,乳酸的比生成速率则保持恒定 ,表明在高渗透压下营养物的利用更倾向于能量代谢过程 ,好氧能量代谢过程所占的比例随着渗透压的增加而增加 ;另一方面 ,氨对谷氨酰胺的得率系数增加了 4 4 % ,丙氨酸对谷氨酰胺的得率系数下降了 2 4 % ,表明谷氨酰胺经谷氨酸脱氢酶途径的代谢流量随着渗透压的增加而增加 . 展开更多
关键词 重组CHO细胞 生长代谢 乳酸 渗透压 促红细胞生长素 细胞培养 重组动物细胞
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Vero细胞培养过程中球转球接种工艺的可行性研究I.动态球转球过程 被引量:2
5
作者 孙祥明 谭文松 +2 位作者 张元兴 周亚竞 华平 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期567-569,共3页
研究了动态球转球接种Vero 细胞培养过程中的细胞生长特性,提出了细胞球转球的机理,通过与消化接种的比较,证明在动态球转球接种的细胞培养过程中,细胞的比生长速率和增殖倍数均较低,因而认为以动态方式实现细胞球转球接种不... 研究了动态球转球接种Vero 细胞培养过程中的细胞生长特性,提出了细胞球转球的机理,通过与消化接种的比较,证明在动态球转球接种的细胞培养过程中,细胞的比生长速率和增殖倍数均较低,因而认为以动态方式实现细胞球转球接种不适合于细胞的大规模培养过程。 展开更多
关键词 VERO细胞 细胞培养 球转球 接种 消化接种
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葡萄糖对重组CHO细胞生长代谢及EPO表达的影响 被引量:4
6
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期698-702,共5页
在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ... 在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ,葡萄糖浓度对谷氨酰胺代谢没有明显的影响。EPO的累积浓度首先随着起始葡萄糖浓度的增加 ( 8 9~ 17.9mmol L)而增加 ,进而又随着葡萄糖浓度的增加 ( 17 9~ 4 9.6mmol L)而下降 ,表明存在一最适浓度 ,在此浓度下重组CHO细胞的EPO表达最大。 展开更多
关键词 CHO细胞 葡萄糖 代谢 红细胞生成素 动物细胞培养
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氨对重组中国仓鼠卵巢细胞生长及人红细胞生成素表达的影响 被引量:3
7
作者 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期172-175,共4页
氨对重组中国仓鼠卵巢 ( CHO)细胞的生长具有明显的抑制作用 ,并遵循二级抑制模型 ,抑制常数 Ka 为 41 .5 ( mmol/L ) 2 ,即当氨浓度为 6.45 mmol/L时 ,细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的 5 0 %。在重组 CHO细胞的批培养过程中 ,... 氨对重组中国仓鼠卵巢 ( CHO)细胞的生长具有明显的抑制作用 ,并遵循二级抑制模型 ,抑制常数 Ka 为 41 .5 ( mmol/L ) 2 ,即当氨浓度为 6.45 mmol/L时 ,细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的 5 0 %。在重组 CHO细胞的批培养过程中 ,细胞密度和红细胞生成素浓度随着起始氨浓度的提高而下降 ,但存在一最适的氨浓度 ,在此浓度下 ,单位重组 CHO细胞的 展开更多
关键词 细胞培养 CHO细胞 人红细胞生成素 氨抑制
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石油钻机滚筒信号采集及振动干扰与滤除 被引量:1
8
作者 孙祥明 齐明侠 《石油矿场机械》 2005年第4期73-75,共3页
设计了编码器鉴相电路,滤除因石油钻机振动干扰而产生的测量误差,增强编码器测量的自适应性与准确性,提高石油钻井控制系统的性能。在模拟钻机滚筒振动试验中,验证了设计的鉴相电路工作正常,编码器测量信号未发生误计数现象。
关键词 石油钻机 滚筒 测量 振动 滤除
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羟基磷灰石的表面特性 被引量:70
9
作者 沈卫 顾燕芳 +2 位作者 刘昌胜 孙祥明 胡黎明 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期45-52,共8页
本文综述了羟基磷灰石(HAP)的表面结构、表面能、表面电荷等特性,总结了HAP对无机阴、阳离子,短链有机物,聚合物的作用规律及其对HAP晶体生长和形态的影响,并进一步概括了HAP在悬浮体系中的团聚和解聚现象。
关键词 羟基磷灰石 表面特性 吸附 晶体生长 磷灰石
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谷氨酰胺对鲑鱼胚胎(CHSE)细胞生长和代谢的影响 被引量:7
10
作者 陈巨星 孙祥明 张元兴 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第4期442-445,共4页
鉴于鱼类和哺乳动物的谷氨酰胺代谢途径有所不同 ,为了优化CHSE细胞的培养基和大量培养的过程控制 ,考察了谷氨酰胺对CHSE细胞生长和代谢的影响 .在CHSE细胞批培养中 ,无谷氨酰胺的M199培养基可以支持CHSE细胞的生长 ,当初始谷氨酰胺浓... 鉴于鱼类和哺乳动物的谷氨酰胺代谢途径有所不同 ,为了优化CHSE细胞的培养基和大量培养的过程控制 ,考察了谷氨酰胺对CHSE细胞生长和代谢的影响 .在CHSE细胞批培养中 ,无谷氨酰胺的M199培养基可以支持CHSE细胞的生长 ,当初始谷氨酰胺浓度c =0 .5 4mmolL-1时 ,细胞可达到最高密度nmax/ 10 5mL-1=16 .19;而更高浓度的谷氨酰胺 (c =1.76~ 5 .6 2mmolL-1)对细胞生长有抑制作用 .在c=0~ 5 .6 2mmolL-1初始谷氨酰胺浓度的批培养中 ,葡萄糖的利用和乳酸的生成基本一致 ,随谷氨酰胺浓度的升高 ,Qglc和Qlac增加 ,Yn/ glc降低 .另外 ,随着初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=0~ 3.33mmolL-1) ,谷氨酰胺的消耗增加 ,Yn/ gln和Yammo/ gln分别下降 5 8%和 5 0 % ;当初始谷氨酰胺浓度继续增加时 ,谷氨酰胺的消耗、Yn/gln和Yammo/gln基本不变 .此外 ,当初始谷氨酰胺浓度为 0时 ,丙氨酸成为消耗性的氨基酸 ;Yala/gln先随初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=0 .5 4~ 1.76mmolL-1)而增加 ,而后又随初始谷氨酰胺浓度的增加 (c=1.76~ 3.33mmolL-1)而降低 ,最后维持不变 .图 4表 3参 展开更多
关键词 CHSE细胞 谷氨酰胺 代谢 细胞培养 鲑鱼 胚胎 生长 代谢
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应用动力学方法在线检测Vero细胞培养过程中的摄氧率 被引量:4
11
作者 周亚竞 谭文松 +3 位作者 赵佼 华平 孙祥明 俞俊棠 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期525-527,共3页
The oxygen uptake rate( OUR ) during the cultivation of Vero cells in 1.5L CelliGen bioreactor was on line determined using the dynamic method.The results showed that the cell growth and metabolic state during the exp... The oxygen uptake rate( OUR ) during the cultivation of Vero cells in 1.5L CelliGen bioreactor was on line determined using the dynamic method.The results showed that the cell growth and metabolic state during the exponential growth phase was lineally related to the OUR .This implies that the on line measurement of OUR can be used to promptly monitor the physiological state of cultured cells and to efficiently avoid contamination because of frequent sampling in the large scale cultivation of mammalian cells. 展开更多
关键词 VERO细胞 在线检测 摄氧率 细胞培养 动力学方法
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乳酸对海水鱼类细胞系CHSE生长和代谢的影响 被引量:2
12
作者 陈巨星 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期290-295,共6页
在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中,低乳酸浓度(1.1~6.14mmol/L,相应渗透压为644~673kPa)对细胞生长无明显影响,主要的代谢特征基本不变;在高乳酸浓度(13.1~41.58mmol/L,相应渗透压为701~944kPa)下培养,细胞生长受到抑制,代谢发生明显变... 在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中,低乳酸浓度(1.1~6.14mmol/L,相应渗透压为644~673kPa)对细胞生长无明显影响,主要的代谢特征基本不变;在高乳酸浓度(13.1~41.58mmol/L,相应渗透压为701~944kPa)下培养,细胞生长受到抑制,代谢发生明显变化。乳酸对CHSE细胞生长的抑制作用主要由乳酸导致培养基pH下降和渗透压增加引起。在CHSE细胞批培养中,维持正常的pH,7mmol/L的乳酸浓度,不会明显抑制CHSE细胞的生长。 展开更多
关键词 CHSE细胞 乳酸 渗透压 代谢 动物细胞培养
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温度对重组BHK细胞生长、代谢和vWF蛋白表达的影响 被引量:1
13
作者 易小萍 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期28-32,共5页
通过重组幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)在不同温度下的批培养和脉冲培养,研究了温度对重组BHK细胞生长、代谢以及血管性血友病因子(vWF)蛋白表达的影响。相对于37℃,升高和降低温度的培养都降低了细胞的生长速率和密度,降温的作用更明显,主要... 通过重组幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)在不同温度下的批培养和脉冲培养,研究了温度对重组BHK细胞生长、代谢以及血管性血友病因子(vWF)蛋白表达的影响。相对于37℃,升高和降低温度的培养都降低了细胞的生长速率和密度,降温的作用更明显,主要表现为延长了细胞生长的迟滞期。在不同温度的脉冲培养中,细胞的比生长速率变化不大,表明进入对数生长期后,细胞生长对一定范围的温度变化不敏感。培养温度对细胞群体中处于S期的细胞比例影响不大,但在33℃和39℃下培养,细胞群体中处于G0/G1期的细胞比例有明显升高,处于G2/M期的细胞比例下降。当培养温度降低到33℃时,细胞群体中发生凋亡的细胞数随着温度升高而增加。温度的降低能显著提高单个细胞的vWF蛋白表达能力,在33℃下培养,vWF平均比生产速率提高了45%。 展开更多
关键词 重组BHK细胞 细胞培养 温度 细胞周期 细胞凋亡 VWF
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丁酸钠对重组CHO细胞生长及产物EPO表达的影响 被引量:1
14
作者 周玲 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期310-312,319,共4页
在 CHO- S- SFM II无血清培养基中维持培养重组 CHO细胞 ,考查添加丁酸钠对细胞生长、糖代谢及产物 EPO表达的影响。丁酸钠浓度达到 2 mmol/L时完全抑制了细胞的生长 ,同时 ,丁酸钠的添加也降低了葡萄糖比消耗速率 ( 30 %左右 )。在本... 在 CHO- S- SFM II无血清培养基中维持培养重组 CHO细胞 ,考查添加丁酸钠对细胞生长、糖代谢及产物 EPO表达的影响。丁酸钠浓度达到 2 mmol/L时完全抑制了细胞的生长 ,同时 ,丁酸钠的添加也降低了葡萄糖比消耗速率 ( 30 %左右 )。在本培养系统中 ,丁酸钠并不能促进产物的表达 ,但有助于维持 EPO表达的稳定性。 展开更多
关键词 丁酸钠 CHO细胞 重组人促红细胞生成素 细胞培养 EPO表达 细胞生长 糖代谢
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表达vWF蛋白的重组BHK细胞的无血清培养
15
作者 易小萍 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期254-257,共4页
采用HADAMARD统计设计方法建立了适于重组BHK细胞培养和vWF蛋白表达的无血清培养基SFMA。用SFMA进行重组BHK细胞的批培养,细胞生长明显优于有血清培养(DMEM+FBS(φFBS=0.05))和无血清培养基SFM- 的培养,最大细胞密度可分别提高16.7%和40... 采用HADAMARD统计设计方法建立了适于重组BHK细胞培养和vWF蛋白表达的无血清培养基SFMA。用SFMA进行重组BHK细胞的批培养,细胞生长明显优于有血清培养(DMEM+FBS(φFBS=0.05))和无血清培养基SFM- 的培养,最大细胞密度可分别提高16.7%和40%。同时,在培养的96h,蛋白的表达水平比有血清培养提高了18.7%,SFMA维持培养48h的vWF蛋白的表达水平比SFM- 提高了50%。 展开更多
关键词 BHK细胞 rec-vWF 无血清培养基 细胞培养
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表达重组蛋白的CHO-GS细胞的无血清培养 被引量:6
16
作者 张芳 张立 +2 位作者 易小萍 孙祥明 张元兴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期73-78,共6页
采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SFMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细胞结团.用SFMB在方瓶中培养重组CHO-G... 采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SFMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细胞结团.用SFMB在方瓶中培养重组CHO-GS细胞,细胞生长优于含10%小牛血清的无谷氨酰胺DMEM/F12培养,最大细胞密度提高了40.7%,外源蛋白的表达水平也得到提高.在100 ml转瓶中分批培养,最大细胞密度和蛋白表达分别达到1.5×106 cells/ml和0.48 mg/L. 展开更多
关键词 重组蛋白 HADAMARD DMEM/F12 无血清培养基 谷氨酰胺 蛋白表达 细胞生长 细胞密度 统计方法 低分子量 添加浓度 外源蛋白 分批培养 CHO 多聚糖 葡聚糖 牛血清 GS 硫酸 转瓶
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瞬时基因表达可溶性的VEGFR2:I-IV 被引量:3
17
作者 李军 易小萍 +1 位作者 张元兴 孙祥明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期810-816,共7页
通过RT-PCR的方法从三个月的流产绒毛组织中克隆目的基因VEGFR2(Vascular endothelial growth factor receptor 2,血管内皮细胞生长因子受体2)胞外I-IV区,连接到真核表达载体上构建了重组表达载体。首先在无血清悬浮培养的HEK293细胞中... 通过RT-PCR的方法从三个月的流产绒毛组织中克隆目的基因VEGFR2(Vascular endothelial growth factor receptor 2,血管内皮细胞生长因子受体2)胞外I-IV区,连接到真核表达载体上构建了重组表达载体。首先在无血清悬浮培养的HEK293细胞中,使用报告基因GFP(Green fluorescence protein,绿色荧光蛋白)优化转染条件,发现在转染时DNA:PEI=1:2(W/W)、1.5μgDNA/106cells及开始转染4h内使用无血清、摇床(120r/min)时可以达到最佳的转染效率和细胞数量。在确定转染条件之后,将构建的表达载体分别在HEK293细胞、COS-7细胞和CHO-K1细胞中进行瞬时转染表达,结果发现仅在CHO-K1细胞的培养上清中检测到目的蛋白的表达。瞬时转染CHO-K1细胞至总体积约为1.5L,由于目的蛋白的羧基端有8-His标签,通过Ni2+-IDA柱纯化得到5mg左右的目的蛋白。 展开更多
关键词 VEGFR2 瞬时基因表达 HEK293 PEI
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重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原过程的限制性步骤 被引量:2
18
作者 戴临 邵明非 +2 位作者 张元兴 孙祥明 汪恩浩 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-19,58,共4页
考察了重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原(HBsAg)的限制性步骤,发现在对数生长期的中后期,与发酵初期相比,外源质粒的拷贝数下降了40%,此后质粒拷贝数在低水平保持稳定。在发酵过程中添加乙醇胺,抗原基因启动子的转录效率下降了24%,但抗原... 考察了重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原(HBsAg)的限制性步骤,发现在对数生长期的中后期,与发酵初期相比,外源质粒的拷贝数下降了40%,此后质粒拷贝数在低水平保持稳定。在发酵过程中添加乙醇胺,抗原基因启动子的转录效率下降了24%,但抗原效价上升了31%,说明HBsAg表达的主要限制步骤在抗原多肽的翻译和颗粒形成的后加工过程。 展开更多
关键词 限制性步骤 重组酿酒酵母 乙肝表面抗原 乙醇胺 蛋白表达 发酵生产 抗原多肽
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重组CHO-GS细胞降低氨毒副作用的代谢研究 被引量:2
19
作者 张芳 易小萍 +1 位作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期94-100,共7页
在重组CHOGS细胞无血清批培养过程中,由于GS系统的引入,使氨对细胞的毒副作用显著降低,从而引起细胞生长和代谢途径发生变化。当起始氨浓度为1.42mmolL时,细胞最高密度可达到15.6×105cellsmL,随着氨浓度的增加,尽管细胞生长受到一... 在重组CHOGS细胞无血清批培养过程中,由于GS系统的引入,使氨对细胞的毒副作用显著降低,从而引起细胞生长和代谢途径发生变化。当起始氨浓度为1.42mmolL时,细胞最高密度可达到15.6×105cellsmL,随着氨浓度的增加,尽管细胞生长受到一定的抑制,但在氨浓度为12.65mmolL时,细胞密度仍可达到8.9×105cellsmL。当起始氨浓度从0.36mmolL增加到12.65mmolL时,细胞对葡萄糖的得率系数和乳酸对葡萄糖的得率系数降低,己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)酶活分别提高了43%、140%和25%,表明细胞对葡萄糖的利用增加,糖代谢更倾向于高能量生成途径。在谷氨酰胺代谢途径中,氨促进了谷丙转氨酶(GPT)酶活,谷氨酸到α酮戊二酸的转化逐渐倾向于谷丙转氨途径,谷氨酸脱氢酶(GDH)酶活降低,脱氨途径相应受到抑制。此外,氨浓度的增加使细胞群体处于G0G1期的比例逐渐升高,当氨浓度为12.65mmolL时,重组蛋白比生产速率比氨浓度为0.36mmolL时提高了2.1倍。 展开更多
关键词 重组CHO细胞 谷氨酰胺合成酶 无血清培养 代谢
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过量表达XBP1对于重组CHO细胞中HBsAg分泌的影响 被引量:1
20
作者 赵建兵 易小萍 +1 位作者 张元兴 孙祥明 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期42-47,共6页
考察了过量表达CHO细胞的内源性XBP1(X-box binding protein 1)对于重组CHO细胞中乙肝表面抗原(HBsAg)分泌的影响。结果表明:XBP1无法改善DMSO作用下CHO细胞中HBsAg的分泌,但能促进DTT作用下的HBsAg的分泌。进一步研究发现,细胞在DTT作... 考察了过量表达CHO细胞的内源性XBP1(X-box binding protein 1)对于重组CHO细胞中乙肝表面抗原(HBsAg)分泌的影响。结果表明:XBP1无法改善DMSO作用下CHO细胞中HBsAg的分泌,但能促进DTT作用下的HBsAg的分泌。进一步研究发现,细胞在DTT作用下形成了内质网分泌压力,而在DMSO作用下,没有形成内质网分泌压力。由此推断在内质网成为分泌限制部位的情况下,XBP1能够促进HBsAg的分泌;而DMSO通过促进二硫键的形成促进了HBsAg在内质网中的分泌,使得分泌限制部位发生在分泌过程中的其他细胞器。 展开更多
关键词 XBP1 HBSAG CHO细胞 内质网压力 二硫键
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