液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中赖脯胰岛素及其药动学研究

赖脯胰岛素皮下注射吸收较快,与人胰岛素相比,其降血糖作用起效更快,血药浓度峰值更高,可更好地控制餐后高血糖。本文建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中的赖脯胰岛素,并评价其药动学特征。采用牛胰岛素作为内标,血浆样品经过固相萃取后,使用ACQUITY UPLC Peptide CSH C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)进行色谱分离。采用电喷雾离子源(ESI源),在正离子模式下以多反应监测模式检测,赖脯胰岛素和牛胰岛素(内标)定量的离子对分别为m/z 1 162.5→217.2和m/z 1 157.5→136.0。方法学验证结果表明,大鼠血浆中赖脯胰岛素的线性范围为0.1~100 ng·mL^(-1),日内、日间准确度和精密度均符合生物样品分析相关要求,回收率在63.1%~68.1%之间。与文献报道方法相比,色谱分离得到改善,回收率显著提高。本方法成功应用于大鼠的单剂量皮下注射赖脯胰岛素的药代动力学研究。本研究中实验动物的使用已获得中国科学院上海药物研究所实验动物管理与使用委员会的批准。