河虾过敏原原肌球蛋白的基因克隆与原核表达

为了探寻天然原肌球蛋白的可替代物作为诊断和治疗虾类过敏的基础材料,本研究从河虾中提取总RNA,利用cDNA末端快速扩增技术克隆河虾过敏原原肌球蛋白基因的全长序列。以此序列设计表达引物,构建表达载体,最后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达重组原肌球蛋白。结果显示,河虾的原肌球蛋白基因cDNA序列全长1658 bp,开放阅读框855 bp,编码284个氨基酸,预测蛋白等电点4.70,预测分子质量32.8 kDa。河虾原肌球蛋白cDNA序列已上传至GenBank数据库,登录号为OP974621。本研究成功构建河虾原肌球蛋白重组表达质粒pET-30a-TM,并用IPTG进行体外诱导表达,最佳诱导条件为IPTG浓度1 mmol/L、37℃诱导4 h。可溶性分析结果表明重组原肌球蛋白主要以可溶性形式存在于细胞破碎液的上清液中,分子质量约38 kDa。

变电运行过程中复压方向过流保护的相关研究

当前各行各业对用电要求越来越高,给电力系统带来了新的挑战,特别是变压器稳定性问题。在变电实际的操作过程中,变电复压方向的过流保护经常会出现不正确的动作,这会给电网稳定性和安全性带来很大危害,本文结合实际案例对变电运行过程中复压方向过流保护的措施进行分析。

草鱼潜在过敏原α-烯醇化酶原核表达条件的优化

目的通过对草鱼α-烯醇化酶(α-Enolase)原核表达的条件进行优化,分别从表达的上清液与包涵体中纯化获得重组α-Enolase。方法本研究基于前期克隆的草鱼α-Enolase基因序列设计表达引物,将草鱼α-Enolase基因克隆至pET-30a质粒中,得到pET-30a-α-Enolase重组质粒。然后,将重组质粒转入大肠杆菌Origami2(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)进行体外诱导表达。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳方法分析重组蛋白的可溶性,并对表达条件进行优化。利用亲合层析法纯化目的蛋白。结果在20℃诱导15 h得到的重组蛋白以两种形式存在:一部分为可溶性蛋白存在于上清液中,一部分以包涵体形式存在于沉淀中;在37℃诱导4h得到的重组蛋白则只有包涵体形式。包涵体蛋白表达量最大的优化条件为:诱导温度为37℃,IPTG终浓度1.0 mmol/L,诱导时间4 h。采用亲合层析法分别纯化上清液(20℃诱导15 h)和包涵体中(37℃诱导4 h)的重组蛋白,得率分别为3.5 mg/100 mL和4.9mg/100mL菌液。结论利用原核表达从上清液与包涵体中均可纯化得到重组α-Enolase。但这两种α-Enolase在生物活性与免疫原性是否存在差异性,以及通过重组α-Enolase是否可以代替天然蛋白用于鱼类过敏原的研究,有待进一步研究。

围绕学科规划 做好学位授权点合格评估与动态调整

结合中山大学学位授权点合格评估及动态调整工作实践,提出学位授权点的合格评估与动态调整要围绕学校的学科整体规划开展,同时根据学校实践经验,对学位授权点合格评估和动态调整的实际操作和具体组织等提出了建议,讨论了高校开展该项工作可能存在的一些共性问题。

浅谈知识经济时代的企业创新战略

创新是知识经济时代企业发展的源动力 ,对企业的生存和发展具有举足轻重的作用 ,作为企业 ,如何构建企业创新战略是一个非常重要而十分紧迫的问题。

六安市农业产业化的调查与分析

六安市是我省重要的农产品基地,本文就六安市如何走农业产业化之路,实现农业的全面小康这一问题作了粗浅分析,目的是为六安今后农业产业化的发展,为领导决策和农户经营提供参考。

刘勰论颂、赞之流变——兼论画赞和题画诗

刘勰认同《诗经》里用于宗庙的颂是颂之正体,他也肯定了正体外的野体颂的存在,以及看到了颂正体和野体的新变。刘勰论及赞体,认为说明意义的赞才是正体,异于后人认为赞美之赞是正体,同时他对史传文中的叙传文字作了辨析,但他忽视了赞体形式的变化。

制定科学合理的中国大学发展战略规划

科学合理的大学发展战略规划对大学发展具有良好的推动作用。科学合理的规划应顺应时代发展的潮流,适应国家和社会发展的需求;能立足于校情,体现学校的特色和优势;具有总结性和前瞻性;具有可操作性。制定科学合理的规划还应处理好时限长短、定量与定性、深层和浅层内容的矛盾。

新形势下高校学生思想政治工作应着眼于创新

创新是21世纪开展各项事业的关键,也是开展思想政治教育的关键,没有创新,思想政治教育难有新的发展。面对新形势,大学生思想政治教育必须实现思想观念、教育思路、教育方法、教育手段及教育内容等方面的创新。

浅谈知识经济时代的对策思考

人类社会经历了漫长的农业经济时代，经历了辉煌的工业经济时代，现在已经叩响了知识经济时代的大门。如何使我国由农业大国步入工业国家俱乐部，如何迎接知识经济时代的挑战已是一个迫在眉睫的问题。本文就这一问题做一点粗浅的思考。

实践“三个代表”重要思想 努力建设专升本院校

刚合并的“专升本”院校 ,面临办学思路不清、头绪多、摊子大 ,教学队伍素质低等严峻挑战 ,因而新建专升本院校 ,实践“三个代表”重要思想的核心 ,首先必须解决学校的发展定位问题 :即建设什么的专升本院校和怎样建设专升本院校的问题。

推进农业信息化 建设社会主义新农村

推进农业信息化是建设社会主义新农村、推进现代农业的必然选择。实现社会主义新农村的宏伟蓝图,农业信息化则是其发展的一个重要阶段和组成部分。本文就实施农业信息化建设的紧迫性和重要性、存在的问题做了简要分析,并对我省推进农业信息化提出了几点政策性建议。

试论重点学科建设中的绩效评价

从绩效评价在学科建设项目中的运用、对学科建设项目进行绩效评价的基本原则、进行对学科建设项目绩效评价中的实施步骤以及绩效评价在学科建设项目中采用的指标体系等四个方面对重点学科建设中的绩效评价进行了论述与解析。

红外测温技术在变电运行中的应用分析

当前民众生产生活对电力供应依赖性不断提升,这对电力系统运行稳定性提出明确要求。而变电系统运行状态直接对变电系统运行造成影响。基于此,本文研究中将正对变电运行中红外测温技术应用方式进行分析,并结合实际案例分析该技术应用成效,以期为运维人员工作提供有力支持。

一份情报节约了二万元外汇

武汉钢铁公司一米七国外引进工程冷轧车间已经建成投产七年了,为祖国的薄钢卷生产填补了空白,创造了大量的财富,取得了显著的经济效益。一米七冷轧车间的成套设备是由西德比利时财团提供的,其中有几十台桥式起重机,分别由西德与奥地利提供,由奥地利提供了8台桥式起重机。一般。

营销案例教学的探讨

营销案例教学法是哈佛商学院于本世纪20年代首创和倡导的一种模拟实践的教学方法。是以营销案例为教材,让学生通过阅读、观察和思考,相互之间进行讨论,探研而形成共识,相应地提高思考营销问题和处理营销问题能力的全过程。可以说,它既是一种全新的教学理念,又是一种全新教学方法。自营销案例教学出台后,就受到学术界、教育界的普遍重视和支持。为此,本文仅就营销案例教学的必要性和原则、方法谈点粗浅体会。

产品生命周期的广告策略

产品生命周期是指某种产品从投放市场开始,到被市场淘汰为止所经历的全过程。它包括投入期、成长期、成熟和衰退期四个阶段。企业的广告策略是为配合企业的目标市场策略、产品策略、价格策略、分销渠道策略和其它促销方式等而制定的,它必须服从和服务于企业的市场营销策略,与其保持一致。在产品生命周期的各个阶段,由于市条件和产品销售特点产不同,广告的侧重点和方式也应有所不同。因此。