孔扩散-CAS法检测铁载体及其在捕食线虫真菌中的作用

基于传统CAS检测法,改良原有操作,规避CAS检测液对真菌生长的抑制作用,以实现真菌产铁载体的有效定性分析。以捕食线虫真菌少孢节丛孢菌(Arthrobtrys oligospora)为研究对象,通过比较三种不同处理方式下,即覆盖CAS(O-CAS)法、CAS区域法以及孔扩散CAS(WD-CAS)法,少孢节丛孢菌生长及铁载体检出情况,确定最佳铁载体检测方法。对少孢节丛孢菌不同生活方式条件下产铁载体情况进行分析,验证该方法在解决实际生物学问题中的应用效果,并初步探究少孢节丛孢菌产铁载体特征。结果表明,三种处理方式均能实现对少孢节丛孢菌中铁载体的有效检测,相比O-CAS法,CAS区域法以及WD-CAS法能够更好地规避CAS检测液对真菌生长的抑制作用,其中的WD-CAS法整体表现效果最佳,能很好的在少孢节丛孢菌从腐生生活方式转变为寄生生活方式后实现对铁载体合成情况的有效监测。少孢节丛孢菌具有多种铁载体合成能力,且合成的铁载体种类因培养时间和培养基组成的不同而有所差异。WD-CAS法不仅能够避免因CAS检测液对微生物生长抑制造成的检测困难,还可以实现检测液的实时添加,保证检测结果的准确。研究结果为微生物中铁载体的高效检测及进一步研究铁载体在捕食线虫真菌捕杀线虫中的功能提供参考。