2019—2022年天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因遗传演化分析

为分析研究天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分子遗传进化关系,对2019—2022年收集的20份天津地区PRRSV阳性样品进行ORF5克隆测序,以开展遗传变异研究和系统发育分析。遗传进化结果显示,20株毒株有11株属于谱系1.8,3株属于谱系1.5,5株属于谱系8,1株为谱系5,表明该地区PRRSV毒株流行呈现多样性。ORF5基因及推导氨基酸同源性和位点进行分析,其中11株谱系1.8毒株与NADC30毒株核苷酸同源性为91.2%~93.0%,氨基酸同源性为89.6%~93.5%;3株1.5谱系毒株与NADC34毒株核苷酸同源性为93.4%~96.5%,氨基酸同源性为92.5%~95.5%;4株分离株与HP-PRRSV毒株同源性最高,核苷酸同源性为90.0%~95.5%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%;1株分离株与经典毒株CH-1a同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性分别为90.0%和89.1%,1株谱系5毒株与VR2332毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为97.8%和96.0%。在关键的氨基酸位点上存在一定程度突变,这些关键突变很可能造成病毒致病力差异,并导致病毒逃逸发生。本研究对天津地区PRRS防控提供数据支持。

基于同步辐射装置定量表征煤孔隙结构非均质性和各向异性

为了定量表征煤孔隙结构非均质性和各向异性,利用同步辐射SAXS(小角X射线散射)获得两种不同变质程度煤样的SAXS图像,通过图像数据处理,得到表面分形(D1)和孔分形(D2),由孔分形(D2)定量表征两种煤样孔隙结构的非均质性,忻州窑煤的孔分形维数为2.74,唐山煤的孔分形维数为1.69,表明忻州窑煤的孔隙结构非均质性要比唐山煤强。利用同步辐射nano-CT(纳米CT)获得煤的三维孔隙结构成像,选取煤样兴趣区域(ROI)并分成一定数量的子块,通过计算子块孔隙度的相对标准偏差的极值来定量表征孔隙结构的非均质性,忻州窑煤的孔隙结构非均质性值为3.21,唐山煤的孔隙结构非均质性值为2.71,表明忻州窑煤的孔隙结构非均质性同样强于唐山煤,即同步辐射SAXS和同步辐射nano-CT获得的孔隙结构非均质性一致。考虑到孔隙结构各向异性和渗流能力各向异性之间的对应关系,孔隙结构各向异性的定量表征通过运用LBM(格子Boltzmann方法)方法计算孔隙结构的渗透率张量来实现,应用渗透率张量特征值和特征向量来表征孔隙结构的各向异性,该方法得到的孔隙结构各向异性得到三维孔隙结构几何形貌的验证。

2014年—2015年天津地区PRRSV分子流行病学调查及流行毒株的分离鉴定

为了解天津地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和流行趋势,用RT-PCR对2014年—2015年在天津地区采集的疑似PRRS病料检测,并扩增阳性病料PRRSV NPS2部分基因片段和进行PRRSV分离鉴定。结果显示,237份疑似PRRSV感染病料中64份为阳性,阳性率为27%,分离获得33株PRRSV;Nsp2序列分析发现,天津地区流行的PRRSV主要为美洲型,其中54份与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)高度同源,8份与经典PRRSV高度同源,2份与NADC30-like高度同源。结果表明,2014年—2015年天津地区主要流行HP-PRRSV,并出现了NADC30-like变异毒株,说明PRRSV流行种类的多样化,提示加强PRRSV流行及变异监测十分必要。

无线电波透视技术在资源整合矿井采空区探测中的应用

为了探测资源整合矿井采空区的分布情况,采用无线电波透视技术探测了山西乡宁焦煤集团通合煤矿2101工作面中存在的小窑和老窑开采形成的采空区。在对比无线电波透视技术中常用的定点法与同步法后,选用定点法,探测频率选用88 k Hz,该频率穿透距离相对较大且具有较高精度。在研究无线电波透视探测原理和数据分析数学模型的基础上,应用SIRT算法对探测结果进行了反演,圈定了2101工作面8处较为集中的异常区。一号异常区为煤层夹矸或破碎区,二号和三号异常区为小断层或煤层采空导致的破碎带,四号、五号、六号和八号异常区是煤层采空导致的破碎带,七号异常区为小窑采空破坏区。根据各处异常区相对周围区域的能量衰减程度,YC1~YC3三处异常区地质解释的可靠性一般,YC6、YC8两处异常区地质解释的可靠性中等,YC4、YC5、YC7三处异常区地质解释的可靠性较高。对2101工作面运输、回风巷揭露采空情况进行了统计,运输巷和回风巷掘进揭露的采空区情况验证了无线电波透视结果,表明应用无线电波透视技术探测资源整合矿井采空区是可行的。

瞬变电磁法在探测采空区中的应用

为了研究运用瞬变电磁法探测兼并重组整合矿井采空区的方法,在研究瞬变电磁法探测技术原理和对背景噪声进行调查的基础上,采用瞬变电磁法分别对通合2号煤层工业广场和生产区的采空区进行了探测研究。通过数据解释,结果表明,在工业广场存在3处采空破坏异常区,在生产区存在8处采空区。

硫酸酯化酵母β-葡聚糖对H1N1猪流感病毒血凝作用和mRNA转录的影响

为研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及对mRNA转录的影响,以猪流感病毒A/tianjin/1/TJ2(H1N1)感染MDCK细胞为模型,采用血凝抑制试验(HI)及SYBR Green Real-time PCR方法,探索硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及其对mRNA转录影响。结果显示,硫酸酯化酵母β-葡聚糖在浓度超过1.25 mg/m L时,能对猪流感病毒血凝产生抑制作用,且在5 mg/m L时对猪流感病毒mRNA转录具有抑制作用。因此,硫酸酯化酵母β-葡聚糖具有抑制流感病毒在MDCK细胞复制的作用,其作用机制可能与抑制流感病毒HA靶点及影响mRNA转录有关。

犊牛腹泻的病因、诊断及综合防治

介绍了犊牛腹泻的流行病学、发病原因及临床症状,并对该病的实验室诊断、治疗及综合预防措施进行了综述。

奶牛真菌性乳房炎病原菌的分离鉴定及其致病性研究

本研究针对天津地区使用多种常规药物治疗均无效的乳房炎患奶牛,无菌采集其奶样进行真菌病原分离鉴定及其致病性试验,经鉴定其病原菌为白色念珠菌和新型隐球菌,其对实验动物具有较强的致病力。本文的研究结果为更好地了解天津市及周边地区奶牛场真菌的感染情况,进而采取有效的防治措施提供了一定的理论依据。

真菌性乳房炎病原菌的分离鉴定及其致病性研究

本研究针对天津地区使用多种常规药物治疗均无效的乳房炎患牛,无菌采集奶样进行真菌病原分离鉴定及致病性试验,经鉴定其病原菌为白色念珠菌和新型隐球菌,其对试验动物具有较强的致病力。本研究结果为更好地了解天津市及周边地区奶牛感染真菌的情况,进而采取有效的防治措施提供了一定的理论依据。

羧甲基葡聚糖注射剂药效学研究

试验旨在研究羧甲基葡聚糖(CMG)注射剂药效,从而为临床动物疾病防制提供试验依据。试验选取小鼠作为试验动物,进行急性毒性试验及体内抗金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染试验。另外,采用MTT方法测定了CMG对奶牛淋巴细胞转化率影响,并对CMG注射剂进行了奶牛临床初步应用试验。结果表明,小白鼠对CMG最大耐受量在240mg/只以上,且在4mg/只浓度下对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染的保护率分别为60%、62.5%、87.5%;CMG能明显提高奶牛淋巴细胞转化率,临床应用试验组比空白对照组隐性乳腺炎发病率下降26.8%。本试验结果表明,CMG注射液可作为潜在新型兽用免疫增强剂在动物临床应用。

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗研究进展

针对金黄色葡萄球菌易引起奶牛乳房炎的问题,综述了金黄色葡萄球菌表面蛋白的种类及其在基因工程疫苗研制方面的进展。试验表明,其主要通过其表面蛋白(黏附素)与宿主的细胞外基质结合感染宿主,研究金黄色葡萄球菌黏附素对预防由金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎具有广阔的前景。

PCR技术在附红细胞体感染模型中的应用

目的以猪附红细胞体(E.suis)为例,建立套式PCR方法,定性测定E.suis感染大鼠血液中DNA,检验套式PCR方法在其动物模型应用中的实用性和可操作性。方法用阳性血液样品分别经腹腔、皮下及肌肉感染大鼠,定期采血,进行常规血涂片染色,并从血液中分离纯化E.suis,提取DNA,进行套式PCR法扩增,凝胶电泳定性。结果套式PCR经扩增后得到了一长度为498bp的特异条带,测序鉴定确为目的片段;在整个实验过程中未见感染大鼠明显的临床症状。结论可以用大鼠建立猪附红细胞体动物感染动物模型;附红细胞体的感染方式有以下几种:腹腔、皮下及肌肉感染。在隐性感染的整个阶段,PCR方法依靠其高敏感性,作为猪附红细胞体感染大鼠模型检测指标之一,有其必要性和重要性。

优质挤奶设备对奶牛设施养殖的重要性

为提高挤奶效率、减轻劳动强度,对不同挤奶器类型、装置的优缺点及影响因素进行分析和评价。

奶牛乳房炎的预防与治疗技术

就奶牛设施养殖中乳房炎的预防(如提高饲养管理措施和药物预防)及治疗技术进行总结,为天津市奶牛养殖场或养殖试验示范基地提供配套的技术。

硫酸化酵母β-葡聚糖注射剂体内外抗菌活性及安全性研究

对本实验室前期制备的兽用硫酸酯化酵母β-葡聚糖注射液进行安全性检验、体外抑菌和体内抗感染试验。结果表明,注射液体外对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,但对溶血性链球菌、大肠埃希氏菌无抑制作用;体内抗感染作用显著,并具有较高安全性。

硫酸酯化酵母β-葡聚糖抗H1N1猪流感病毒作用及对神经氨酸酶活性的影响

研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对H1N1猪流感病毒的体外抑制作用及对神经氨酸酶活性的影响。采用细胞感染模型,应用MTT法检测药物对MDCK细胞的半数毒性浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),并结合神经氨酸酶抑制试验检测药物对其活性的影响。结果表明,硫酸酯化酵母β-葡聚糖对MDCK细胞最大无毒浓度为5.34 mg/m L,其半数抑制浓度(IC50)为0.58 mg/m L,治疗指数(TI)为18.0;当药物浓度≥1.25 mg/m L时,能明显降低H1N1猪流感病毒神经氨酸酶的活性。提示硫酸酯化酵母β-葡聚糖有确定的体外抑制H1N1猪流感病毒的作用,并能影响病毒神经氨酸酶的活性。

猪流感病毒H1N1亚型天津分离株核蛋白、基质蛋白、非结构蛋白基因克隆与序列分析

从天津地区不同猪场分离到6株H1N1亚型猪源流感病毒(SIV)。根据GenBank发表的H1N1亚型SIV的核蛋白(NP)、基质蛋白(M)及非结构蛋白(NS)基因序列,分别设计3对引物,将RT-PCR产物克隆至pMD18-T载体,进行测序分析。遗传进化分析结果表明:A/swine/Tianjin/TJ2/2005(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ4/2006(H1N1)的NP、M及NS基因核苷酸序列在遗传进化树中均与A/swine/Guangdong/33/2006(H1N1)位于同一分支上,属于古典型H1N1猪谱系;A/swine/Tianjin/TJ3/2006(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ8/2006(H1N1)的NP、M及NS基因核苷酸在遗传进化树中均与A/Dunedin/2/2000(H1N1)组成一个大分支,可能起源于人谱系;A/swine/Tianjin/TJ6/2009(H1N1)与A/swine/Tianjin/TJ7/2009(H1N1)NP、M及NS基因核苷酸序列在遗传进化树中均与A/swine/Jiangsu/s15/2011(H1N1)位于同一分支上,属于类禽H1N1猪谱系。本试验对6株H1N1亚型SIV的NP、M及NS全基因序列进行分析,在一定程度上揭示了天津地区H1N1亚型SIV的基因进化与流行情况。

硫酸酯化酵母β-葡聚糖活性及其抗猪流感病毒机理研究进展

酵母β-葡聚糖是一类水不溶性免疫多糖,经硫酸酯化修饰后,所带有的亲水硫酸基团,不仅提高多糖水溶性,而且引起了生物活性的改变,表现出较强的抗病毒活性,其生物活性显著增强,属一类新型高效生物应答剂。论文综述了酵母β-葡聚糖经硫酸酯化修饰后生物学活性及其可能抗猪流感病毒机理,为进一步研究开发此类新型药物奠定基础。