老年C57BL/6J小鼠内皮细胞上S1PR1对血迷路屏障通透性的影响

该研究通过检测不同月龄C57BL/6J小鼠血管纹上S1PR1的表达情况,进一步探究老年耳蜗血管纹内皮细胞上S1PR1变化对血迷路屏障通透性的影响。用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)检测听觉功能;伊文思蓝染色检测耳蜗血迷路屏障的通透性;免疫荧光检测耳蜗血管纹上S1PR1和紧密连接蛋白表达水平;ELISA检测S1P的释放量;Transwell小室检测内皮细胞通透性;Western blot检测EC上S1PR1和紧密连接蛋白的表达水平。结果显示,12m组小鼠听力阈值明显增高且高频听力损失明显,耳蜗血迷路屏障通透性升高,S1PR1和紧密连接蛋白表达水平均降低。在细胞水平,D-gal+EC组中S1P的释放量降低,S1PR1表达水平下降,加入外源S1P后,S1PR1表达水平增加;D-gal+EC组紧密连接蛋白表达水平降低,内皮细胞通透性增加,加入外源S1P后,紧密连接蛋白表达水平增加,内皮细胞通透性降低,给予S1PR1抑制剂干预后,紧密连接蛋白表达水平降低,内皮细胞通透性增加。在衰老状态下,耳蜗血管纹内皮细胞上S1PR1表达下降,这可能会下调紧密连接蛋白的表达,进而影响血迷路屏障通透性。