缺氧H9c2来源外泌体对HUVEC增殖、迁移和成管能力的影响

目的探讨缺氧状态下大鼠心肌细胞H9c2来源外泌体对血管新生的影响。方法采用混合气体法制备H9c2细胞缺氧模型,以正常培养细胞为对照。分别提取2组细胞分泌的外泌体,采用纳米颗粒跟踪分析检测外泌体的浓度和粒径,透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,Western blot验证外泌体标志蛋白。制备人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧模型,并与H9c2外泌体共同孵育,分为常氧组、缺氧组、缺氧+正常H9c2外泌体(EXO-C)组和缺氧+缺氧H9c2外泌体(EXO-M)组。通过CCK-8法、细胞划痕实验、Matrigel体外三维成形实验分别检测HUVEC增殖、迁移、成管能力。结果外泌体鉴定结果显示常氧组和缺氧组H9c2外泌体样本颗粒浓度均处于1×10^(7)×10^(12)/mL,粒径大小40~160 nm;形态特征均为球形或茶托状结构,大小均一,形态完整;外泌体标志蛋白肿瘤易感基因101(TSG101)、CD63、CD9均有表达,无阴性蛋白钙联蛋白(Calnexin)的表达。与常氧组比,缺氧组HUVEC增殖能力、迁移面积、迁移率均显著下降,参与成管的长度及分支数、节点数均减少(P<0.01);与缺氧组比,EXO-M组HUVEC细胞增殖能力下降,迁移面积减少、迁移率下降,参与成管长度及分支数进一步减少(P<0.05);与EXO-C组相比,EXO-M组增殖能力下降,细胞迁移面积减少,迁移率下降(P<0.01)。结论缺氧H9c2来源的外泌体对HUVEC增殖、迁移、成管能力有一定程度的抑制作用。

星蒌承气汤对急性缺血性中风小鼠中枢和外周免疫炎症的影响与肠道菌群有关

目的:探讨星蒌承气汤(Xinglou Chengqi decoction,XCD)对急性缺血性卒中小鼠脑–肠轴的影响。方法:根据中医辨证分型标准,采用改良Longa法建立痰热腑实证脑缺血再灌注模型。60只无特定病原体的雄性C57BL/6小鼠随机分为5组,36只经抗生素处理的(ABX)小鼠随机分为三组。采用酶联免疫吸附试验检测盲肠去甲肾上腺素(NE)和胃动素(MTL),免疫组织化学方法检测盲肠酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达水平,免疫荧光法检测Iba-1和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平,流式多因子技术检测血清炎症因子含量。结果:与假手术组相比,大脑中动脉闭塞(MCAO)组盲肠组织中TH的表达水平显著升高(P=0.015)。与假手术组相比,MCAO组大鼠MTL水平显著升高(P<0.001),与MCAO组相比XCD组和尼莫地平(Nim)组大鼠血清MTL水平明显降低(P=0.003和P=0.007)。MCAO组星形胶质细胞和小胶质细胞明显激活,而XCD组激活程度低于MCAO组。ABX小鼠中星形胶质细胞和小胶质细胞在ABX–MCAO组明显激活,而ABX–XCD组激活程度较低。ABX–XCD组白细胞介素22水平较ABX–MCAO组显著升高(P=0.021)。结论:星蒌承气汤对急性缺血性卒中小鼠脑–肠轴的免疫通路有明显的调节作用,去除肠道菌群使该作用明显减弱。

醒脑静注射液对大鼠脑缺血急性期半暗带转化的影响

目的:观察醒脑静注射液对大鼠脑缺血急性期半暗带转化的影响。方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。除外假手术组,其余各组造模成功后随机分为模型组和醒脑静组。醒脑静组按0.18 mL/100 g腹腔注射醒脑静注射液,假手术组和模型组分别给予等量生理盐水。术后24 h,尼氏染色观察大鼠半暗带区神经元形态变化,透射电子显微镜观察神经血管单元(neurovascular unit,NVU)超微结构变化,原位细胞凋亡法检测(TdT-mediated dutp nick-end labeling,TUNEL)观察大鼠缺血半暗带区细胞凋亡情况,磁共振分别于4.5 h和24 h观察大鼠不同时间段半暗带区缺血演变过程。结果:与假手术组相比,模型组神经元数量明显减少,尼氏小体结构破坏崩裂,轮廓模糊或消失;透射电镜观察可见NVU超微结构病理形态明显损伤;模型组TUNEL染色可见大量的凋亡细胞(P<0.01);磁共振结果可见模型组大鼠脑组织存在大面积梗死。与模型组相比,醒脑静组神经元和NVU超微结构病理形态明显改善;凋亡细胞数量明显减少(P<0.01),半暗带丢失率明显降低(P<0.05)。结论:醒脑静注射液能够改善缺血半暗带区神经元状态,减少胶质细胞和微血管损伤,抑制细胞凋亡,在一定程度上挽救了部分半暗带,对脑缺血急性期半暗带区脑组织具有一定的保护作用。

鸡血藤抗肿瘤有效部位诱导A549肺癌细胞非凋亡性程序化死亡的研究

目的：探讨鸡血藤抗肿瘤有效部位（SSCE）对人非小细胞肺癌A549细胞的杀伤特点和作用机制。方法：采用四氮唑溴盐（MTr）法、绘制生长曲线观察药物对A549细胞增殖的影响。采用流式细胞术分析药物对肿瘤细胞周期的影响。通过HE染色和激光共聚焦扫描荧光显微镜技术、Annexin V-PI双标法，Caspase-3活性检测以及DNA琼脂糖凝胶电泳，观察药物对细胞凋亡的诱导作用。结果：SSCE对A549细胞有明显杀伤作用，24h药效最强，IC50为25．54mg·L^-1。细胞周期分析显示，药物作用12h，S期细胞增多，G0-G1和G2-M期细胞减少，细胞周期变化在24h后明显减弱，48h恢复正常。形态学观察可见，药物作用短时间内（8～12h），细胞核发生皱缩扭曲，胞浆内出现较多空泡及颗粒状物，胞膜完整；随后细胞核固缩。细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）外翻在用药后12h最显著，具有时间-剂量依赖关系。Caspase-3活性无明显升高，且与剂量成反比。DNA琼脂糖凝胶电泳未见片断化梯形条带。结论：SSCE对A549细胞具有直接杀伤作用，药效迅速，细胞周期受到干扰（Sdelay），主要表现为非凋亡性程序化细胞死亡。

川芎嗪在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的改变,以及川芎嗪的保护作用。方法提取和培养乳鼠心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72、96h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位,酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(cytochromec oxidase,COX)活性和线粒体损伤百分率等反映心肌细胞线粒外膜结构和内外膜功能的损伤。在此基础上给予川芎嗪与对照药缬沙坦,分析其对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在72、96h时,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量均增加(P<0.01),心肌细胞直径均增大(P<0.01)。在该增殖过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),COX线粒体细胞活性和线粒体膜电位均显著减低(P<0.01)。与模型组同期比较,川芎嗪在72、96h时能显著减少心肌细胞总蛋白质含量及心肌细胞直径,并显著降低心肌细胞MAO活性,提高线粒体COX活性,改善线粒体外膜损伤百分率和内膜膜电位,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害;川芎嗪在逆转AngⅡ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用。

醒脑静注射液对高血压脑梗死大鼠模型的神经保护作用

目的研究醒脑静注射液对大鼠高血压脑梗死的神经保护作用及其机制。方法采用双肾双夹肾血管进行高血压大鼠模型的制备,1个月后高血压大鼠模型制备成功,将动物随机分成3组,即假手术组、模型组、醒脑静给药组。然后采用改良的ZeaLonga法(改良的线栓法)制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血损伤模型,醒脑静给药组于缺血造模后4h腹腔注射醒脑静注射液(3mL/kg),每隔30min给药1次,共给药3次。假手术组和模型组于造模后30min给予等体积的生理盐水腹腔注射1次。造模后24h,采用Zea-Longa方法对大鼠进行神经功能缺损评分后,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)活性。结果脑缺血24h后,模型组大鼠神经功能评分与假手术组相比明显增高,醒脑静给药组较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。脑缺血后,模型组大鼠缺血脑组织中SOD、GSH-Px和MDA的活性较假手术组显著降低(P<0.05)。醒脑静给药组SOD、GSH-Px活性均高于模型组(P<0.05或P<0.01),MDA活性显著低于模型组(P<0.05)。结论醒脑静注射液能减轻神经损伤症状,降低脑组织MDA活性。增高脑组织中SOD、GSH-Px活性,能减轻脑缺血损伤,其机制可能与拮抗氧自由基损伤有关。

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠Rock1、Rock2表达的影响

目的观察扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠Rho A/Rock信号转导通路主要成员Rock1、Rock2表达的影响,探讨其改善心室重构心肌纤维化的可能机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎术制备急性心肌梗死模型,成模大鼠随机分为模型组、扶正化瘀胶囊组和盐酸法舒地尔组,另设假手术组只穿线不结扎作为对照,每组8只。造模后第2日开始给予相应药物干预,连续4周。免疫组化检测心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Rock1、Rock2 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,盐酸法舒地尔组和扶正化瘀胶囊组大鼠心肌组织Rock1、Rock2蛋白表达明显降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Rock1 mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,盐酸法舒地尔组大鼠心肌组织Rock1 mRNA表达明显降低(P<0.05),盐酸法舒地尔组和扶正化瘀方组大鼠心肌组织Rock2 mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论扶正化瘀胶囊通过降低心肌梗死大鼠梗死边缘区心肌组织Rock1、Rock2的表达,发挥其抗心室重构心肌纤维化的作用。

三七总皂苷对β-淀粉样蛋白42损伤脑微血管内皮细胞ZO-1表达的影响

目的观察三七总皂苷对β-淀粉样蛋白(Aβ)42损伤脑微血管内皮细胞ZO-1表达的影响,为阿尔茨海默病的对因治疗提供新的依据。方法细胞分为正常对照组、模型组和三七总皂苷低、中、高剂量组,37℃、5%CO2培养箱中培养24 h后,采用MTT比色法检测细胞活力,Western blot检测ZO-1蛋白表达。结果 Aβ42刺激后微血管内皮细胞活力降低(P<0.01),ZO-1蛋白表达被抑制(P<0.01);与模型组比较,三七总皂苷低、中、高剂量组微血管内皮细胞活力增加,其中三七总皂苷中、高剂量组增加较为明显,差异有统计学意义(P<0.05),ZO-1蛋白表达增加。结论三七总皂苷通过抑制Aβ42所致微血管内皮细胞活力降低,恢复血脑屏障的部分屏障功能。

芪蛭益肺药物血清对转化生长因子-β1刺激下肺成纤维细胞中基质金属蛋白酶及其抑制剂基因表达的影响

目的观察芪蛭益肺药物血清对肺成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9及其抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法采用胰酶消化法提取大鼠肺组织成纤维细胞,培养至第4代后随机分为空白血清组、模型组和药物血清组。模型组与药物血清组先滴加含0.0025μg/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)的DMEM,空白血清组滴加新鲜无血清DMEM,随后空白血清组、模型组滴加含5%空白血清的DMEM,药物血清组加入5%含芪蛭益肺药物血清的DMEM。培养48、72 h后,采用行实时荧光定量PCR法检测各组细胞MMP-9、TIMP-1 mRNA表达。结果与空白血清组比较,培养48 h后模型组和药物血清组成纤维细胞中MMP-9、TIMP-1 mRNA表达上升,差异有统计学意义(P<0.05),药物血清组和模型组之间比较差异无统计学意义。与空白血清组比较,培养72 h后模型组MMP-9 mRNA表达上升;与模型组比较,培养72 h后药物血清组MMP-9 mRNA表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05);TIMP-1 mRNA表达3组间比较差异无统计学意义。结论芪蛭益肺颗粒药物血清能够抑制TGF-β1刺激后肺成纤维细胞中MMP-9 mRNA高表达。

高血压合并脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9水平的变化及其危险因素分析

目的探讨高血压合并脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的变化及其危险因素分析。方法对34例高血压合并脑梗死患者(脑梗死组)和57例高血压患者(对照组)血清MMP-9水平进行检测,并对两组患者既往糖尿病史、血脂异常史、吸烟史及心脑血管病家族史进行调查和分析。结果脑梗死组血清MMP-9为(320.62±149.91)ng/ml,显著高于对照组[(191.17±115.64)ng/ml](P<0.01);逐步Logistic回归分析显示糖尿病史(OR5.064,95%CI:1.772～14.474)和吸烟史(OR5.616,95%CI:1.986～15.885)(均P<0.01)与脑梗死的发生密切相关。结论血清MMP-9水平、糖尿病史和吸烟史是高血压患者发生脑梗死的危险因素。

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的研究扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌缝隙连接蛋白43(connexin43,CX43)表达的影响。方法SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组以及扶正化瘀胶囊组和卡托普利组,每组各6只,采用结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死。术后10d开始灌胃给药,持续8周。用免疫组织化学方法观察心肌CX43表达的变化。结果在心肌梗死区域内,模型组与假手术组比较,CX43排列紊乱,阳性表达面积、平均光密度值和积分光密度均显著低于假手术组(P<0.01)。在梗死边缘区,扶正化瘀胶囊组CX43平均光密度值高于模型组(P<0.01),积分光密度高于模型组(P<0.05),CX43排列紊乱有所减轻,阳性表达面积与模型组无统计学意义。卡托普利组CX43平均光密度值高于模型组(P<0.01),积分光密度和阳性表达面积均高于模型组(P<0.05),CX43排列紊乱也有减轻。结论扶正化瘀胶囊能够部分改善心肌梗死大鼠心肌的CX43重构。

痰瘀型代谢综合征合并冠心病病人脂联素和胰岛素抵抗的关系

目的探讨痰瘀型代谢综合征(MS)及合并冠心病(CHD)病人血清脂联素和胰岛素抵抗(IR)的关系。方法酶联免疫吸附法测定痰瘀型单纯MS病人(16例)、MS合并CHD病人(17例)、健康对照者(14名)的脂联素和空腹血清胰岛素水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);收集MS合并CHD病人冠脉造影数据,计算Gensini积分。结果脂联素:MS组为(15.47±8.06)μg/mL和MS合并CHD组为(12.75±3.74)μg/mL,均显著低于健康对照组的(28.40±26.19)μg/mL,有统计学意义(P<0.01)。HOMA-IR分别为1.75±0.98、1.60±0.89,均显著高于健康对照组的1.02±0.15,有统计学意义(P<0.05)。脂联素与高血压呈负相关;HOMA-IR与糖尿病、高血压病呈正相关。以脂联素为因变量,显示性别、高血压病、高密度脂蛋白(HDL-C)与脂联素具有相关性。以Gensini积分为应变量的多元逐步线性回归分析提示,Gensini积分与脂联素相关(r 2=0.520,P=0.038)。结论痰瘀型MS合并CHD病人脂联素水平明显降低,且与冠脉狭窄程度明显相关,提示MS和CHD均存在IR,脂联素降低所引起的胰岛素抵抗加重了AS进展,在MS发展为CHD中起到了一定作用,而脂联素的水平可反映胰岛素抵抗和冠心病病情的严重程度,有一定的疾病诊断、预测价值。

基于网络药理学和分子对接探讨漏芦防治缺血性脑卒中的作用机制

目的基于网络药理学和分子对接技术探讨漏芦防治缺血性脑卒中的分子作用机制。方法通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP数据库)筛选并收集漏芦的有效活性成分,利用TCMSP、ETCM、Swiss Target Prediction、SymMap、CTD数据库检索并获取其对应的靶点。检索DisGeNET、TTD及Drugbank数据库中缺血性脑卒中相关的疾病靶点蛋白,再通过绘制韦恩图发现漏芦防治缺血性脑卒中的潜在作用靶标。药物-成分-疾病-靶点的互作网络可视化可通过Cytoscape软件构建,并根据网络拓扑参数进行关键靶点的筛选。利用DAVID数据库对上述关键靶点进行基因生物过程(GO)功能富集和信号通路(KEGG)富集分析。采用AutoDock软件对漏芦有效活性成分与其对应的核心靶点进行分子对接验证。结果共获取漏芦防治缺血性脑卒中的5种有效活性成分及118个潜在靶点,经Network Analyzer插件网络拓扑参数分析筛选后共获取44个关键靶点。GO富集分析共得到207个细胞生物过程条目、30个细胞组成条目以及35个分子功能条目;KEGG通路富集分析共获取76条信号通路。分子对接结果表明,漏芦有效活性成分与白蛋白(ALB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、半胱氨酸蛋白酶-3(CASP3)及丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)共5种核心靶点之间具有较好的结合活性。结论漏芦中的甘草素、β-谷甾醇、甘草苷等作用于ALB、IL-6、TNF、CASP3、MAPK1等靶点,调控TNF、低氧诱导因子、Toll样受体等信号通路发挥抑制炎症反应、抗氧化、调节免疫、促进血管新生和神经功能恢复等效应,从多方面起到防治缺血性脑卒中的作用。

清开灵注射液对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧模型紧密连接蛋白claudin-5的影响

目的观察缺氧对脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白claudin-5表达的影响及清开灵的干预作用。方法体外培养Balb/c小鼠脑微血管内皮细胞,分为正常组、模型组和清开灵小中大剂量组,采用氧糖剥夺24h模拟缺血损伤,荧光定量PCR法检测Claudin-5mRNA的转录水平,western blot法检测蛋白表达。结果缺氧损伤后,Claudin-5mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,清开灵小、中、大各剂量组都有改善趋势,其中小、大剂量对基因转录水平提高明显,中剂量对蛋白表达的增强更显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论清开灵通过调节紧密连接蛋白claudin-5表达,改善血脑屏障通透性从而阻抑脑缺血反应过程。

泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的研究中药泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)增殖的影响。方法利用体外细胞实验,通过人碱性成纤维生长因子和人表皮生长因子刺激细胞增殖,随机分为空白组、不同浓度泽兰水提物(LLST)组(320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL、2 560μg/mL、5120μg/mL)和不同浓度泽兰醇洗脱物(LLCX)组(40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL)。采用MTT法和流式细胞术分别测定细胞OD值、G0/G1期、S期、G2/M期和apoptosis期细胞百分比,观察泽兰不同浓度药液对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示泽兰LLST和LLCX 10个剂量均可抑制细胞增殖(P<0.05)。细胞周期结果显示:泽兰LLST 320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL浓度组和泽兰LLCX40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL浓度组的G0/G1期细胞百分比较空白组增高(P<0.05);S期细胞百分比较空白组降低(P<0.05)。抑制增殖作用的最佳药物浓度分别为1 240μg/mL和160μg/mL。结论中药泽兰具有抑制HCASMC增殖的活性。

中风病急性期“毒损脑络”相关性实验室指标研究

目的探索中风病急性期"毒损脑络"生物学指标的共性特点和存在形式。方法对65例发病72h以内的缺血性中风患者,观测其发病72h、14天高敏C反应蛋白(Hs-CRP)、白细胞血小板聚集、白介素-6(IL-6)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)指标。进行实验室指标间及年龄、性别、病程、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、简易智能量表(MMSE)评分的Spearman和Pearson相关分析。结果Hs-CRP、IL-6、OX-LDL之间具有良好的相关性,Hs-CRP、IL-6、OX-LDL、MMP-9与NIHSS呈正相关,Hs-CRP、OX-LDL与MMSE呈负相关。结论Hs-CRP、IL-6、OX-LDL能反映卒中神经功能缺损程度、智能损伤水平,指标之间具有很强关联性,可做为中风病急性期"毒损脑络"特征性大样本观察的实验室指标。

细胞培养实验中条件培养基相关问题探讨

目的:通过LX-2人肝星状细胞条件培养基(CM)对HepG2人肝癌细胞增殖活性的影响,探讨CM各影响因素在离体实验中的作用。方法:收集LX-2细胞第24小时、48小时、72小时条件培养基,设100%、50%、25%共3个浓度,并设1%DMEM组为对照,培养24小时、48小时、72小时;并将收集的第24小时条件培养基分装分别保存至4℃1周、-20℃1周、-80℃3个月、-20℃3个月,采用MTT法检测各组条件培养基对HepG2细胞增殖活性的影响。结果:①收集时间:第24小时、第48小时LX-2CM具有明显的促增殖作用(P<0.01);培养24小时后,各收集时间点的LX-2CM的促增殖作用为:第24小时>第48小时>第72小时(P<0.01);培养48小时后,第48小时>第72小时(P<0.01)。②添加浓度:培养24小时后,第24小时CM100%浓度、第24小时CM50%浓度、第24小时CM25%浓度、第48小时CM100%浓度均有明显的促增殖作用(P<0.01);第24小时CM各浓度比较,100%优于50%(P<0.05);第48小时CM各浓度,100%优于50%(P<0.05)、25%(P<0.01)。③多元线性回归分析,条件培养基收集时间与HepG2细胞增殖呈负相关,浓度与其呈正相关。④保存条件:-20℃1周CM优于-80℃3个月CM、-20℃3个月CM(P<0.01);-80℃3个月CM优于-20℃3个月CM(P<0.01)。结论:LX-2CM对HepG2细胞具有明显的促进增殖活性作用,其作用随着收集时间点延长、浓度减小,增殖效果逐渐降低;CM的保存条件对其作用效果有影响。

原发性高血压患者血液炎症状态下的血小板聚集功能及其相关中医证候的研究

目的探讨高血压不同危险分层患者血液炎症状态下的血小板聚集功能及其相关中医证候特点。方法检测124例原发性高血压(EH)不同危险分层患者的高敏C反应蛋白(Hs-CRP)及血小板-白细胞聚集(全血PAgT)等指标,同时进行患者中医临床证候的判别,对其相关指标进行描述性统计及差异性检验,研究各危险分层患者血清Hs-CRP及全血PAgT水平及其与中医证候的相关性。结果中、高危组及无心脑血管梗塞发生史的甚高危Ⅰ组人群Hs-CRP水平明显低于急性缺血性事件组,差异有统计学意义(P<0.05);中、高危组人群全血PAgT水平明显低于急性缺血性事件组(P<0.05);与曾有心脑血管梗塞发生的甚高危Ⅱ组比较,各组、各指标差异无统计学意义(P>0.05);与无证可辨和虚证患者相比,实证与虚实相兼者Hs-CRP水平明显增高(P<0.05)。结论EH的危险分层与Hs-CRP、全血PAgT显著相关,中危及以上危险人群Hs-CRP与全血PAgT处于相对高水平状态,反映炎症及血小板聚集水平较高,可能易发生血栓事件,应早期预防。

高血压病患者血清白介素6对缺血性中风诊断和辨证的临床意义探讨

目的探讨高血压病患者血清白介素6(interleukin-6,IL-6)检测对辅助缺血性中风诊断和辨证的临床意义。方法检测189例原发性高血压病患者的血清IL-6浓度。比较合并和未合并缺血性中风两个亚组的IL-6浓度差异,运用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价IL-6对辅助缺血性中风诊断的临床意义。分析不同IL-6浓度下的中医证候差异,并通过相关分析来探讨IL-6与中医证候之间的关系。结果高血压合并缺血性中风组的血清IL-6浓度[中位数(25%位数,75%位数)]显著高于未合并中风组[21.47(5.52,45.44)vs 2.92(1.68,4.67)pg/m L,P<0.01]。高血压病患者血清IL-6诊断缺血性中风的ROC曲线下面积为0.784(P<0.01),最佳临界值为10.10 pg/m L,对应的敏感度为72.1%,特异度为88.4%。与IL-6低浓度组比较,IL-6高浓度组的痰证出现率高,虚证出现率低(P<0.01)。相关分析显示,血清IL-6与痰证之间存在正相关关系(r=0.404,P<0.01)。结论高血压病患者血清IL-6浓度对辅助缺血性中风诊断和痰证辨证具有一定参考意义。

心肌细胞系H9c2缺氧上清诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-2的表达

目的探讨心肌细胞H9c2的缺氧培养上清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-2(ICAM-2)表达的影响及其分子机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2在氧浓度为1%的条件下缺氧培养24 h后收集上清,用于HUVEC培养。收集不同时间点HUVEC细胞,提取总RNA和总蛋白,RT-PCR方法检测ICAM-2 mRNA表达,Western杂交方法检测ICAM-2蛋白表达。适当浓度细胞因子孵育HUVEC 6 h,收集细胞提取总蛋白,Western杂交方法检测ICAM-2蛋白表达。ELISA方法测定H9c2缺氧培养上清和常氧培养上清的PDGF-BB和PDGF-AB浓度。结果在mRNA水平,HUVEC在H9c2缺氧培养上清孵育1 h后ICAM-2的表达明显升高,3 h后达到最高;同时在HUVEC表达ICAM-2蛋白在3 h、6 h明显增高。细胞因子刺激实验表明PDGF-BB和PDGF-AB可以使HUVEC表达ICAM-2显著增加。在缺氧上清中PDGF-BB有显著性增加(P<0.05),而缺氧上清中的PDGF-AB却有显著减少(P<0.01)。结论心肌细胞系H9c2的缺氧培养上清可以诱导内皮细胞HUVEC表达ICAM-2,H9c2在缺氧条件下产生的因子PDGF-BB可能是其中起作用的物质。