牛奶中三种糖醇类甜味剂的气相色谱测定及前处理方法研究

利用冷冻干燥处理与毛细管气相色谱外标法测定牛奶中的糖醇类甜味剂。牛奶用乙酸锌和氢氧化钡除去蛋白质后,经冷冻干燥,样品中的糖醇与吡啶-乙酸酐（1∶1,v/v）于90℃反应30min,生成的糖醇乙酰酯衍生物经HP-5毛细管柱色谱分离,氢火焰离子化检测器检测。结果表明：与旋转蒸发相比,冷冻干燥处理样品的回收率更高。在优化的色谱条件下,本方法在10~90μg/m L范围内线性关系良好（r=0.9974~0.9999）,重复性好（RSD=1.37%~2.04%）,平均加标回收率在91.17%~92.06%之间。该方法简单、快速、灵敏,适用于牛奶中糖醇类甜味剂含量的测定。

基质蛋白第221、226位氨基酸位点发生突变的重组水泡性口炎病毒构建和致病性研究

重组水泡性口炎病毒（vesicular stomatitis virus,VSV）是一种具有良好应用前景的病毒载体,可用于制备疫苗和治疗肿瘤,但该载体可导致实验动物产生神经毒性,因此其使用仍存在安全性问题。为减低乃至去除野生型VSV的致病性,对该病毒基质蛋白M的第221、226位氨基酸进行了定点突变,制备了新型重组VSV,并围绕新型重组病毒的致病性展开了体外和体内试验。在体外试验中,221、226双位点突变重组VSV病毒（VSVM221,226）的复制能力相比野生型VSV（VSVXN2）降低可达20倍,且激发IFN-β达（871±1.3）pg/m L。在体内试验中,接种VSVM221,226小鼠体重下降仅约（8.9±0.2）%和（12.3±0.4）%,而接种VSVXN2小鼠体重下降高达（32.6±0.5）%和（30±2）%,且有死亡现象发生。试验结果表明,相比VSVXN2以及221、226单位点突变VSV,VSVM221,226的致病性显著降低,其致弱效应可能是由于病毒感染有效激活宿主细胞产生Ⅰ型干扰素所致。VSVM221,226有希望成为一个安全、有效的疫苗载体。