高效液相色谱法测定氟比洛芬中4种基因毒性杂质

目的建立高效液相色谱法测定氟比洛芬中基因毒性杂质:2-氟苯胺、4-溴-2-氟乙酰苯胺、4-溴-2-氟苯胺和4-溴-2-氟联苯。方法采用Phenomenex Kinetex F5100A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水-冰醋酸(体积比30∶65∶5)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为1.2 mL·min^(-1),检测波长为254 nm,进样体积10μL,柱温为35℃。结果2-氟苯胺、4-溴-2-氟乙酰苯胺、4-溴-2-氟苯胺和4-溴-2-氟联苯的检测下限分别为5.987、3.198、6.408,3.199 mg·L^(-1),分别在质量浓度19.96~2235(r=0.993)、10.66~2387(r=0.999)、21.36~2392(r=0.999)和10.66~2388 mg·L^(-1)(r=0.999)内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为100.5%、100.2%、101.4%和97.9%(n=9),加样回收率良好,对照品和供试品加标溶液在24 h内稳定性良好。三批次样品中基因毒性杂质均符合限度要求。结论所建立的方法简单,定量准确,专属性较好,适用于氟比洛芬中基因毒性杂质2-氟苯胺、4-溴-2-氟乙酰苯胺、4-溴-2-氟苯胺和4-溴-2-氟联苯的测定。

米泔水制桔梗优势菌的分离鉴定及纯种发酵桔梗对桔梗皂苷D含量的影响

分离鉴定米泔水制桔梗炮制液中的优势菌,考察各优势菌发酵桔梗对桔梗皂苷D含量的影响。用米泔水炮制桔梗,利用MRS培养基分离纯化炮制液中的优势菌,通过革兰氏染色、过氧化氢酶实验及16S rDNA测序技术鉴定分离的菌株,采用单菌种发酵桔梗,通过HPLC法测定桔梗皂苷D的含量。分离获得3株乳酸菌,分别为食窦魏斯氏菌、肠球菌和假肠膜明串珠菌,3株菌纯种发酵桔梗,桔梗皂苷D的含量均高于未发酵桔梗,其中前两株菌发酵桔梗提取液中桔梗皂苷D含量分别提高了8.19%和10.72%。米泔水制桔梗炮制液中以乳酸菌为优势菌群,纯种发酵桔梗提高了桔梗皂苷D的含量,推测米泔水制桔梗过程中可能存在微生物转化进而增强其活性。

桔梗经米泔水炮制后挥发性成分及桔梗皂苷D的含量变化

目的:考察桔梗经米泔水炮制后挥发性成分及桔梗皂苷D的含量变化。方法:将桔梗生制饮片与米泔水按照100 g∶600 mL配比加入同一容器中于28℃浸泡24 h,烘干,得到桔梗炮制品,采用气相色谱-质谱测定桔梗生品及炮制品挥发油化学成分,采用高效液相色谱法测定桔梗皂苷D的含量。结果:在桔梗生品中检出22个化学成分,占挥发油总量的69.94%;在桔梗炮制品中检出20个化学成分,占挥发油总量的89.11%。生品和炮制品共有化合物11个,炮制后桔梗中新增9个化合物,减少11个化合物,共有化合物中除正三十一烷相对含量降低外,亚油酸等其他成分相对含量均有不同程度升高。桔梗经米泔水炮制后桔梗皂苷D含量明显增加。结论:米泔水炮制桔梗改变了挥发性成分及桔梗皂苷D的含量。

诺卡菌属菌株04-5195发酵产物5195B的分离鉴定及其体外抗骨质疏松活性研究

近年来研究证实，增强成骨细胞作用、改善骨质形成代谢、促进骨质形成是治疗骨质疏松新的更为重要的途径。成骨细胞的增殖和分化受多种因素调节，其中骨形态形成蛋白家族尤其是骨形态形成蛋白II（BMP2）在成骨细胞分化过程中起着关键作用，其作为骨形成诱导因子有望成为骨质疏松治疗的新靶点。

参豉糖蛋白提取工艺优化及纤溶活性研究

[目的]对参豉中糖蛋白的提取工艺进行考察,并对其纤溶活性进行评价。[方法]以糖蛋白提取率为指标,通过单因素法考察缓冲液、提取温度、料液比、提取时间和提取次数对其的影响,并运用响应面法分析优化参豉糖蛋白的提取工艺,采用蒽酮-硫酸法测定糖蛋白中多糖含量,SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳确定糖蛋白的分子量,利用琼脂糖纤维蛋白平板法测定纤溶活性。[结果]缓冲液、提取时间和料液比对糖蛋白提取率影响较大;响应面法优化获得参豉糖蛋白的最佳提取工艺条件为Tris-Base-NaCl缓冲溶液(pH=8.04)、料液比1∶10(g∶mL),于4℃提取6 h,参豉糖蛋白提取率为4.85%,其中多糖含量为12.34%;SDS-PAGE、Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,参豉糖蛋白分子量为4.1~27.0 kD;与豆豉糖蛋白相比,参豉糖蛋白纤溶活性提高了40.6%。[结论]经验证利用响应面法分析测得参豉糖蛋白与模型预测值接近,可用于参豉糖蛋白的提取,且参豉糖蛋白具有较高的纤溶活性,为其进一步开发利用提供依据。

HPLC法测定前列地尔注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量

研究了HPLC-ELSD法测定前列地尔注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量。采用低温型蒸发光散射检测器(雾化气为氮气,雾化气压力为25 psi,漂移管温度为40℃),Ultimate Diol色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.5∶0.05)为流动相A,以正己烷-异丙醇-流动相A(20∶48∶32)为流动相B,柱温为40℃,梯度洗脱。结果表明:溶血磷脂酰胆碱在0.02~0.20 mg·mL^(-1)(R=0.9999,n=6),溶血磷脂酰乙醇胺在0.01~0.1 mg·mL^(-1)(r=0.9998,n=6)成良好线性关系;定量限分别0.02 mg·mL^(-1)和0.01 mg·mL^(-1),检测限分别为0.006 mg·mL^(-1)和0.003 mg·mL^(-1);平均回收率(n=9)分别为101.4%(RSD=2.4%)和98.8%(RSD=1.9%)。所建立的HPLC方法可用于前列地尔注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺含量的测定。

发酵桑叶糖蛋白提取工艺优化及活性研究

目的筛选发酵桑叶糖蛋白(FMLGP)的最佳提取工艺并评价其活性。方法以蛋白浓度为指标,采用单因素结合响应面法优化FMLGP提取工艺;通过琼脂糖纤维蛋白平板法检测纤溶活性;利用ox-LDL诱导巨噬细胞RAW264.7泡沫化,实验分为空白组、模型组和FMLGP高、中、低剂量组(终浓度分别为15、10、5 mg/ml),细胞培养24 h,采用油红染色法考察各组细胞内脂质蓄积程度。结果FMLGP最佳提取条件为PBS缓冲液、料液比1∶6 g/ml、于25℃提取4 h,蛋白浓度为(57.92±1.14)mg/ml,纤溶活性为(1780.66±76.49)IU/ml,15 mg/ml FMLGP对巨噬泡沫细胞有明显促进脂质排出作用。结论本研究确定了FMLGP的最佳提取工艺,通过纤溶活性及巨噬细胞泡沫化实验提示FMLGP具有促进脂质排出作用。

腹腔镜结合内异消癥汤治疗子宫内膜异位症不孕的效果

目的 研究子宫内膜异位症不孕采取腹腔镜结合内异消癥汤治疗产生的效果。方法 选择宣威市中医医院2020年1月-2022年1月接收的42例子宫内膜异位症不孕患者为研究对象,将其按照电脑盲选方式平分为两组,即对照组(采取腹腔镜结合基础治疗);观察组(在对照组基础上加入内异消癥汤治疗),并分析两种方式的治疗效果。结果 观察组治疗后总有效率明显更高,复发率明显更低,妊娠率明显更高,不良反应发生率明显更低,以上均为差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组躯体功能、社会功能、情绪角色和心理卫生评分明显更高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血清CA125水平明显更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 腹腔镜结合内异消癥汤治疗子宫内膜异位症不孕能够提高妊娠率,改善血清CA125水平,提高生活质量,治疗效果较佳,并且治疗安全性也较高,值得临床重视并采纳。

新冠肺炎疫情发展不同时期血液透析患者心理状态及护理对策

目的:探讨新冠肺炎疫情发展不同时期血液透析(以下简称血透)患者心理状态及护理对策。方法:将2020年1月20日~3月27日疫情发展期间分为初期、高峰期、稳定控制期,梳理85例血透患者对疫情事件产生的不同心理状态,总结针对性护理对策。结果:血透患者在疫情发展的不同时期分别呈现漠视、不相信事实,恐惧、过度紧张害怕,放松、懈怠的心理,实施针对性护理对策前后患者焦虑程度和焦虑总得分比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在新冠肺炎疫情不同发展时期,护理人员应及时进行针对性干预措施,帮助患者正确面对疫情,顺利完成血透。

黄瓜籽总皂苷对MC3T3-E1细胞分化及SPARC、OPG/RANKL表达的影响

目的观察黄瓜籽总皂苷提取物(cucumber seed saponins,CSS)对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响,以及与骨质疏松相关的SPARC、OPG/RANKL/RANK信号通路的作用。方法通过MTT实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测、茜素红染色,考察不同浓度CSS对MC3T3-E1细胞增殖、分化及矿化的影响;采用RT-PCR方法检测SPARC、OPG/RANKL mRNA表达水平;Western blot检测SPARC、OPG/RANKL的蛋白表达量。结果与阳性对照组相比,CSS能明显促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05),CSS高、中剂量组能明显提高MC3T3-E1细胞ALP活性及钙化结节数量(P<0.05);与空白组相比,CSS不同剂量组均明显上调SPARC、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)。结论黄瓜籽总皂苷能够促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化及矿化能力,并通过上调SPARC、OPG/RANKL的表达水平提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。

治未病思想在卵巢早衰防治的应用探讨

治未病"思想初见于《黄帝内经》,在养生、亚健康的纠正和疾病预防等方面发挥着重要作用。卵巢早衰是指卵巢过早衰竭而引发的一系列绝经及围绝经期症状,随着卵巢疾病的增多,越来越多的女性面临卵巢过度早衰带来的不孕不育和围绝经期综合征带来的困扰,影响女性患者的身心健康。然而,卵巢功能受损早期并非不可逆的,中医药疗法在卵巢早衰的缓解和治疗方面具有优势。在"治未病"思想指导下,卵巢早衰若做到早期发现、早期干预治疗,可预防和延缓卵巢功能衰竭,减少卵巢早衰的临床症状和并发症,提高卵巢早衰患者的生活质量。

黄瓜籽总黄酮对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响

目的探讨黄瓜籽总黄酮提取物(cucumber seed flavonoids,CSF)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,以及对富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)/核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B,RANK)信号通路的作用。方法通过噻唑蓝(MTT)实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测、茜素红染色,考察不同浓度CSF对MC3T3-E1细胞增殖、分化及矿化的影响;采用RT-PCR方法检测SPARC、OPG/RANKL mRNA表达水平;Western blot检测OPG/RANKL的蛋白表达量。结果CSF高、中剂量组能够明显提高细胞增殖率(P<0.05),分别为阳性对照组的1.92和1.77倍;CSF高、中剂量组ALP活性为(2.756±0.073)和(1.961±0.107)U/mL,明显高于阳性对照组(0.453±0.029)U/mL(P<0.05);CSF高、中剂量组钙化结节面积为(34.899±0.811)和(22.112±0.914)mm 2/10个视野,与阳性对照组(16.577±0.649)mm 2/10个视野相比明显增加(P<0.05);与空白组相比,CSF高、中剂量组在不同时间点均明显上调SPARC、OPG/RANKL mRNA表达量,并促进OPG/RANKL蛋白表达水平(P<0.05)。结论黄瓜籽总黄酮类成分能够促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化及矿化能力,并通过上调SPARC、OPG/RANKL的表达水平提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。

淡豆豉和豆豉纯种发酵过程中游离氨基酸的含量变化

研究淡豆豉和豆豉纯种发酵过程中17种游离氨基酸的含量变化,为其工艺优化和质量标准提升提供依据。以伞枝梨头霉为发酵菌株制备淡豆豉和豆豉,分别于0、6、12、24、48、72、120、168 h取样,采用AccQ·Tag柱前衍生-高效液相色谱法测定17种游离氨基酸含量。结果显示,随着发酵时间延长,精氨酸和丝氨酸的含量由原来的3.885、0.836 mg/g降低至0.209、0.337 mg/g,脯氨酸、组氨酸、谷氨酸和甘氨酸的含量升高2~5倍,其余氨基酸未发生明显变化。本研究明确了淡豆豉和豆豉纯种发酵过程中游离氨基酸的含量变化,为后续药效研究提供参考。

不同产地淡豆豉优势发酵菌群的筛选及酶活性分析

目的:为淡豆豉生产标准化提供参考。方法:分别采集黑龙江、河北、甘肃、山东、安徽、云南等6个产地的淡豆豉,以青蒿、桑叶选择性培养基培养发酵菌,分别采用福林酚法、纤维蛋白平板法、对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷显色法测定菌株的蛋白酶、纤溶酶、β-葡萄糖苷酶活性以筛选发酵优势菌。结果:从6个产地淡豆豉中共分离出14个野生型菌株,包括3株细菌和11株霉菌。其中,从黑龙江产淡豆豉中分离出杆状细菌1株和毛霉菌1株;从河北产淡豆豉中分离出毛霉菌2株和杆状细菌1株;从甘肃产淡豆豉中分离出毛霉菌1株、青霉菌1株、微球菌1株、曲霉菌1株;从山东产淡豆豉中分离出毛霉菌2株;从安徽产淡豆豉中分离出毛霉菌1株和曲霉菌1株;从云南产淡豆豉中仅分离出毛霉菌1株。根据菌种类别及酶活性测定结果分析,初步判定其中的1号杆状细菌、9号曲霉菌、11号和14号毛霉菌为优势发酵菌,4种菌的3种酶总活性分别为22.77、25.49、41.32、39.13 U/g。结论:不同产地淡豆豉中发酵菌有所不同,通过酶活性分析可初步筛选出优势发酵菌。

教师如何写数学作业评语

教师评语,是一种作业批阅的方式,便于学生更清楚地了解自己作业中的优缺点,还可加强师生间的交流,促进学生各方面和谐统一的进步。本文作者将评语引入数学作业的批改中,指出其不足,肯定其成绩,调动了学生的学习积极性,取得了较好的效果。

人参豆豉的发酵工艺及人参皂苷生物转化研究

以人参和黄豆为发酵基质制备人参豆豉(简称参豉),以纤溶酶活性为评价指标,通过考察发酵菌株、黄豆与人参比例、人参加入方式、发酵温度和发酵时间等因素确定其最佳发酵工艺,并利用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析参豉发酵前后人参皂苷的变化。结果表明,参豉的最佳发酵工艺为黄豆与人参比例10∶1(g∶g),人参以水提液方式加入,优势发酵菌DC-1,发酵温度28℃,发酵时间96 h。在此最佳条件下,纤溶酶活力为(498.90±28.33)IU/g,参豉发酵后原有人参皂苷成分发生了明显变化,人参皂苷转化率>60%。

中医药治疗绝经综合征的优势探讨

绝经综合征指妇女在绝经前后出现性激素波动或减少所致的一系列躯体及精神心理症状。绝经综合征具有多系统、多样化的特点,绝经综合征发病率高,发病人群多,持续时间长,严重影响着围绝经期女性的身心健康及生活质量。中医药治疗绝经综合征在改善绝经期症状,辨证治疗,随症加减,治疗个性化,提高患者生活质量方面疗效显著,患者接受程度高,药物灵活,不良反应少,用药依赖性小,体现出中医治疗的优势和特色。