社交互动的杏仁核神经回路研究进展:从微回路到输入输出回路

社交互动是动物必不可少的复杂行为,对动物的生存和繁衍至关重要。诸如杏仁核(AMG)、内侧前额叶皮层(mPFC)、海马等社交脑区域,以及它们相互间形成的神经回路均参与了社交互动行为调控。神经微回路、神经回路构成复杂大脑的连接单元,虽然社交互动相关神经回路已被多方报道,但依旧缺乏其微回路、输入输出回路的系统报道。因此,本文基于杏仁核脑区,从分子、细胞和网络层面解析其社交互动的微回路和输入/输出回路,旨在为社交互动的神经机制提供回路证据,为社交互动障碍提供神经回路诊疗依据。

木犀草素预处理对H_2O_2诱导大鼠心肌H9C2细胞损伤的保护机制研究

为了探讨木犀草素能否通过再灌注损伤挽救激酶(Reperfusion injury salvage kinase,RISK)细胞信号通路发挥抗心肌氧化应激损伤保护作用,本实验分别用1、50、100、150μmol/L的木犀草素预处理大鼠心肌来源的H9c2细胞,再使用650μmol/L的H_2O_2制作氧化应激损伤模型。利用MTT法(四甲基偶氮唑盐比色法)检测细胞存活率,然后用最适浓度的木犀草素预处理H9c2细胞并利用激光共聚焦显微镜技术检测线粒体膜电位,Western blot检测P-ERK1/2、P-Akt、P-GSK-3β以及凋亡相关蛋白细胞色素C。最后我们发现不同浓度的木犀草素预处理均能提高细胞存活率,其中在100μmol/L时达到最佳效应。与H_2O_2组相比,100μmol/L的木犀草素预处理可以使TMRE(四甲基罗丹明乙酯)强度降低程度明显减轻,对抗H_2O_2引起的细胞氧化损伤。同时木犀草素预处理可以降低细胞色素C表达,使P-GSK-3β、P-Akt、P-ERK1/2表达升高,渥曼青霉素(PI3K抑制剂)和PD98059(ERK1/2抑制剂)可以阻断这种作用。因此我们认为木犀草素预处理可以减轻H_2O_2引起的氧化应激损伤,这一作用可能是通过RISK信号通路增加P-GSK-3β表达,抑制m PTP开放实现的。

线粒体通透性转换孔在天麻素抗心肌细胞氧化应激损伤中的作用

目的探讨H9c2心肌细胞发生氧化应激损伤时,线粒体膜上的线粒体通透性转换孔(mPTP)在天麻素抗氧化应激损伤的保护机制中所发挥的作用。方法本实验分为6组:正常组,过氧化氢组,天麻素+过氧化氢组,天麻素组,环孢菌素A组,环孢菌素A+天麻素+过氧化氢组。通过加入环孢菌素A(mPTP开放剂)观察天麻素的保护作用是否被抑制。用MTT法初步检测各组细胞存活率,采用Annexin V-FITC/PI双染法通过流式细胞仪观察细胞早期凋亡率,大鼠三磷酸腺苷(ATP)试剂盒检测ATP的含量,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)的含量,激光扫描共聚焦显微镜观察Jc-1标记的线粒体膜电位,Western blot检测细胞内细胞色素C(Cyt C)含量,Caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3的酶活性。结果环孢菌素A+天麻素+过氧化氢组线粒体的相对膜电位低于天麻素+过氧化氢组(1.98±0.18 vs 3.08±0.14),差异有统计学意义(P=0.014)。环孢菌素A可以阻断氧化应激时天麻素降低细胞内活性氧和相关凋亡因子的含量、抑制相关因子活性的作用(P<0.05),并且在一定程度上阻断了天麻素的抗凋亡作用(5.77±0.75)%vs(1.97±0.82)%,两者差异有统计学意义(P<0.001)。结论天麻素可以通过抑制心肌细胞发生氧化应激损伤时mPTP的开放,最终通过减少凋亡来发挥一定的抗氧化应激损伤的作用。

癌易感性候选基因2通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞增殖及迁移的影响

目的在甲状腺乳头状癌细胞中lncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)与NF-κB信号通路的关系研究较少。文中旨在探讨lncRNA CASC2a通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖、迁移的影响。方法选取TPC-1,构建lncRNA CASC2a过表达质粒,分为质粒组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、空载组[转染等量pcDNA3.1(+)空载质粒]、空白组(未做任何处理)。检测过表达lncRNA CASC2a对各组TPC-1细胞中CASC2a表达的影响。选取转染后的质粒组细胞,随机分为转染组[只转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、转染+PMA组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a+丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)刺激]、对照组(未做任何处理)、PMA组(只增加PMA刺激),通过CCK-8、细胞划痕实验验证24、48、72、96 h时lncRNA CASC2a对细胞增殖、迁移能力的影响。Western blot检测NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达,并通过给与NF-κB信号通路激动剂PMA观察NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达情况。结果转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a后,质粒组细胞中CASC2a的表达量明显高于空载组(P<0.05)。转染+PMA组24 h时细胞增殖能力(0.191±0.005)明显低于转染组(0.217±0.013)、PMA组(0.247±0.009)、对照组(0.260±0.004),差异有统计学意义(P<0.01);转染组亦明显低于PMA组和对照组(P<0.01)。转染+PMA组的细胞迁移能力([0.208±0.109)%]低于转染组([1.775±0.061)%]、PMA组([1.622±0.519)%]、对照组([2.927±0.136)%],差异有统计学意义(P<0.05),转染组、PMA组低于对照组(P<0.05)。质粒组p105/p50、p65蛋白相对表达量明显低于空白组(P<0.05)。转染+PMA组p105/p50、p65蛋白表达量([0.674±0.007)、(0.713±0.014)]较转染组([0.581±0.003)、(0.570±0.012)]明显增加(P<0.05)。结论lncRNA CASC2a可能通过NF-κB信号通路抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖和迁移能力。

3-溴丙酮酸对人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察3-溴丙酮酸对体外人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法分别用含0、20、40、60、80、100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h后,MTT检测细胞增殖活性。含0、100和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h或48 h后,划痕实验及transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9、人源葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut1)和Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶(membrane-type 1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)的表达水平。结果100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸均抑制TPC-1细胞的增殖活性,呈剂量依赖性(均P<0.01)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,随着药物浓度的增高,TPC-1细胞迁移越慢,侵袭细胞越少(均P<0.05)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,TPC-1细胞内Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9表达水平均随药物浓度增高而减弱(均P<0.05)。结论3-溴丙酮酸可抑制TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并可能与下调Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。

正棋山游记

早就听说正棋山是一座神奇的山，有“仙人颐园”之称，而且这里有很多关于神仙的传说，我对它神往已久，决定前往一游。

银杏内酯B抗心肌氧化应激损伤作用机制研究

目的:探讨银杏内酯B能否减轻氧化应激引起的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤及其机制。方法:首先使用过氧化氢H2O2(650μmol/L)处理H9c2心肌细胞,建立氧化应激损伤模型,分别使用15. 0、30. 0、60. 0和120. 0μmol/L银杏内酯B预处理20min,利用MTT比色法检测细胞存活状况,荧光酶标仪检测线粒体膜电位的变化,Western blot检测银杏内酯B对糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、蛋白激酶-B(Akt)蛋白磷酸化的影响。结果:与对照组比较,不同浓度的银杏内酯B预处理使细胞存活率升高,且当银杏内酯B浓度为60. 0μmol/L时效果最佳,银杏内酯B(60. 0μmol/L)预处理使线粒体膜电位(△Ψm)以及GSK-3β和Akt蛋白磷酸化水平升高。结论:银杏内酯B可能是通过PI3K/Akt途径抑制GSK-3β活性、减少m PTP开放,从而减轻氧化应激引起的心肌细胞损伤。

基于Miseq测序技术分析脑缺血对大鼠肠道菌群多样性的相关作用

目的:研究脑缺血对肠道菌多样性的相关作用。方法:将6只身体状况相似的雄性大鼠随机分为3组:对照组、双侧颈动脉结扎3d组、双侧颈动脉结扎7d组,每组2只,待实验操作结束后分别取其粪便,多次进行实验并基于Miseq方法测序分析。结果:肠道微生物测序合理,脑缺血可导致大鼠OTUS组成变化与Alpha水平多样性的失调,其样品中厚壁菌门等丰度降低,而拟杆菌、变形杆菌及一些未分类菌群数目上升,且随结扎天数越多,其变化更为明显,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑缺血导致肠道菌群的丰富度和多样性发生变化,这种变化可使有益菌多样性及丰度下降,有害菌及未分类的细菌多样性及丰度上升。

基于16S rRNA测序技术对阿尔茨海默病大鼠肠道菌群的分析

目的研究阿尔茨海默病大鼠肠道菌群的变化,观察菌群组成变化。方法将30只大小、年龄、体质量相似的大鼠应用阿尔茨海默病造模方法,并且在造模内28 d监测其体质量、血糖、血压的变化,对变化不稳定的大鼠进行淘汰,应用Morris水迷宫测试方法将其分为3组,分别为对照组、轻症模型组、重症模型组,每组6只。提取对照组、轻症模型组和重症模型组大鼠的粪便样本,进行16S rRNA测序检测,并进行物种组成分析、Alpha多样性分析、Beta多样性分析和关联网络分析。结果在门水平上模型组中硬壁菌门(Firmicutes)、螺旋体门(Spirochetes)丰度降低,而拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度上升,在属水平上以普雷沃氏菌属(Prevotella)和乳杆菌属(Lactobacillus)变化最为明显。阿尔茨海默病大鼠的肠道菌群多样性和丰富度明显改变。结论重症模型组与轻症模型组肠道菌群发生改变,包括多样性和丰富度组成变化,且轻症模型组与重症模型组之间也存在差异。

离心速率对大鼠心肌细胞线粒体提取质量的影响

①目的探讨不同提取方案对心肌细胞线粒体质量的影响。②方法在体外用Langendorff法灌注雄性Wistar大鼠心脏,取左心室组织并分离线粒体; Western blot法检测确定分离线粒体的纯度,透射电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)检测分离线粒体的结构形态,线粒体呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR)测定分离线粒体的功能。③结果当分离转速为3500g时,与12000g相比,分离得到的线粒体Tubulin蛋白和COXⅣ蛋白表达均较低,表明低转速能够提高分离线粒体的纯度。与此结果一致,电镜结果显示与3500g组相比,12000g组可见较多微丝微管结构及线粒体内外膜分离。与12000g组相比,3500g组Ⅲ态呼吸及RCR值明显增高,表明低转速分离获得的线粒体呼吸功能增强。④结论低转速不仅可以提高分离线粒体的纯度,而且有利于维持分离线粒体的正常结构和功能。

腺苷A2受体活化对缺血性疾病的防治作用研究进展

腺昔，即腺嘌呤核苷，是重要的生物活性物质，大量研究发现腺苷通过激活腺苷受体，参与多种疾病的防治过程。截至目前，腺苷受体已克隆出A1，A2a，A2b和A3四种亚型，他们均可与腺苷结合并启动下游的信号传导机制，对机体产生不同的效应。现综述腺昔A2受体的分布、活化及其在疾病防治中的作用及机制综述。

去甲咔咯的合成及其衍生化反应的进展

近年来,去甲咔咯由于显著的顺磁环电流、高单分子电导率、狭窄的HOMO-LUMO能隙、稳定的氧化还原性能以及特有的化学反应性,引起了科研工作者的广泛关注.综述了近些年去甲咔咯的不同合成方法,重点阐述了在插入、取代、氧化还原、延伸π共轭体系四个方面的衍生化反应,同时对去甲咔咯的发展进行了展望.