[目的]研究miR-18a在非小细胞肺癌转移过程中的作用及其机制,以期为非小细胞肺癌治疗提供新思路。[方法]通过实时定量聚合酶链反应分析非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达水平;miR-18a mimic、mimic Con、miR-18a inhibitor和inhibitor ...[目的]研究miR-18a在非小细胞肺癌转移过程中的作用及其机制,以期为非小细胞肺癌治疗提供新思路。[方法]通过实时定量聚合酶链反应分析非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达水平;miR-18a mimic、mimic Con、miR-18a inhibitor和inhibitor Con转染至细胞,孵育48 h后,通过蛋白免疫印迹、MTT和transwell实验分析miR-18a对A549细胞增殖、迁移的影响。通过双荧光素酶报告基因分析miR-18a与PI3K的靶向作用。最后通过同时干扰miR-18a和PI3K的表达研究miR-18a与PI3K/AKT信号通路在A549细胞转移中的作用。[结果]miR-18a在肿瘤组织中的平均表达水平高于邻近正常组织(1.75±0.13 vs 0.62±0.11,P<0.01)。miR-18a在癌细胞系中的表达水平均高于正常细胞系中的水平(1.35±0.03 vs 0.53±0.07,P<0.01)。miR-18a能够促进A549细胞迁移和增殖(250.15±10.12 vs 101.12±10.03;1.51±0.02 vs 0.63±0.03,P<0.01),并增加Ki-67蛋白的表达水平(0.85±0.02 vs 0.43±0.06,P<0.01)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,miR-18a靶向调控PI3K的表达,并且miR-18a能够通过PI3K/AKT通路影响A549细胞的体外转移活性。[结论]PI3K是miR-18a的直接靶点,miR-18a通过PI3K/AKT信号通路促进非小细胞肺癌细胞的体外转移活性。展开更多
文摘[目的]研究miR-18a在非小细胞肺癌转移过程中的作用及其机制,以期为非小细胞肺癌治疗提供新思路。[方法]通过实时定量聚合酶链反应分析非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达水平;miR-18a mimic、mimic Con、miR-18a inhibitor和inhibitor Con转染至细胞,孵育48 h后,通过蛋白免疫印迹、MTT和transwell实验分析miR-18a对A549细胞增殖、迁移的影响。通过双荧光素酶报告基因分析miR-18a与PI3K的靶向作用。最后通过同时干扰miR-18a和PI3K的表达研究miR-18a与PI3K/AKT信号通路在A549细胞转移中的作用。[结果]miR-18a在肿瘤组织中的平均表达水平高于邻近正常组织(1.75±0.13 vs 0.62±0.11,P<0.01)。miR-18a在癌细胞系中的表达水平均高于正常细胞系中的水平(1.35±0.03 vs 0.53±0.07,P<0.01)。miR-18a能够促进A549细胞迁移和增殖(250.15±10.12 vs 101.12±10.03;1.51±0.02 vs 0.63±0.03,P<0.01),并增加Ki-67蛋白的表达水平(0.85±0.02 vs 0.43±0.06,P<0.01)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,miR-18a靶向调控PI3K的表达,并且miR-18a能够通过PI3K/AKT通路影响A549细胞的体外转移活性。[结论]PI3K是miR-18a的直接靶点,miR-18a通过PI3K/AKT信号通路促进非小细胞肺癌细胞的体外转移活性。
