透射和散射比浊法测定血清免疫球蛋白的评价

目的对同一临床实验室采用透射比浊和散射比浊法测定血清免疫球蛋白IgA、IgG和IgM结果偏差进行评估。方法按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9A文件,以散射比浊为比较方法,透射比浊为实验方法进行对比及偏差评估,将测定数据进行相关分析,并对两分析系统之间的预期偏差进行评估。结果IgA、IgG两法各浓度值测定结果的预期偏差均可以接受;IgM浓度为1.0g/L时,两法测定结果的预期偏差不能接受,其余浓度值测定结果的预期偏差可以接受。结论在使用性能较好的全自动生化分析仪及配套试剂的前提下,透射比浊法测定血清IgA、IgG和IgM的结果与散射比浊法的测定结果基本一致。

应用ROC曲线评价心肌钙蛋白T在急性心肌梗死诊断中的临床准确性

目的 应用临床诊断性能 (ROC)曲线评价心肌钙蛋白T(cTnT)在急性心肌梗死 (AMI)诊断中的临床准确性。方法 电化学发光免疫分析法测定病例组及健康对照组的血清cTnT ,所得数据用ROC曲线统计软件进行分析。结果 cTnT在AMI诊断中的ROC曲线图左上方最高点为 0 .0 4 μg/L ,其诊断敏感度 91% ,特异度92 %。结论 cTnT在AMI诊断中的最佳临界值为 0 .0 4 μg/L ,比生产厂商提供的诊断临界值 0 .1μg/L低 ,故生产厂商提供的诊断临界值只能作为参考 ,各临床实验室应根据各自的方法学 。

老年非酒精性脂肪肝患者血清IL-17和TGF-β水平及相关性

目的探讨白介素(IL)-17和转化生长因子(TGF)-β在老年非酒精性脂肪肝患者中检测的临床意义。方法共纳入86例老年非酒精性脂肪肝患者作为病例组,同时随机抽取无肝功能损害的人群60例作为对照组。所有受试者均空腹抽取肘静脉血,采用酶联免疫吸附法检测IL-17和TGF-β水平,比较两组的差异。结果与正常对照组相比,病例组患者的IL-17、TGF-β、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平均明显比较高,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显比较低(P<0.05);IL-17及TGF-β水平与LDL-C、TG、TC水平呈正相关关系,与HDL-C呈负相关关系,IL-17相关系数分别为0.73、0.73、0.77、0.76,TGF-β相关系数分别为0.76、0.77、0.76、0.78(均P<0.01)。结论非酒精性脂肪肝患者IL-17及TGF-β水平明显升高,可能在非酒精性脂肪肝的发病机制中有重要作用,可以作为辅助诊断非酒精性脂肪肝的标记物之一,值得临床推广应用。

聚蛋白多糖基因多态性与膝骨关节炎的相关性

目的探索聚蛋白多糖基因多态性与膝骨关节炎(OA)的相关性,为早期发现骨性关节炎的高危人群及开展新的临床诊治和预防措施提供理论基础和实践依据。方法选取单关节OA患者80例,同时设健康对照组30例。应用PCR技术扩增两组基因组DNA中的聚蛋白多糖基因,以琼脂糖凝胶电泳测PCR产物的基因条带,观察其多态性。结果正常人等位基因的重复数目以28、29为主,OA组在重复序列数目以26、27、28频率为主,其他重复序列数目无统计学意义。结论聚蛋白多糖基因的CS1结构域基因缩短可能与关节退行性改变有关。

4种尿微量蛋白联合检测对2型糖尿病肾病改变的临床诊断的应用评价

目的进行4种尿液微量蛋白:尿转铁蛋白(UTRF)、尿免疫球蛋白G(UIgG)、尿微量清蛋白(UmALB)、尿α1-微球蛋白(Uα1-M)的联检,观察其在2型糖尿病(T2DM)肾病改变的变化,探讨其临床诊断价值。方法采用速率散射比浊法测定UTRF、UIgG、Uα1-M、UmALB的浓度,分析其在T2DM肾病改变中的变化。结果 T2DM肾病改变组的4种尿液微量蛋白UTRF、UIgG、Uα1-M、UmALB测定结果的中位数、数据范围,较T2DM无肾病改变组有明显增高;各项指标两两比较的秩和检验结果显示:P=0.00,差异有统计学意义。结论 4种尿液微量蛋白的联检,可有效提高对T2DM肾病改变的检出率,在其早期诊断、及时治疗、病程监测、预后判断中具有临床应用价值。

非霍奇金淋巴瘤化疗后^(99m)Tc-MIBI显像的价值

目的:了解甲氧基异丁基异腈(99m Tc-MIBI)显像在非霍奇金淋巴瘤(NHL)化疗过程中监测疗效的价值。方法:17例NHL患者化疗后行99m Tc-MIBI SPECT/CT扫描;用软件Image J计算NHL病灶(T)与双肩三角肌中部(NT)的MIBI摄取亮度比值T/NT%和滞留指数(RI);用免疫组化检测化疗前NHL病灶的多药耐药相关蛋白(MRP1)和P-糖蛋白(P-gp)含量。结果:NHL病灶化疗后,T/NT%和RI与化疗疗程均呈正相关(P=0.046和0.003);完全缓解组5例比部分缓解组12例的T/NT%显著降低(P=0.044);化疗前MRP1和P-gp含量分别与化疗后T/NT%和RI均呈反相关(P=0.049和0.022)。结论 :一般而言,化疗疗程越多、化疗疗效越差的NHL病灶摄取MIBI越少,但化疗前病灶P-gp和MRP1蛋白含量越高,化疗过程中摄取MIBI越多,化疗疗效越差。

Th17相关细胞因子在丙型肝炎患者血清中的变化及意义

目的研究Th17细胞相关的主要细胞因子IL-17、IL-6和TGF-β在丙型肝炎患者外周血中的表达情况并分析与患者临床特征的相关性,初步探讨Th17细胞在丙型肝炎病理过程中的作用.方法收集54例丙型肝炎患者做为阳性组,并以40例正常志愿者为对照组.采用ELISA方法检测外周血血清中IL-17、IL-6、TGF-β的含量,同时测定HCV-RNA和肝功能指标ALT、AST、TBil、ALB等.结果研究发现,丙型肝炎患者外周血中IL-17、IL-6和TGF-β水平明显高出对照组(P=0.004,P=0.018,P=0.025).IL-17的升高与IL-6和TGF-β相关(r=0.664,P=0.00,r=0.511,P=0.00).IL-17水平与ALT,AST和HCV-RNA相关(r=-0.52,P=0.01;r=-0.282,P=0.005,r=-0.209,P=0.037),但是TGF-β、IL-6均与ALT,AST或HCV-RNA没有明显的相关性,IL-6浓度与TGF-β有关(r=0.807,P=0.00).结论丙型肝炎患者外周血中Th17相关细胞因子表达增高,特别是IL-17与患者ALT、AST以及病毒载量相关,而且增高的IL-17与血清IL-6、TGF-β水平密切相关.提示Th17细胞参与了丙型肝炎的免疫学发病机制.

乙型肝炎基因分型的研究进展

乙型肝炎（简称乙肝）病毒（HBV）感染是严重的公共卫生问题,全球约20亿人感染过HBV,其中3.5亿人成为了慢性HBV感染者[1],约15%~40%的HBV感染者最终发展成为了肝硬化或肝癌[2],全球每年约100万人死于乙肝所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌。HBV的感染呈地方性流行,超过75%的HBV感染者分布于西太平洋地区和东南亚国家,乙肝表面抗原（HBsAg）携带率在西欧、北美仅0.1%~0.9%,而在亚洲国家高达5%~10%。

云南省妇科门诊女性HPV检测结果分析

目的了解21种人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)型别在云南省妇科门诊人群中的感染情况及型别分布和年龄分布等特点.方法应用基于膜杂交的低密度基因芯片技术对2 221例标本进行分型检测,所得数据用SPSS软件进行统计分析.结果 HPV总感染率为20.76%,高危型HPV感染率18.21%.21种基因型全部检出,其中单一型别感染率为16.21%,2型混合感染率为3.60%,3型(包括3型)以上多重感染率为0.95%.HPV亚型感染率最高的分别是HPV52型4.73%,HPV16型4.05%,HPV58型2.70%,CP8304型2.39%,HPV33型1.53%;各年龄组HPV阳性率组间比较差异无显著性(χ2=9.448,P=0.092).结论本地区人群HPV感染率较高,且以单一亚型感染为主,其中HPV52为高危型HPV感染最主要的型别,低危型HPV感染以CP8304型为主;HPV感染是各年龄段女性共同的致病因素.

昆明地区患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒基因分型研究

目的分析患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒(HPV)的基因分型。方法该地区确诊为尖锐湿疣的性工作者78例,采用核酸分子快速杂交基因芯片技术对尖锐湿疣患者进行HPV分型检测。结果 78例患者中HPV-DNA阳性率88.5%(69/78),其中男性阳性率为97.8%(45/46),女性阳性率为75.0%(24/32),男性与女性的HPV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(χ2=9.633,P<0.05)。69例HPV-DNA阳性标本总共检出10个HPV亚型,分别为6、11、18、16、53、58、31、52、39、33亚型,检出率最高的亚型为6型,其次为11亚型。69例HPV-DNA阳性标本中,单一亚型感染43例,占62.3%;2个亚型感染(二重感染)26例,占37.7%。45例男性HPV-DNA阳性标本中二重感染12例,占26.7%;24例女性HPV-DNA阳性标本中二重感染14例,占58.3%,不同性别的HPV-DNA阳性标本二重感染所占比例比较差异有统计学意义(χ2=6.693,P<0.05)。结论该地区患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒基因分型以低危型6型、11型为主。

两种国产HBV-DNA荧光定量PCR试剂盒检测结果比较

目的探讨两种国产乙型肝炎病毒(HBV)DNA荧光定量试剂的临床检测结果相互之间是否存在差异。方法 80例慢性乙型肝炎患者标本分别用两种国产HBVDNA荧光定量试剂检测,然后对检测结果进行比较,分析相互之间是否存在差异。结果 A、B两种国产荧光定量试剂的HBVDNA定量检测结果相互之间相差小于一个数量级的占95%,大于一个数量级小于两个数量级的占5%。经统计学分析,差异无统计学意义(P=0.883)。40例A试剂检测完全阴性的标本有6例经B试剂检测为阳性,B试剂检测的阳性率高于A试剂(P=0.034)。结论两种国产试剂对于定量结果大于3次方的标本具有很好的可比性。

三种肿瘤标志物和七种酶活性的检测在肝脏肿瘤诊断中的应用价值分析

目的对肿瘤相关抗原甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)及肿瘤标志物糖类抗原(CA199)和多种酶活性乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、胆碱脂酶(CHE)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)的检测及在肝脏肿瘤诊断中的应用价值进行分析。方法采用电化学发光免疫分析法及日立-7600生化分析系统,测定肝脏恶性肿瘤患者及良性疾病患者血清的CEA、AFP、CA199和LDH等7种酶活性,以探讨其在肝脏肿瘤诊断中的应用价值。结果检测指标AFP、CEA、CA199、LDH、AST、ALT、AKP、-γGT、CHE、GLDH在肝脏恶性肿瘤患者中的阳性检出率分别为75.5%、65.3%、46.9%、59.1%、83.7%、75.5%、61.4%、95.3%、59.1%和72.4%;在良性疾病患者中的阳性检出率分别为18.9%、56.8%、13.5%、18.8%、75.0%、61%和45.4%、68.8%、66.7%和19.4%。结论联合检测肿瘤标志物AFP、CEA及CA199可提高肝脏恶性肿瘤诊断的阳性率,结合检测不同酶活性的改变,可提高肝脏恶性肿瘤的诊断价值及预后判断。

ADAMTS-4在膝骨关节炎关节液中的表达和意义

目的探讨ADAMTS-4在膝骨关节炎(OA)关节液中的表达和意义.方法单侧膝OA87例中,早期为45例,中晚期为42例.检测其患侧膝关节液中ADAMTS-4水平.以健康志愿者30例为正常对照组.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ADAMTS-4在关节液中的表达,以ELISA光密度(OD)值代表所测各项在关节液中的表达水平.结果膝OA患者关节液中ADAMTS-4表达水平均高于正常对照组(P<0.05);而正常对照组关节液中仅有少量聚蛋白多糖酶的表达.结论 ADAMTS-4水平在膝OA早期和中晚期关节液中均有高表达,检测关节液中ADAMTS-4表达水平有助于病情早期诊断.

心肌标志物在急性心肌梗死诊断中的临床应用研究

目的应用临床诊断性能曲线(ROC)评价心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白(Myo)和肌酸激酶同工酶质量(CK MBmass)在急性心肌梗死诊断中的临床决定限。方法电化学发光免疫分析法测定病例组及对照组的血清cTnT、Myo和CK MBmass,所得数据用ROC曲线统计软件进行分析。结果入院即刻血清cTnT诊断急性心肌梗死(AMI)的最佳临界值为0.042μg/L,诊断特异性93%、敏感性92%;CK MBmass的临界值为5.37μg/L,诊断特异性88%;Myo的临界值为62.8μg/L,诊断特异性为74%、敏感性为72%。急性心肌梗死(AMI)患者胸痛发作6h内Myo的诊断敏感性较高(90.0%),cTnT其次(76.7%),CK MBmass最低(73.3%);6h后Myo诊断敏感性仅为58.3%;cTnT上升为91.7%,CK MBmass仍为75.0%。结论cTnT不论是曲线下面积、诊断敏感性、特异性及准确性等方面都明显优于CK MBmass和Myo,是诊断急性心肌损伤的“金标准”。

聚蛋白多糖酶与膝骨关节炎相关性研究

目的观测并探讨膝骨关节炎关节液及血清中聚蛋白多糖酶(ADAMTSs)水平与病变程度的关系。方法单侧膝骨关节炎87例中,早期为45例,中晚期为42例。检测其患侧膝关节液和血清中ADAMTSs水平。以健康志愿者30例为正常对照组。结果膝骨关节炎患者关节液及血清中AD-AMTSs水平均高于正常对照组,随着病变程度加重,膝关节液及血清中ADAMTSs水平显著增加,关节液与血清中ADAMTSs水平存在线性相关关系。结论 ADAMTSs水平在骨关节炎患者膝关节液和血清中均升高,与病变程度密切相关,检测关节液及血液该种指标有助于病情早期诊断。

合胞素通过促进线粒体去极化诱导小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞凋亡

目的探讨人类内源性病毒W家族囊膜蛋白合胞素(syncytin)对白血病细胞凋亡的影响及其信号机制。方法对小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞稳转表达合胞素,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期及线粒体膜电位情况,用试剂盒检测PKC和Caspase-3活性。结果合胞素稳定过表达后,EL4细胞形态和PKC活性无明显改变,细胞凋亡明显增加,线粒体膜电位去极化增加,Caspase-3活性增强。结论合胞素可诱导小鼠淋巴瘤细胞EL4细胞线粒体途径细胞凋亡,在白血病的发生发展过程中发挥重要作用。

Syncytin蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定

目的克隆人syncytin基因并在大肠杆菌中表达,并用表达后的融合蛋白制备syncytin蛋白多克隆抗体。方法 PCR扩增人syncytin基因编码区的DNA片段,将其克隆入原核表达质粒pET30a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导产生syncytin-His融合蛋白。采用割胶回收的方法纯化目的蛋白,免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体。通过ELISA、Western-Blot和免疫组织化学等方法来检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功表达并纯化了syncytin-His融合蛋白,SDS-PAGE分析表明融合蛋白主要以包涵体形式存在;ELISA法测定抗体效价为1:10 000;Western-Blot和免疫组织化学结果显示所制备的抗体能特异性识别syncytin蛋白。结论成功制备和鉴定了人syncytin多克隆抗体,多克隆抗体特异性强和效价高,为下一步研究Syncytin的生物学功能奠定了基础。

心肌钙蛋白T在急性冠状动脉综合征临床分型和危险分层中的应用

目的探讨血清心肌钙蛋白T(cTnT)在急性冠状动脉综合征(ACS)临床分型和危险分层中的作用,评价cTnT水平与ACS的危险程度、心脏事件的发生率及预后的相关性。方法应用电化学发光免疫分析法检测急性心肌梗死(AMI)患者血清cTnT水平,临床诊断性能(ROC)曲线确立cTnT在AMI诊断中的决定限。结果用cTnT升高与否来判断ACS患者是否发生AMI,其诊断敏感性为100%,特异性为95.3%,AMI患者cTnT水平与其危险性相关。结论根据cTnT水平进行ACS的临床分型,能快速、准确的诊断非ST段抬高的AMI,比采用传统分型更科学、可靠与实用,更符合疾病发生的病理生理和临床特征。

聚蛋白多糖酶在膝骨关节炎不同时期关节液中的表达

目的:探讨ADAMTS-4、ADAMTS-5在膝骨关节炎不同时期关节液中的表达。方法:收治膝骨关节炎患者124例,包括早期膝骨关节炎45例、中期膝骨关节炎42例、晚期膝骨关节炎37例。检测患者膝关节液中ADAMTS-4及ADAMTS-5表达水平。结果:ADAMTS-5在早、晚期膝骨关节炎组的表达量高于中期膝骨关节炎组的表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。ADAMTS-4在早期膝骨关节炎组的表达量显著高于中、晚期膝骨关节炎组的表达量(P<0.01)。结论:关节液中ADAMTS-4、ADAMTS-5表达水平有助于诊断早期膝骨关节炎。

β-连环蛋白与膝骨关节炎相关性研究

目的探讨膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者患侧膝关节液及血清中β-连环蛋白(β-catenin)表达水平与病变程度的关系.方法 KOA患者65例作为研究对象,其中早期组30例,中晚期组35例,并以30例健康志愿者为对照组,用ELISA法检测膝关节液和血清中β-catenin的水平.结果 KOA患者关节液和血清中β-catenin的表达均高于对照组,且随着病变程度的加重,膝关节液和血清中β-catenin的水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论β-catenin表达水平在KOA患者关节液和血清中均升高,且与病变程度呈正相关,总之,β-catenin的高表达与骨关节炎的发生发展密切相关.