鉴定血管加压素受体(V1aR)在小鼠肝脏枯否细胞和巨噬细胞中的表达

为了研究V1aR在肝脏枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达,为今后研究V1aR表达与巨噬细胞功能间的关系奠定基础,本研究首先使用胶原酶灌注法和磁珠分选法(MACS)分离纯化小鼠肝脏枯否细胞;然后分别使用普通显微镜、透射电镜和流式细胞仪对分离纯化后枯否细胞的纯度与功能进行评估;最后使用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)、Western blot和免疫荧光检测V1aR在肝脏枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达。普通显微镜和透射电镜结果表明本研究分离纯化后的桮否细胞具有巨噬样细胞的形态特征和吞噬活性;且流式细胞仪结果表明本研究分离纯化的枯否细胞的纯度可以达到98%以上。RT-PCR和Western blot结果表明在mRNA和蛋白质水平均能检测到V1aR在枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达。同时免疫荧光实验进一步验证了V1aR在巨噬细胞RAW264.7中的表达。总之,本研究首次鉴定到了血管加压素受体V1aR在巨噬样细胞中的表达。

S100A9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9。融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb。采用ELISA和Western blot法鉴定筛选抗体。挑取杂交瘤细胞株制备腹水并纯化,采用Western blot法和间接免疫荧光染色鉴定mAb的特异性。结果 GST-S100A9和His-S100A9融合蛋白均成功构建表达。共筛选到抗S100A9杂交瘤细胞18株,其中15株在Western blot检测中与重组蛋白呈强阳性反应,3株呈弱阳性反应。2株可识别肝癌组织间隙液中的S100A9天然蛋白。结论成功地制备出多株抗S100A9的mAb。

高速超短冷床在轧材生产线上的应用

随着锻压厂半连轧生产线自我改造的逐步成功，终轧线速度已达12m/s，初步形成年产30万吨生产规模。为跟倍尺飞剪相配套，我们厂对原冷床进行了探索性改造，并取得较为理想的效果。

改X63W铣床加工螺纹辊的实践与应用

本文介绍了如何改造X63W铣床来加工螺纹轧辊的工作原理及其实施效果。

班组建设带动企业管理上水平

近年来，山东莱钢集团棒材厂坚持以科学的发展观统领全局，把创建学习型班组作为重点，取得了显著效果。该厂先后被评为山东省劳动关系和谐企业、“全国模范职工之家”、“全国文明单位”等荣誉称号。