FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定

利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,q PCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高。FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础。